Effects of the presence of litter on the composition of stream tadpoles' assemblages in an Atlantic Forest remnant of southeastern Brazil / Efeitos da presença de serapilheira na composição de assembleias de girinos de riacho em um remanescente de Mata Atlântica do sudeste do Brasil

Abstract: Many tropical anurans use forest streams to deposit their eggs, but resource use and selection by tadpoles in tropical forests are poorly known. In the present research, we hypothesized that leaf litter and water depth affect tadpole assemblages due to adult habitat selection for oviposition and/or microhabitat selection by tadpoles. Fieldwork was carried out in the Estação Biológica de Boracéia, an Atlantic Rainforest reserve in São Paulo state, southeastern Brazil. We sampled tadpoles during a year using 40 double-entry funnel-traps distributed along four streams in the forest. Only leaf litter effects are species dependent. We discussed that habitat structure significance depends on the morphological and ecological adaptation to forage and avoid competition within the tadpole community.

Resumo: Uma variedade de espécies de anuros tropicais usa riachos da floresta para depositar seus ovos, mas o uso e a seleção de recursos por girinos em florestas tropicais são pouco conhecidos. Na presente pesquisa, nossa hipótese era a de que a presença de serapilheira e a profundidade das poça dos riachos influenciam a presença de girinos devido à seleção de habitats de ovipostura pelos adultos e/ou seleção de micro-habitats pelos girinos. O trabalho de campo foi realizado na Estação Biológica de Boracéia, uma reserva de Mata Atlântica no estado de São Paulo, sudeste do Brasil. Amostramos girinos durante um ano usando 40 armadilhas-de-funil de dupla entrada distribuídas ao longo de quatro riachos na floresta. Apenas os efeitos da presença de serapilheira foram significativos Nós discutimos as relações entre a estrutura do habitat e características morfológicas, ecológicas e adaptações para procura de alimento e para evitar competição no interior da comunidade de girinos.

Composition and diversity of anurans in the largest conservation unit in Pampa biome, Brazil / Composição e diversidade de anuros da maior unidade de conservação no bioma Pampa, Brasil

Grassy biomes occupy about 20% of the earth's surface, and are characteristic of northern Australia, Africa and South America, being biodiversity in these environments poorly understood. The Área de Proteção Ambiental (APA) do Ibirapuitã includes areas with the best-preserved grassland areas in the Pampa biome in Rio Grande do Sul state, Brazil. This study aimed to determine anuran species richness, abundance, constancy of occurrence, and reproductive modes, and to compare the taxonomic composition in the APA with other localities within the grassland areas of the southernmost of South America. We collected frogs from September to November 2012 and in November 2013 by sampling of reproductive sites. We also examined specimens deposited in herpetological collections. In total, 32 frog species were identified from the combination of larval and adult sampling and analysis of specimens deposited in scientific collections. The registered anurofauna is typical of grassland areas, with at least 10% restricted to the subtropical region of South America and at least two species considered endangered in state and global scales. The most abundant species was Pseudopaludicola falcipes and Hypsiboas pulchellus was the species most frequently found among sites. Five reproductive modes were recorded, and the most common mode consists of development of exotrophic tadpole and deposition in to lentic bodies of water (57.5%). Cluster analysis of 16 communities representing grassland locations presented five groups with more than 50% similarity, whose structure was influenced by geographic distance but can be partially interpreted by regional peculiarities (e.g. height and phytophysiognomies). Our results consist of initial knowledge base on the anurofauna of APA do Ibirapuitã, supporting recommendations for future conservation actions to APA and also for the grassland biomes, which are increasingly threatened by human activities.

Biomas campestres ocupam cerca de 20% de toda a superfície terrestre, e são característicos do norte da Austrália, África e América do Sul, sendo a biodiversidade nesses ambientes pobremente conhecida. A Área de Proteção Ambiental (APA) do Ibirapuitã possui as áreas de campo mais bem preservadas do bioma Pampa no Rio Grande do Sul, Brasil. Este estudo objetivou determinar a riqueza de espécies de anuros, abundância, constância de ocorrência, modos reprodutivos e comparar a composição taxonômica da APA com outras localidades inseridas em áreas campestres do extremo sul da América do Sul. Nós coletamos os anuros de setembro a novembro de 2012 e novembro de 2013, utilizando o método de busca em sítios de reprodução. Nós também examinamos espécimes em coleções herpetológicas. No total, registramos 32 espécies de anuros pela combinação da amostragem de larvas, adultos e análise de espécimes depositados em coleções científicas. A anurofauna registrada é típica de áreas campestres, com pelo menos 10% das espécies restritas è região subtropical da América do Sul e pelo menos duas espécies consideradas ameaçadas em escala estadual e global. Pseudopaludicola falcipes foi a espécie mais abundante e Hypasiboas pulchellus a mais frequentemente encontrada nos sítios amostrados. Cinco modos reprodutivos foram registrados, sendo o modo mais comum a deposição e desenvolvimento de larvas exotróficas em corpos d'água lênticos (57,5%). A análise de similaridade entre as 16 comunidades representando localidades campestres, apresentou cinco grupos com mais de 50% de similaridade, cuja estrutura foi influnciada pela distância geográfica, mas pode ser parcialmente interpretada por peculiaridades regionais (e.g. altitude e fitofisionomias). Nossos resultados representam uma base inicial de dados sobre a anurofauna da APA do Ibirapuitã, bem como incluem recomendações para futuras ações de conservação dos biomas campestres, que são cada vez mais ameaçados pelas atividades humanas.

Effects of the organophosphorus pesticide Folisuper 600 (methyl parathion) on the heart function of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802) / Efeitos do pesticida organofosforado Folisuper 600 (metil paration) sobre a função cardíaca de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802)

Abstract The aim of this work was to evaluate whether the heart function of bullfrog tadpoles (25 Gosner stage) is affected by their acute exposure (48 h) to a sub-lethal concentration (10 µg.L–1) of the active principle of the organophosphorus pesticide Folisuper 600R (methyl parathion - MP). Our results demonstrated that MP causes not only a reduction in tadpoles’ cardiac ventricular mass, resulting in a marked reduction in their cardiac twitch force, but also impairs their swimming performance, irrespective of increasing their heart rate. Together, these findings indicate that low and realistic concentration of MP have a negative impact on tadpoles’ performance, jeopardizing their survival.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar se a função cardíaca de girinos de rãs-touro (estágio 25 de Gosner) é afetada pela exposição aguda (48h) a uma concentração sub-letal (10 µg.L–1) do princípio ativo do pesticida organofosforado Folisuper 600R (metil paration – MP). Nossos resultados demonstraram que o MP ocasionou não apenas uma redução na massa ventricular cardíaca dos girinos, como também provocou uma redução na sua força de contração cardíaca e de seu desempenho natatório, a despeito de ter sido observado um aumento de sua freqüência cardíaca. Conjuntamente, os achados aqui obtidos indicam que uma baixa e realística concentração de MP exerce um impacto negativo sobre o desempenho dos girinos, ameaçando sua sobrevivência.

Effects of the organophosphorus pesticide Folisuper 600 (methyl parathion) on the heart function of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802)

Abstract The aim of this work was to evaluate whether the heart function of bullfrog tadpoles (25 Gosner stage) is affected by their acute exposure (48 h) to a sub-lethal concentration (10 µg.L1) of the active principle of the organophosphorus pesticide Folisuper 600R (methyl parathion - MP). Our results demonstrated that MP causes not only a reduction in tadpoles cardiac ventricular mass, resulting in a marked reduction in their cardiac twitch force, but also impairs their swimming performance, irrespective of increasing their heart rate. Together, these findings indicate that low and realistic concentration of MP have a negative impact on tadpoles performance, jeopardizing their survival.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar se a função cardíaca de girinos de rãs-touro (estágio 25 de Gosner) é afetada pela exposição aguda (48h) a uma concentração sub-letal (10 µg.L1) do princípio ativo do pesticida organofosforado Folisuper 600R (metil paration MP). Nossos resultados demonstraram que o MP ocasionou não apenas uma redução na massa ventricular cardíaca dos girinos, como também provocou uma redução na sua força de contração cardíaca e de seu desempenho natatório, a despeito de ter sido observado um aumento de sua freqüência cardíaca. Conjuntamente, os achados aqui obtidos indicam que uma baixa e realística concentração de MP exerce um impacto negativo sobre o desempenho dos girinos, ameaçando sua sobrevivência.

Bioacumulación ee mercurio en larvas de anuros n la zona afectada por la minerría de oro en el río dagua, buenaventura, valle del cauca, Colombia / Mercury Bioaccumulation on Tadpoles of a Gold Mining Zone in Dagua River, Buenaventura, Valle del Cauca, Colombia

Los anfibios, particularmente en sus estados larvales, tienen una gran sensibilidad a la concentración de contaminantes; por lo que se han convertido en una herramienta indicadora para evaluar cómo las diferentes actividades humanas afectan los ecosistemas acuáticos. Debido a esto se utilizaron larvas de anuros como bioindicadores en la zona del medio Dagua, en el corregimiento de Zaragoza, donde la actividad minera ha liberado contaminantes al río Dagua (metales pesados principalmente). Utilizando la técnica de espectrofotometría por absorción atómica de vapor frío se midieron las concentraciones de mercurio total en renacuajos de cinco especies, junto con una muestra de sedimentos para cada muestra animal, como un referente ambiental. La evaluación se realizó en dos zonas con diferente grado de intervención y se reportan rangos de concentración de mercurio que van desde 0,07 hasta 0,24 µg/g y desde 0,07 hasta 0,17 µg/g para la zona de alto impacto y de impacto desconocido respectivamente. Pese a que las concentraciones encontradas no superan límites establecidos por las autoridades ambientales, es evidente que en la zona se desarrollan procesos de bioacumulación, porque las concentraciones en los organismos siempre fueron mayores a las del ambiente, de hecho, significativamente diferentes (M-W Utest, p = 0,001), por lo que se propone la implementación de programas de biomonitoreo y bioremediación en la zona, teniendo en cuenta que los renacuajos son principalmente consumidores de primer orden y al incorporarse en la cadena trófica las cargas contaminantes entrarían en procesos de biomagnificación.

Amphibians, particularly larval stages, are strongly sensitive to pollutants, so they have become useful indicators to assess how different human activities affect ecosystems. In this way, tadpoles were used as bioindicators in the Medio Dagua zone, in Zaragoza town, where mining has released pollutants into the Dagua River (mostly heavy metals). Using spectrophotometry by cold vapor atomic absorption, we measured total mercury concentrations in tadpoles of five species, with a sediment sample for each animal sample as an environment reference. The study was realized in two areas with different intervention levels, we report mercury concentration ranges from 0.07 to 0.24 µg/g for high impact zone and from 0.07 to 0.17µg/g for unknown impact zone, these levels do not exceed set limits used by local environmental authorities, however, is evident that bioaccumulation processes are developing in the area because organisms concentrations were always higher than those of the environment, in fact, significantly different (MW Utest, p = 0.001) therefore we propose the implementation of biomonitoring and bioremediation programs in the area, taking in consideration that tadpoles species used here, were mainly first order consumers, and when their mercury concentrations are incorporated into the food chain, these contaminant loads will produce biomagnification processes.

Absence of kin discrimination in cannibalistic Anuran tadpoles of the frog Hoplobatrachus tigerinus (Daudin).

Kin discrimination was tested in the cannibalistic H. tigerinus tadpoles to know whether cannibalism is selectively directed towards non-kin members or it is indiscriminate. The association choice tests were conducted using satiated as well as starved subjects with the assumption that they will associate near non-sibs rather than near sibs with the intention of preferentially cannibalizing them. However, test tadpoles, fed or starved showed a random association choice with sibs and non-sibs, as in the end-bias stimulus blank tests. Therefore it is suggested that cannibalistic H. tigerinus tadpoles do not discriminate sibs from non-sibs and cannibalize on both rather indiscriminately.

Cyanosis by methemoglobinemia in tadpoles of Cochranella granulosa (Anura: Centrolenidae)

Tadpoles inhabit generally well oxygenated rivers and streams, nevertheless they were found in areas with limited oxygen availability inside the rivers. To assess this feature, I examined factors that influence centrolenid tadpole behaviour using Cochranella granulosa. The tadpoles were reared in well-oxygenated and hypoxic environments and their development, survivorship and growth were compared. The tadpoles in oxygenated water acquired a pale color, while tadpoles in hypoxic water grew faster and were bright red and more active. In the oxygenated water, the ammonium, which had its origin in the tadpoles’ urine and feces, was oxidized to nitrate. In contrast, in the hypoxic treatment, the nitrogen compounds remained mainly as ammonium. Presumably, the nitrate in oxygenated water was secondarily reduced to nitrite inside the long intestine coils, because all symptoms in the tadpoles point to methemoglobinemia, which can occur when the nitrite passes through the intestine wall into the bloodstream, transforming the hemoglobin into methemoglobin. This could be checked by a blood test where the percentage of methemoglobin was 2.3% in the blood of tadpoles reared in hypoxic condition, while there was a 19.3% level of methemoglobin in the blood of tadpoles reared in oxygenated water. Together with the elevated content of methemoglobin, the growth of the tadpoles was delayed in oxygenated water, which had high nitrate content. The study about quantitative food-uptake showed that the tadpoles benefit more from the food in hypoxic water, although they spent there more energy moving around than the tadpoles living in oxygenated but nitrate-charged water. Rev. Biol. Trop. 58 (4): 1467-1478. Epub 2010 December 01.

Los renacuajos por lo general viven en ríos y arroyos bien oxigenados, sin embargo, como han sido encontrados en áreas con disponibilidad de oxígeno limitada en los ríos, se estudió como influye este factor en su comportamiento. Renacuajos de Cochranella granulosa fueron criados en ambientes bien oxigenados y de hipoxia para comparar su desarrollo, supervivencia y crecimiento. En el agua que no fue cambiada durante al menos un mes, los renacuajos mostraron diferencias en su desarrollo cuando vivían en agua hipóxica u oxigenada. Los renacuajos en el agua aireada tenían un color pálido, mientras que en la hipóxica fueron más activos y de un color rojo brillante. En el agua hipóxica, el nitrógeno que se originó de la orina y las heces de los renacuajos se mantuvo principalmente en forma de amonio; en cambio, el amonio fue oxidado a nitrato en el agua aireada. Presumiblemente, el nitrato en el agua oxigenada se redujo secundariamente a nitrito dentro del intestino, ya que todos los síntomas en los renacuajos que vivían en esta agua apuntaron a una metahemoglobinemia, que se produce cuando el nitrito pasa a través de la pared del intestino a la corriente sanguínea transformando la hemoglobina en metahemoglobina. Esto pudo comprobarse mediante un análisis sanguíneo en donde el porcentaje de metahemoglobina fue del 2.3% en la sangre de los renacuajos criados en condición hipóxica y de un 19.3% de metahemoglobina en aquellos criados en agua aireada. En la misma forma en que la metahemoglobina aumenta en la sangre de los renacuajos que viven en agua oxigenada, su crecimiento disminuye en agua con alto contenido de nitrato. El estudio cuantitativo de la ingestión de nutrientes mostró que el crecimiento de los renacuajos se beneficia más de los alimentos en agua hipóxica, a pesar de que los renacuajos son más activos en sus movimientos que los que viven en agua oxigenada pero cargada de nitratos.

Water-balance response of Rhinella arenarum (Hensel, 1867) tadpoles to graduated increase in environmental osmolarity / Resposta de Rhinella arenarum larvae a meio electrolítico e não electrolítico com aumento escalonado da osmolaridade

The water balance and the upper limit of osmotic tolerance of premetamorphic Rhinella arenarum larvae (Gosner's stage 26) was evaluated after semistatic incubation in electrolyte (NaCl) and non-electrolyte (mannitol) media following a protocol of progressively increased osmotic pressure. Wet and dry weights were measured to calculate the water content as a derived variable indicative of the hydric balance. Statistical analysis was performed using univariate and integrated multivariate analysis. Tadpoles survived in electrolyte and non-electrolyte solutions up to 200 mOsm. The discriminant function was the best tool to describe the responses of the animals to external environmental stress under experimental conditions. The results were compared with those obtained in previous studies using a protocol of acute exposure to the same media used in this study. It was concluded that a) multivariate analysis is an appropriate approach to describe the responses of tadpoles to changes in the environmental physicochemical parameters, and b) progressive and acute acclimation to the experimental solutions induced similar responses.

Avaliou-se o balanço hídrico e o limite superior de tolerância osmótica em larvas pré-metamórficas do Rhinella arenarum (etapa 26 de Gosner) sob condições de incubação semiestáticas, num meio eletrolítico (NaCl) e não eletrolítico (manitol), seguindo um protocolo de aumento progressivo da pressão osmótica do meio. A quantificação das respostas se efetuou por meio da medição dos valores de peso úmido e seco e do cálculo, a partir destes, do conteúdo de água, como variável derivada indicativa do equilíbrio hídrico. A análise estatística foi realizada usando análise univariada e multivariada. As larvas conseguiram sobreviver em soluções eletrolíticas e não eletrolíticas até 200 mOsm. A função discriminante foi a melhor ferramenta para descrever as respostas dos animais ao estresse osmótico ambiental. Os resultados foram comparados com os obtidos em estudos anteriores, usando um protocolo de exposição aguda aos mesmos meios de incubação usados neste estudo. Concluiu-se: a) a análise multivariada é a aproximação adequada para descrever as respostas das larvas às mudanças nos parâmetros físico-químicos do seu meio; e b) tanto a aclimatação progressiva, como as exposições agudas às soluções experimentais induziram as respostas semelhantes.

Inhibition and recovery of cholinesterases in Odontophrynus americanus tadpoles exposed to fenitrothion.

We determined the levels of brain acetylcholinesterase (AChE) and tail butyrylcholinesterase (BChE) activities in tadpoles of Odontophrynus americanus exposed to a commercial formulation of fenitrothion. The mean brain AChE activities in the controls tadpoles varied from 6.91 to 6.39 µmol min-1 mg-1 protein, whereas tail BChE activities ranged among 0.26 to 0.17 µmol min-1 mg-1 protein; the two sub-lethal concentrations of fenitrothion assayed produced AChE and BChE inhibition (p < 0.01). Brain AChE recovered a substantial level of activity with a maximum of 93.2%; after the transference of tadpoles to a free-pesticide solution, whereas tail BChE recovery showed a smaller increase (39%) in the activity at 168 hr after to transference to clear water. According with our results, we suggest that tadpole’s tail BChE presents higher sensibility than brain AChE.

Further notes on the natural history of the South American pepper frog, Leptodactylus labyrinthicus (Spix, 1824) (Anura, Leptodactylidae) / Notas complementares sobre a história natural da rã-pimenta sul-americana, Leptodactylus labyrinthicus (Anura, Leptodactylidae)

Leptodactylus labyrinthicus tadpoles reach a large size in the nest through consumption of trophic eggs. We previously suggested that the trophic eggs are laid just after amplexus has finished, but our new data do not support this hypothesis. We also present further details on the natural history of the species with regard to breeding activity, spawning site, retreats and the ability of tadpoles in preying upon fully-growth heterospecific tadpoles. We also show that the tadpoles are mainly nocturnal and take diurnal refuges. We collected the data in Brazil in three localities within the Cerrado Biome. We examined burrows used by L. labyrinthicus males, verified if females still contained mature eggs just after released from amplexus, and tested the ability of tadpoles in preying fully-growth heterospecific tadpoles. Field observations and experiments were conducted on tadpole activity time, hiding behaviour and level of susceptibility to predation by the bird leaf-scrapers in four sheltering situations. Reproduction could start before the first rains; this may be advantageous by allowing the tadpoles to exploit eggs of other frogs. We found one floating nest built in a temporary pool. The nest of the species is normally circumscribed in an excavated basin beside the water body. Adult males were found during the day with their head-out of the entrance of underwater burrows, which were perforations through dense root mats beside calling/spawning sites. Probably, these burrows in permanently water-filled soil are actively excavated by males. Females released all their eggs during the amplexus, so trophic eggs are not produced by the currently-accepted mechanism. Fully-grown heterospecific tadpoles were not preyed upon by L. labyrinthicus tadpoles, which can prey only slow-moving newly hatched ones. Field tadpoles took shelter under mud/dead leaves during daylight and became exposed on the bottom at night. Free-ranging leaf-scrapers removed...

Girinos de L. labyrinthicus crescem parcialmente no ninho consumindo ovos tróficos. Sugerimos anteriormente que os ovos tróficos seriam postos logo após o amplexo, porém nossos novos dados não corroboram esta hipótese. Apresentamos também mais detalhes da história natural da espécie relacionados à estação reprodutiva, local de desova, abrigos e capacidade dos girinos em predar girinos heteroespecíficos plenamente desenvolvidos. Demonstramos ainda que os girinos são noturnos e se utilizam de refúgios diurnos. Coletamos os dados no Brasil em três locais no Bioma Cerrado. Determinamos o formato e dimensões de buracos utilizados por machos, verificamos se fêmeas liberadas do amplexo ainda portavam óvulos maduros e testamos a capacidade dos girinos em predar girinos heteroespecíficos plenamente desenvolvidos. Realizamos observações naturalísticas e experimentais com girinos para descrever o horário de atividade, comportamento de refúgio e grau de suscetibilidade à predação pela ave sabiá-poca em diferentes tipos de substratos. Desovas podiam ocorrer antes das primeiras chuvas, possibilitando aos girinos explorar ovos de outros anuros no meio da estação chuvosa. Encontramos um ninho construído na superfície da água de uma poça temporária. Os ninhos da espécie geralmente são circunscritos em bacias escavadas às margens do corpo d'água. Machos adultos foram encontrados durante o dia em buracos subaquáticos, os quais eram perfurações adjacentes aos sítios de vocalização/desova. Provavelmente, esses buracos em solos encharcados são ativamente escavados pelos machos. As fêmeas liberam todos os óvulos durante o amplexo, portanto, os ovos tróficos não são produzidos pelo mecanismo aceito presentemente. Os girinos oferecidos nos testes não foram consumidos pelos girinos de L. labyrinthicus, os quais conseguem predar apenas recém-eclodidos. No campo, os girinos se refugiavam entre o lodo ou folhas mortas durante o dia, porém ficavam expostos sobre...

Silagem ácida de resíduos da filetagem de tilápias para girinos de rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802): Digestibilidade e desempenho / Acid silage of filetage from tilapia residues for frog-bull tadpoles (Rana catesbeiana Shaw, 1802): (Digestibility and performance assays)

Os experimentos foram realizados para avaliar os coeficientes de digestibilidade aparente dos nutrientes e da energia bruta da silagem ácida de resíduos da filetagem de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), para girinos de rã-touro (Rana catesbeiana) e o desempenho dos girinos recebendo níveis crescentes (0, 15, 30 por cento) da silagem ácida em substituição à farinha de peixe na ração. Na digestibilidade foram utlizados 200 girinos, medindo em média 7 cm e peso médio de 3 g, acondicionados em aquários de 40 litros. A coleta de fezes foi feita em 7 dias e a determinação dos coeficientes de digestibilidade aparentes e energia digestível aparente foi feita por metodologia indireta, tendo sido utilizado 1,0 por cento de Cr2O3 como indicador incorporado à ração. No desempenho foram utilizados 240 girinos, com peso médio de 2,5 g acondicionados em aquários de 40 litros. As variáveis analisadas foram: ganho de peso final (GPF); consumo de ração total (CRT); e conversão alimentar aparente (CAA). O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado, com 3 tratamentos e 16 repetições. Os valores de digestibilidade encontrados foram: coeficiente de digestibilidade aparente da matéria seca 95,48; coeficiente de digestibilidade aparente da proteína bruta 95,90; coeficiente de digestibilidade aparente do extrato etéreo 99,25; coeficiente de digestibilidade aparente da energia bruta 95,75 e o coeficiente da energia digestível aparente (kcal/kg) 2418,04. Observou-se uma diminuição linearmente (P<0,01) para o ganho de peso final e consumo de ração total. Concluiu-se que este alimento prejudicou o desempenho, apesar dos altos coeficientes de digestibilidade.

The experiments were conduct in order to evaluate the nutrients apparent digestibility coefficients and gross energy and performance assay by using the acid silage from tilapia filetage residues of Nile's tilapia (Oreochromis niloticus) for frog-bull tadpoles (Rana catesbeiana) using increasing levels (0, 15, 30 percent) of acid silage residues in substitution to the fish meal in the ration of frog-bull tadpoles. For the digestibility assay were utilized 200 tadpoles, measuring on an average 7 cm, packed in aquaria of 40 liters. The feces collection was made in 7 days and the coefficients apparent digestibility of nutrients and energy digestible determination were made by indirect methodology and using 1,0 percent of Cr2O3 as diet indicator. In the performance assay a total of 240 tadpoles were utilized , with middleweight of 2,5 g packed in aquaria of 40 liters. The variables analyzed were: weight gain (WG); total feed intake (TFI); and apparent feed conversion (AFC). The experimental was in the entirely randomized design, with 3 treatments and 16 repetitions. The digestibility values were: Apparent coefficient of Dry Matter 95.48; Apparent coefficient of crude protein 95.90; Apparent coefficient of ethereal extract 99.25; Apparent crude energy digestibility coefficient 95.75 and digestible energy (kcal DE / kg) 2418. The results shown linearly decreased (P<0,01) for the weight gain and feed intake. It was conclude that the acid silage from tilapia filetage residues shown low performance, therefore high nutrients digestibility of diets for bull tadpoles (Rana catesbeiana).

Background to work on retinoids and amphibian limb regeneration: Studies on anuran tadpoles—a retrospect.

Studies on the effects of exogenous vitamin A palminate on limb development and regeneration in anuran tadpoles carried out since late 1960s at the author's laboratory are reviewed and discussed. Most significant was the initial discovery that vitamin A causes regeneration of complete or nearly complete limbs instead of only the missing distal part, thus altering the P-D pattern of regeneration—a phenomenon now called proximalization. Often more than one such regenerates develop per stump. Vitamin A produces proximalizing effect on regeneration cells during their dedifferentiation and blastema formation but inhibits regeneration if given once redifferentiation begins. Shank-level blastemas from treated tadpoles grafted into orbits of previously treated/untreated host tadpoles formed complete limbs. Proximalizing effect is proportionate to vitamin A concentration, duration of treatment, amputational level and stage of tadpoles. Vitamin A produces this effect also if given only prior to amputation. Its influence persists after cessation of treatment, declining with time. Proximalizing effect is correlated with natural ability in limbs to regenerate. Vitamin A improves regenerative ability and can induce it to some extent in non-regenerating limbs. Vitamin A excess retards limb development and produces stage dependent teratogenic defects. Further development of only that limb region is prevented in which differentiation is beginning when vitamin A is given. Short treatment of tadpoles beginning with limbs at spatula/paddle stage inhibited foot development in the unoperated limbs hut promoted regeneration of complete limbs from the contra-lateral amputated limbs. These dual effects were due to cells of the former differentiating and of the latter dedifferentiating when exposed to vitamin A palmitate.