ABSTRACT
An efficient in vitro protocol was standardized for Almond (Prunus dulcis) propagation using dormant axillary buds as explants. Explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) and woody plant medium (WPM) supplemented with different concentration/combination(s) of phytohormones. MS basal medium showed lowest shoot induction and took longest duration for shoot initiation. Multiple shoots were induced in MS medium supplemented with the combination of BAP (0.5 mgL-1). Cultures showed poor response for rooting in all combinations of plant growth regulators (PGRs) and took 90 days for initiation. Rooting was higher in half strength of MS than in full-strength. The highest root induction (33.33%) was recorded in half MS medium supplemented with 0.1 mgL-1 IBA (indole-3-butyric acid) followed by full strength of MS medium (20%) supplemented with IBA (0.1 mgL-1). α-Naphthalene acetic acid (NAA) was less effective for rooting than IBA. The highest root induction (25%) was found in half strength of MS medium supplemented with 0.1 mgL-1 NAA followed by full strength of MS medium (20%). The protocol developed would be of use in mass propagation of almond and also support in vitro conservation.
ABSTRACT
El objetivo del presente trabajo fue aplicar un técnica para determinar y cuantificar por separado los compuestos cianogénicos que pueden estar presentes en la semilla de almendra madura (Prunus dulcis). Entre los métodos encontrados, se seleccionó la cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), que permite la cuantificación de los glucósidos cianogénicos amigdalina y prunasina por separado, adecuando diferentes procedimientos de extracción como el tamaño de partículas que influye en el proceso de liofilización, donde a menor superficie mayor área de contacto para la sublimación. Se ensayaron muestras sin grasa y con grasa, utilizando los resultados con muestras con grasa, dados los resultados obtenidos. Se utilizó metanol 100% como extractante de los glucósidos cianogénicos, resultando una concentración de amigdalina máxima a partir un tiempo de extracción de 12 horas y como fase móvil acetonitrilo/agua (20:80), se obtiene amigdalina, con una concentración de 9,8 mg/100g de muestra seca. Los cromatogramas obtenidos presentan tiempo de retención (Tr), Amigdalina: 3,4 y Prunasina, 5,7, dos picos con excelente resolución, por lo tanto las condiciones anteriores se pueden utilizar para la identificación y cuantificación de amigdalina y prunasina.
The aim of this study was to apply a technique to identify and quantify separately also cyanogenic compounds that may be present in the mature seed almond (Prunus dulcis). Among the methods selected the chromatography of liquids of high resolution (HPLC), that permit the quantification of the glycosides for the separation process of Freeze Dry where there is less surface there is more contact to sublimation without fat samples, looking at the obtain results and supported by other investigations, the use of 100 % methanol extract as a mobile phase acetonitrile-water (80:20) the results obtained of the glycosides cyanogenics resulting in a concentration of maximum amygdalin from the time of extraction of twelve hours, amygdalin is obtained, with a concentration of 9,8 mg / 100 g of dry sample. The chromatograms obtained a time of retention (Tr), amygdalin 3,4 and prunasin 5,7 two peaks with excellent resolution, to the above conditions can be used for analysis by HPLC, identification and quantification of amygdalin and prunasina.
Neste trabalho, a técnica é aplicada para determinar e também para quantificar separadamente compostos cianogénicos que podem estar presentes na semente madura amêndoa (Prunus dulcis). Métodos encontrados é seleccionado de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), que permite a quantificação dos glicosídeos separar adaptar diferentes técnicas de extracção, tais como o tamanho de partícula influencia o processo de liofilização, onde a área de superfície maior menor sublimação contacto com desengradas amostras de gordura e usando os resultados com amostras desengorduradas, Tendo em vista os resultados obtidos, e suportados por outras pesquisas metanol a 100 % foi usado como o agente de extracção e como fase móvel acetonitrilo/água (80:20) de glicósidos cianogénicos, resultando numa concentração elevada de amigdalina a partir de um tempo de extracção de 12 horas. Amigdalina é obtido, com uma concentração de 9,8 mg / 100 g de amostra seca. Os cromatogramas apresentados tempo de retenção (Tr), Amygdalin: 3,4 e prunasina 5,7 dois picos com excelente resolução, com as condições acima podem ser utilizados para a análise por HPLC. identificação e quantificação de amigdalina e prunasina.
ABSTRACT
El objetivo del presente trabajo fue aplicar un técnica para determinar y cuantificar por separado los compuestos cianogénicos que pueden estar presentes en la semilla de almendra madura (Prunus dulcis). Entre los métodos encontrados, se seleccionó la cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), que permite la cuantificación de los glucósidos cianogénicos amigdalina y prunasina por separado, adecuando diferentes procedimientos de extracción como el tamaño de partículas que influye en el proceso de liofilización, donde a menor superficie mayor área de contacto para la sublimación. Se ensayaron muestras sin grasa y con grasa, utilizando los resultados con muestras con grasa, dados los resultados obtenidos. Se utilizó metanol 100% como extractante de los glucósidos cianogénicos, resultando una concentración de amigdalina máxima a partir un tiempo de extracción de 12 horas y como fase móvil acetonitrilo/agua (20:80), se obtiene amigdalina, con una concentración de 9,8 mg/100g de muestra seca. Los cromatogramas obtenidos presentan tiempo de retención (Tr), Amigdalina: 3,4 y Prunasina, 5,7, dos picos con excelente resolución, por lo tanto las condiciones anteriores se pueden utilizar para la identificación y cuantificación de amigdalina y prunasina.
The aim of this study was to apply a technique to identify and quantify separately also cyanogenic compounds that may be present in the mature seed almond (Prunus dulcis). Among the methods selected the chromatography of liquids of high resolution (HPLC), that permit the quantification of the glycosides for the separation process of Freeze Dry where there is less surface there is more contact to sublimation without fat samples, looking at the obtain results and supported by other investigations, the use of 100 % methanol extract as a mobile phase acetonitrile-water (80:20) the results obtained of the glycosides cyanogenics resulting in a concentration of maximum amygdalin from the time of extraction of twelve hours, amygdalin is obtained, with a concentration of 9,8 mg / 100 g of dry sample. The chromatograms obtained a time of retention (Tr), amygdalin 3,4 and prunasin 5,7 two peaks with excellent resolution, to the above conditions can be used for analysis by HPLC, identification and quantification of amygdalin and prunasina.
Neste trabalho, a técnica é aplicada para determinar e também para quantificar separadamente compostos cianogénicos que podem estar presentes na semente madura amêndoa (Prunus dulcis). Métodos encontrados é seleccionado de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), que permite a quantificação dos glicosídeos separar adaptar diferentes técnicas de extracção, tais como o tamanho de partícula influencia o processo de liofilização, onde a área de superfície maior menor sublimação contacto com desengradas amostras de gordura e usando os resultados com amostras desengorduradas, Tendo em vista os resultados obtidos, e suportados por outras pesquisas metanol a 100 % foi usado como o agente de extracção e como fase móvel acetonitrilo/água (80:20) de glicósidos cianogénicos, resultando numa concentração elevada de amigdalina a partir de um tempo de extracção de 12 horas. Amigdalina é obtido, com uma concentração de 9,8 mg / 100 g de amostra seca. Os cromatogramas apresentados tempo de retenção (Tr), Amygdalin: 3,4 e prunasina 5,7 dois picos com excelente resolução, com as condições acima podem ser utilizados para a análise por HPLC. identificação e quantificação de amigdalina e prunasina.