Post-larval Colossoma macropomum (Characiformes, Serrasalmidae) show better performance in excavated than concrete tanks under different feeding strategies

As the global human population increases, the demand for food grows and, consequently, practices such as aquaculture have become more common. Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) is a native Amazonian species, considered to be the second most cultivated fish in the country. We compared the development of post-larval C. macropomum of different ages, submitted to combinations of food management on a commercial production scale. Two experiments tested the delivery of i) 55% crude protein feeding, ii) natural feeding by fertilizing the water and iii) a combination of both during hatchery in concrete tanks (10 m 2) or excavated soil-bottom tanks (4502) subjected to distinct fertilization protocols and storage densities. The weight and length of the post-larvae grown in ponds were greater (p < 2.0x10-16) for the mixed treatment, except during the first week of larvae, in which values were similar (p & 8804; 1.76x10-14) to the fertilization treatment. Concrete tanks with fertilization management without feeding were similar to the mixed treatment (p & 8804; 1.38x10-7); however, during the first week of external larvae production, the growth performance under fertilization treatment was superior to the others. Food management in excavated tanks, when compared to the same management performed in concrete tanks, registered higher averages for the productive variables of C. macropomum cultivated at the density of 200 post-larvae m-2 in all evaluated food strategies. It was verified that post-larvae of C. macropomum did not develop well in the first weeks of life when receiving only formulated diets. The increase in natural food availability through fertilization positively influenced the performance of the species, which can remain without feeding until the second week of life.

Occurrence, pathogenicity, and control of acanthocephalosis caused by Neoechinorhynchus buttnerae: A review / Ocorrência, patogenicidade, e controle de acantocefalose causada por Neoechinorhynchus buttnerae: uma revisão

Abstract Infections negatively influence the production of tambaqui, and in north Brazil, the wide distribution of this parasitic disease has generated concern among fish farmers. The objective of this study was to review published literature on this pathogen. Six main online research databases were searched using the keywords "Neoechinorhynchus buttnerae", "acantocefalose", and "acanthocephalan fish". Based on a set of predetermined criteria, 39 publications were selected for this review. The mechanism of pathogenic action of N. buttnerae is related to the degree of penetration of the proboscis. Infection results in histopathological and morphological changes in the host. The recurrence of the parasite in the northern region was greater twelve years after their first occurrence. The lack of specific legislation on veterinary products for aquatic animals, combined with the neglect of good management practices, and the absence of a contingency plan for the control of acanthocephalan infections have contributed to the current health situation of Colossoma macropomum northern Brazil. Additional information about the occurrence of the disease, pathogenicity, and control of acanthocephalan infections are imperative for developing a disease contingency plan in the region and research to address these should be encouraged by the sector.

Resumo As infecções influenciam negativamente a produção de tambaqui e, no norte do Brasil, a ampla distribuição dessa doença parasitária tem gerado preocupação entre os piscicultores. O objetivo deste estudo foi revisar a literatura publicada sobre esse patógeno. Seis principais bancos de dados de pesquisa on-line foram investigados usando-se as palavras-chave "Neoechinorhynchus buttnerae", "acantocefalose" e "acantocéfalos de peixe". Com base em um conjunto de critérios predeterminados, 39 publicações foram selecionadas para esta revisão. O mecanismo de ação patogênica de N. buttnerae está relacionado ao grau de penetração da probóscide. A infecção resulta em alterações histopatológicas e morfológicas no hospedeiro. A recorrência do parasito na região Norte foi maior, doze anos após sua primeira ocorrência. A falta de legislação específica sobre produtos veterinários para animais aquáticos, combinada com a negligência de boas práticas de manejo e com a ausência de um plano de contingência para o controle de infecções por acantocéfalos, contribuíram para a atual situação sanitária em Colossoma macropomum na região Norte do Brasil. Informações adicionais sobre a ocorrência da doença, patogenicidade e controle de infecções por acantocéfalos são imprescindíveis para o desenvolvimento de um plano de contingência de doenças na região e pesquisas para resolvê-las devem ser incentivadas pelo setor.

Crioconservación seminal de Colossoma macropomum como estrategia de producción y conservación en la Orinoquia Colombiana / Seminal cryopreservation of Colossoma macropomum as a production and conservation strategy in the Colombian Orinoquia / Criopreservação seminal de Colossoma macropomum como estratégia de produção e conservação na Orinoquia Colombiana

Resumen La Cachama negra (Colossoma macropomum) es un pez nativo de Sur América. En Colombia, no hay estudios publicados sobre protocolos estandarizados para su crioconservación seminal. La implementación de esta biotecnología permitiría su producción comercial continua e introducción en bancos de recursos genéticos. El objetivo del presente estudio fue evaluar los efectos de la crioconservación sobre el semen de C. macropomum sometido a diferentes crioprotectores y sistemas de empaque con miras a consolidar un protocolo eficiente para la especie. Se utilizó semen de tres machos sexualmente maduros (4.6 ± 1.6 kg). El semen fue diluido en una proporción 1:4 usando tres diferentes agentes crioprotectores (Dimetilsulfoxido 10% [DMSO], Metanol 10% [MET], Etilenglicol 5% [ETG]) con o sin la inclusión de yema de huevo 12% (YH) y glucosa 5.5%. Además, fueron evaluados dos sistemas de empaque (pajillas de 0.5 ml y macrotubos de 2.0 ml), las cuales fueron expuestas a vapores de nitrógeno líquido (NL) y luego almacenadas durante 8 meses. El semen fue descongelado en baño de agua a 37°C por 60 s y se determinó la motilidad masal (%) [MM], duración de la motilidad (s) [DM], integridad de membrana plasmática (%) [IMP] y fertilidad (%). La motilidad postdescongelación en todos los tratamientos fue significativamente diferente (P<0,05) al control siendo MET 2.0 ml el mejor (53 ± 5.8%). Respecto al control la DM tuvo un comportamiento similar para todos los tratamientos siendo solo diferente significativamente para ETG+YH 0.5 ml. La IMP se mantuvo sin diferencias significativas en MET 2.0 ml con respecto al control. La fertilidad fue significativamente menor en la mayoría de tratamientos con YH, siendo MET 2.0 ml el mejor (94.7 ± 0.6%). En conclusión, el semen de Colossoma macropomum es susceptible de crioconservación no siendo necesaria la utilización de YH en los diluyentes.

Abstract Cachama Negra (Colossoma macropomum) it´s a native fish of South America. In Colombia, there are no published studies on standardized protocols about their seminal cryopreservation. The implementation of this biotechnology would allow its continuous commercial production and introduction in genetic resources banks. The aim of this study was to evaluate the effects of cryopreservation on C. macropomum sperm subjected to different cryoprotectants and packaging systems in order to consolidate an efficient protocol for this specie. Semen from three sexually mature males (4.6 ± 1.6 kg) was used. The semen was diluted in a 1:4 ratio using three different cryoprotective agents (Dimethylsulfoxide 10% [DMSO], Methanol 10% [MET], Ethylene glycol 5% [ETG]); with or without the inclusion of 12% egg yolk (YH) and glucose 5.5%. In addition, two packing systems were evaluated (0.5 ml straws and 2.0 ml macrotubes), wich were exposed to liquid nitrogen (NL) vapors and then stored for 8 months. The sperm was thawed in a water bath at 37° C for 60 s and was determined the mass motility (%) [MM], motility duration (s) [DM], plasma membrane integrity (%) [IMP] and fertility (%). Post-thaw motility in all treatments was significantly different (P <0.05) to control, being MET 2.0 ml the best (53 ± 5.8%). Respect to the control the DM had a similar behavior for all treatments, being only significantly different for ETG+YH 0.5 ml. The IMP remained without significant differences in MET 2.0 ml with respect to the control. Fertility was significantly lower in the majority of treatments with YH, being MET 2.0 ml the best (94.7 ± 0.6%). In conclusion, semen of Colossoma macropomum is susceptible to cryopreservation, and the use of YH in diluents is not necessary.

Resumo O tambaqui (Colossoma macropomum) é um peixe nativo da América do Sul. Na Colômbia, não há trabalhos publicados sobre protocolos padronizados para sua criopreservação seminal. A implementação dessa biotecnologia permitiria sua produção comercial contínua e sua introdução nos bancos de genes. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da criopreservação no sêmen de C. macropomum submetido a diferentes crioprotectores e envases, e poder consolidar um protocolo eficiente para esta espécie. Foi utilizado sêmen de três machos sexualmente maduros (4.6 ± 1.6 kg). O sémen foi diluído em uma proporção 1:4 usando três diferentes agentes crioprotectores (10% de dimetil sulfóxido [DMSO], 10% de Metanol [MET] Etileno glicol 5% [ETG]), com e sem a presencia de gema de ovo ao 12% (YH) e glucose a 5.5%. Além foram avaliados dos sistemas de envase (palhetas de 0.5 ml e 2.0 ml de macrotubos) que foram expostos a vapores de nitrogênio líquido (NL) e armazenados por 8 meses em NL. O sémen foi descongelado em banho-água a 37 ° C durante 60 segundos e determinou-se a motilidade massal (%) [MM], duração de motilidade (s) [DM], a integridade da membrana plasmática (%) [IMP] e Fertilidade (%). A motilidade pós-descongelação nos tratamentos foi significativamente diferente (P<0.05) sendo a melhor combinação MET 2.0 ml (53 ± 5.8%) comprados com o controle. Em relação ao controle, o DM teve um comportamento similar para todos os tratamentos sendo significativamente diferente para o ETG+YH 0.5 ml. O IMP permaneceu sem diferenças significativas no MET 2.0 ml em relação ao controle. A fertilidade foi significativamente menor na maioria dos tratamentos com YH, sendo o MET 2.0 ml o melhor (94.7 ± 0.6%). Em conclusão, o sêmen Colossoma macropomum é suscetível à criopreservação e o uso de YH em diluentes não é necessário.

Qualidade microbiológica de tambaqui e pintado produzidos em viveiros escavados / Microbiological quality of tambaqui and pintado produced in excavated tanks

O presente trabalho teve como objetivo avaliar e quantificar S. aureus e presença ou ausência de salmonela em peixes frescos nativos provenientes de viveiros escavados localizados na Região Norte. Foram analisados 4 lotes de pintado e 4 lotes de tambaqui, com 4 amostras (peixes) em cada lote, onde o lote representava uma despesca em tanque escavado. As análises foram realizadas com kits da 3M mundialmente utilizados e recomendados pela Association of Official Analytical Chemists (AOAC). Os resultados demonstraram presença de salmonella em todos os lotes de tambaqui e em três lotes de pintado. Quanto à contagem de S. aureus, apenas uma amostra (peixe) apresentou acima do estabelecido, da espécie pintado.

In vitro culture of Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): Influence of temperature and culture media / Cultivo in vitro de Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): influência da temperatura e dos meios de cultura

Abstract Infection by the acantocephalan Neoechinorhynchus buttnerae is considered one of most important concerns for tambaqui fish (Colossoma macropomum ) production. Treatment strategies have been the focus of several in vivo studies; however, few studies have been undertaken on in vitro protocols for parasite maintenance. The aim of the present study was to develop the best in vitro culture condition for N. buttnerae to ensure its survival and adaptation out of the host to allow for the testing of substances to be used to control the parasite. To achieve this, parasites were collected from naturally infected fish and distributed in 6-well culture plates under the following treatments in triplicate: 0.9% NaCl, sterile tank water, L-15 Leibovitz culture medium, L-15 Leibovitz + agar 2% culture medium, RPMI 1640 culture medium, and RPMI 1640 + agar 2% culture medium. The plates containing the parasites were maintained at 24 °C, 28 °C, and 32 °C. The RPMI 1640 + agar 2% culture medium showed the best survival of 24 days at 24 °C. No body alterations such as swollen parasites, body deformation, dehydration and hardening were observed in the RPMI 1640 + 2% culture medium.

Resumo A infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae é considerada uma das preocupações mais importantes para produção de tambaqui (Colossoma macropomum). Estratégias de tratamento têm sido o foco de vários estudos in vivo ; entretanto, poucos estudos foram realizados em protocolos in vitro para manutenção do parasito. O objetivo deste estudo foi desenvolver a melhor condição de cultura in vitro para N. buttnerae para garantir sua sobrevivência e adaptação fora do hospedeiro, a ser utilizado para teste com substâncias no controle do parasito. Para isso, os parasitos foram coletados de peixes naturalmente infectados e distribuídos em placas de cultura de 6 poços sob os seguintes tratamentos em triplicata: 0.9% NaCl, água estéril do tanque, meio de cultura L-15 Leibovitz, meio de cultura L-15 Leibovitz + ágar 2%, meio de cultura RPMI 1640, e meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%. As placas contendo os parasitos foram mantidos a 24 °C, 28 °C, e 32 °C. O meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2% apresentou a melhor sobrevivência de 24 dias a 24 °C. Nenhuma alteração corporal tais como inchaço dos parasitos, deformação corporal, desidratação e endurecimento foram observados no meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%.

First record of Neoechinorhynchus buttnerae (Eoacantocephala, Neochinorhynchidae) on Colossoma macropomum (Characidae) in a fish farm in Roraima, Brazil / Primeiro registro de Neoechinorhynchus buttnerae (Eoacantocephala, Neochinorhynchidae) em Colossoma macropomum (Characidae) em uma fazenda de peixes em Roraima, Brasil

Severe infections by the acanthocephalan Neoechinorhynchus buttnerae were reported in Colossoma macropomum in fish farms in northern Brazil. The occurrence of the parasite is recorded for the first time in the state of Roraima, Brazil, along with its parasite indexes. Fifty C. macropomum from a fish farm were analyzed. We collected a total of 13474 individual parasites. Neoechinorhynchus buttnerae had a prevalence of 100%, and mean intensity and mean abundance of 269.48. Significant positive correlations were observed between fish standard length, weight and relative condition factor and the number of parasites. Our results showed evident loss of body mass in the parasitized fish. Fish farmers in Roraima should be advised to manage the infection of C. macropomum by N. buttnerae, as massive infections of this parasite can deteriorate the health of the fish.

Infecções severas pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae foram relatados em Colossoma macropomum em fazendas no norte do Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar o primeiro registro de ocorrência deste parasita no estado de Roraima, Brasil, relatando seus índices parasitários. Cinquenta C. macropomum de uma fazenda foram analisados. Coletamos um total de 13474 parasitas. Neoechinorhynchus buttnerae mostrou uma prevalência de 100%, com uma intensidade média e abundância média de 269,48. O comprimento padrão, peso e fator de condição relativo dos peixes foram correlacionados positiva e significativamente com o número de parasitas. Nossos resultados mostraram perda evidente de massa corporal nos peixes. Nosso registro da presença de N. buttnerae infectando C. macropomum no estado de Roraima é um alerta aos piscicultores, pois infecções massivas podem deteriorar a saúde dos peixes.

Weight and morphometric growth of Pacu (Piaractus mesopotamicus), Tambaqui (Colossoma macropumum) and their hybrids from spring to winter / Peso e crescimento morfométrico de pacu (Piaractus mesopotamicus), tambaqui (Colossoma macropumum) e seus híbridos da primavera ao inverno

This study aimed to evaluate weight and morphometric growth of the products of the complete diallel cross-breeding between pacu and tambaqui during the period from the end of spring to the beginning of winter. Was used 400 pacu, tambaqui, tambacu and paqui. 20 fish from each group were collected, weighed and submitted to morphometric evaluation every 28 days. The Logistic function adjusted better to describe the growth in body weight and the morphometric measures for age on all the genetic groups. The studied groups presented similar behavior of growth for body weight and morphometric measures. There were significant differences between the genetic groups regarding parameters A (asymptotic value) and B (integration constant) for body weight and for all the morphometric measures evaluated. For the parameter K (maturity rate), there were significant difference between groups for body weight, head length and body height. The groups possibly were affected the decrease of temperature. The Tambacu was superior to the Paqui in all the variables evaluated for the parameter A, and was also superior to the pure breed, except for head length and body width.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar o peso e crescimento morfométrico dos produtos do cruzamento dialélico completo entre pacu e tambaqui. 20 peixes de cada grupo foram coletados, pesados e submetidos à análise morfométrica a cada 28 dias. O modelo que obteve o maior coeficiente de determinação e que melhor se ajuste ao método de Akaike foi verificado. A função logística foi ajustada para melhor descrever o crescimento do peso corporal e as medidas morfométricas para a idade em todos os grupos genéticos. Os quatro grupos estudados apresentaram comportamento semelhante para o peso corporal, bem como para as medidas morfométricas. Houve diferenças significativas entre os grupos genéticos sobre os parâmetros A (valor assintótico) e B (constante de integração) para o peso corporal e para todas as medidas morfométricas avaliadas. Para o parâmetro K (taxa de maturação), houve diferença significativa entre os grupos para o peso corporal, comprimento da cabeça e altura do corpo. Os grupos possivelmente foram afetados pela diminuição da temperatura. O tambacu foi superior ao Paqui em todas as variáveis avaliadas para o parâmetro A, e também foi superior para a raça pura, exceto para o comprimento e largura do corpo de cabeça.(AU)

Ras oncogene and Hypoxia-inducible factor-1 alpha (hif-1α) expression in the Amazon fish Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) exposed to benzo[a]pyrene

Abstract Benzo[a]pyrene (B[a]P) is a petroleum derivative capable of inducing cancer in human and animals. In this work, under laboratory conditions, we analyzed the responses of Colossoma macropomum to B[a]P acute exposure through intraperitoneal injection of four different B[a]P concentrations (4, 8, 16 and 32 μmol/kg) or corn oil (control group). We analyzed expression of the ras oncogene and the Hypoxia-inducible factor-1 alpha (hif-1α) gene using quantitative real-time PCR. Additionally, liver histopathological changes and genotoxic effects were evaluated through the comet assay. Ras oncogene was overexpressed in fish exposed to 4, 8 of 16 μmol/kg B[a]P, showing 4.96, 7.10 and 6.78-fold increases, respectively. Overexpression also occurred in hif-1α in fish injected with 4 and 8 μmol/kg B[a]P, showing 8.82 and 4.64-fold increases, respectively. Histopathological damage in fish liver was classified as irreparable in fish exposed to 8, 16 and 32 μmol/kg μM B[a]P. The genotoxic damage increased in fish injected with 8 and 16 μmol/kg in comparison with the control group. Acute exposure of B[a]P was capable to interrupt the expression of ras oncogene and hif-1α, and increase DNA breaks due to tissue damage.

High genetic diversity and connectivity in Colossoma macropomum in the Amazon basin revealed by microsatellite markers

Abstract Colossoma macropomum is the second largest scaled fish of the Amazon. It is economically important for commercial fisheries and for aquaculture, but few studies have examined the diversity and genetic structure of natural populations of this species. The aim of this study was to investigate the levels of genetic variability and connectivity that exist between three natural populations of C. macropomum from the Amazon basin. In total, 247 samples were collected from the municipalities of Tefé, Manaus, and Santarém. The populations were genotyped using a panel of 12 multiplex microsatellite markers. The genetic diversity found in these populations was high and similar to other populations described in the literature. These populations showed a pattern of high gene flow associated with the lack of a genetic structure pattern, indicating that the number of migrants per generation and recent migration rates are high. The values of the FST, RST, and exact test of differentiation were not significant for pairwise comparisons between populations. The Bayesian population clustering analysis indicated a single population. Thus, the data provide evidence for high genetic diversity and high gene flow among C. macropomum populations in the investigated region of the Amazon basin. This information is important for programs aiming at the conservation of natural populations.

Change in physical and chemical characteristics related to the binomial time-temperature used in sous pasteurization see Tambaqui (Colossoma macropomum) / Variação das características físico-químicas relacionadas ao binômio tempo-temperatura utilizado na pasteurização de sous vide de tambaqui (Colossoma macropomum)

The goal of this study was to evaluate sous vide fish and assess the influence of time and temperature on the pasteurization process through quality parameters. The raw material (tambaqui fillets) and the sous vide underwent physical, physicochemical, and microbiological analyses. A sauce was prepared containing soy sauce, water, horseradish and garlic flakes. The product's pasteurization parameters of time and temperature were defined according to a 22 central composite rotatable design (CCRD), and the dependent variables were water holding capacity (WHC) and instrumental texture aiming at obtaining high WHC values for the product to maintain the desired juiciness. The microbiological analysis required by legislation have indicated that the fish fillets and sous vide were within de standard. The values of total coliforms found in the samples (fillets and sous vide) analyzed were below the critical level of 10² CFU/g. The counts of sulphite-reducing clostridia and psychrotrophic and mesophilic bacteria on plates in the samples were <1x10 CFU/g. In conclusion, temperature was the most important factor in the pasteurization process, significantly contributing to the quality of the final product. The mathematical models proposed were considered predictive for each response.

O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do tempo e da temperatura no processo de pasteurização do sous vide de peixe por meio dos parâmetros de qualidade. Foram realizadas análises físicas, físico-químicas e microbiológicas na matéria-prima (filé de tambaqui) e no sous vide. Foi preparado um molho contendo molho de soja, água, raiz forte e flocos de alho. Parâmetros de pasteurização do produto (tempo x temperatura) foram definidos de acordo com um projeto de 2x2 rotativo composto central (DRCC), e as variáveis dependentes foram capacidade de retenção de água (CRA) e textura instrumental, visando à obtenção de altos valores de CRA para que o produto obtivesse a suculência desejada. As análises microbiológicas exigidas na legislação indicaram que a matéria-prima e o sous vide encontravam-se dentro dos padrões estabelecidos. Os valores de coliformes totais encontrados nas amostras (filés e sous vide) analisadas foram inferiores ao nível crítico de 10² UFC/g. As contagens de clostrídios sulfitorredutores e bactérias psicrotróficas e mesófilas em placas nas amostras foram <1x10 UFC/g. Concluiu-se que a temperatura foi o fator mais importante no processo de pasteurização, contribuindo de forma significativa para a qualidade do produto final. Os modelos matemáticos propostos foram preditivos para cada resposta.

Morphological and morphometric analysis of skeletal muscle between male and female young adult Colossoma macropomum (Characiformes: Serrasalmidae)

This study aimed to evaluate muscle organization in tambaqui in order to describe the muscle growth process. We analyzed the morphometric pattern of fibers from white muscle of young-adults (300 days) by smaller diameter. The organization of white muscle exhibited a typical morphological pattern found in other fish species. Heavier animals showed higher frequency of larger diameter fibers (>50 m ) and smaller animals had higher frequency of smaller diameter fibers ( 20 m ) (P =0.005). However, both animals showed the same frequency of intermediate diameter fibers (20-50 m ). Body weight showed a positive correlation with muscle diameter fiber (r=0.45), being 20-50 m the diameters that contributed the most to animal weight (P 0.0001). A weak correlation between fiber diameter and animal sex was observed (r=0.2). Females showed higher frequency of large fiber diameters (>50 m ) than males. However, there was no difference between body weight and sex (P =0.8). Our results suggest that muscle growth is by hypertrophy and hyperplasia due to a mosaic appearance from different diameters fibers, which is characteristic of large size fish species.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a organização muscular em tambaqui, a fim de descrever o processo de crescimento muscular. Foi analisado o padrão morfométrico das fibras do músculo branco de animais com 300 dias de idade usando o método de diâmetro menor. O músculo branco apresentou uma organização morfológica padrão encontrado em peixes. Animais de maior peso apresentaram maior frequência de fibras de maior diâmetro (> 50 m ) e os animais de menor peso apresentaram maior frequência de fibras de menor diâmetro ( 20 m ) (P = 0,005). Entretanto, ambos os animais, com maior e menor peso, apresentaram frequências semelhantes de fibras de diâmetro intermediário (20-50 m ). O parâmetro peso corporal mostrou correlação positiva com o diâmetro da fibra muscular (r = 0,45), sendo as fibras de diâmetro intermediários (20-50 m ) que mais contribuíram para o peso do animal (P 0,0001). Fêmeas apresentaram maior frequência de fibras de maior diâmetro (>50 m ) que machos. Observou-se uma fraca correlação entre o diâmetro da fibra e o sexo dos animais (r = 0,2). Apesar de fraca, a correlação estimada é corroborada pela fibras de grandes diâmetros (> 50 m ) serem mais frequente nas fêmeas que nos machos. No entanto, não houve diferença entre o peso corporal dos animais aos 300 dias de idade e sexo (P = 0,8). Os resultados encontrados sugerem que o crescimento muscular ocorre por hipertrofia e hiperplasia, caracterizado pela aparência em mosaico de fibras de diferentes diâmetros, característico de peixes de grande tamanho.

Determinação da dose inseminante e embriogênese na fertilização artificial de tambaqui (Colossoma macropomum) / Determination of insemination dose and embryonic development in the artificial fertilization of tambaqui (Colossoma macropomum)

Determinou-se a dose inseminante para fertilização artificial e descreveu-se o desenvolvimento embrionário de tambaqui (Colossoma macropomum). Os gametas foram coletados de reprodutores induzidos hormonalmente. Foi realizada fertilização artificial nas proporções de espermatozoides/ovócito de D1-50.666; D2-75.999; D3-101.332; D4-126.665; D5-151.998. O desenvolvimento embrionário foi acompanhado por meio de observações periódicas em estereoscópio até a eclosão dos ovos. Na fase de fechamento do blastóporo foi calculada a taxa de fertilização nas diferentes doses inseminantes. A porcentagem de fertilização aumentou de forma linear segundo a equação Ŷ =0,050 + 0,00000773X (R²=97,5), atingindo um platô em 84% na proporção de 102.486 espermatozoides/ovócito. Os embriões apresentaram segmentação meroblástica discoidal, típica de ovos telolécitos, com eclosão ocorrendo aos 357 horas-grau após a fertilização. Conclui-se que o desenvolvimento embrionário de tambaqui obedece ao esperado para peixes com ovos telolécitos e recomenda-se o uso da dose inseminante de aproximadamente 100.000 espermatozoides/ovócito na rotina de fertilização artificial dessa espécie.

The objective of this research was to determine the insemination dose for artificial fertilization and describe the embryonic development of tambaqui (Colossoma macropomun). The gametes were collected from induced breeding hormonally. An artificial fertilization was performed with different sperm/oocyte ratios of D1-50666, D2-75999, D3-101 332, 126 665-D4, D5-151 998 sperm/oocyte. Embryonic development was monitored through periodic stereoscopic observations until hatching. When embryos reached the blastopore closure stage, the rate of fertilization in different insemination doses was calculated. A regression equation was estimated to determine the ideal proportion of the gametes. The fertilization rate increased linearly according to the equation Ŷ = 0.050 + 0.00000773 X (R² = 97.5), up to the proportion of 102.486 spermatozoa/oocyte, and, from this point, the fertilization rate was maintained at 84%. The embryonic development of tambaqui was meroblastic discoidal, as expected from telolecithal eggs and we recommend the use of the insemination dose of approximately 100.000 sperm/oocyte in the artificial fertilization of tambaqui.

Estrutura morfológica do fígado de tambaqui Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) / Morphological structure of the liver in tambaqui, Colossoma macropomum (Cuvier, 1818)

Este trabalho teve como objetivo descrever macro e microscopicamente o fígado do Tambaqui Colossoma macropomum, Teleósteo de água doce da Família Characidae, de grande interesse econômico da bacia Amazônica. Foram utilizados seis (6) exemplares jovens com idade entre seis meses e um ano, oriundos da Chácara Esteio, Alta Floresta, MT, que desenvolve principalmente a prática da piscicultura. O órgão foi fotodocumentado in situ e descrito macroscopicamente, em seguida procedeu-se a retirada de fragmentos deste, que foram processados pelas técnicas histológicas rotineiras para inclusão em parafina e coloração de HE. O fígado localizou-se ventral à bexiga natatória e craniodorsalmente ao estômago, apresentou coloração amarronzada a vermelho, constituído por três lobos hepáticos, o lobo lateral direito, o lobo lateral esquerdo e o lobo ventral. Microscopicamente, o parênquima era constituído por hepatócitos com formato que variou do arredondado irregular hexagonal ao redondo com núcleo grande e central, arranjados em cordões lineares limitados por sinusóides que irradiam para veias centrais, e com ausência de lóbulos hepáticos. As veias centrais estavam distribuídas pelo parênquima, enquanto que o espaço porta, na maioria das vezes, era constituído apenas por uma veia hepática e o ducto biliar, em outros locais foi observado, uma artéria e um ducto. Não foi observada a formação de tríades portais. Foram frequentemente observados melano macrófagos centrais dispersos pelo parênquima. O estudo morfofuncional do Aparelho Digestório de peixes da bacia Amazônica, se faz pertinente com vistas ao conhecimento do aproveitamento de ganho de peso e produção em alta escala para consumo humano e preservação da espécie, além da importância de estarem sendo utilizados como bioindicadores atualmente.

This research aimed to describe the macroscopic and microscopic liver of tambaqui, Colossoma macropomum, Teleost freshwater Family Characidae, of great economic interest for the Amazon basin. We used six juveniles aged between six month and one year, from the small holding Esteio, Alta Floresta/MT, that develops mainly fish farming. The body was photographed in situ, described macroscopically, and fragments were removed and processed by routine histological techniques through paraffin embedding and HE staining. The liver, located ventrally to the swim bladder and craniodorsally to the stomach, is brownish red and consisted of three lobes, the right lateral, the left lateral and the ventral lobe. Microscopically, the parenchyma consists of hepatocytes varying from irregular rounded hexagonal to round forms with a large and central nucleus, and arranged in linear strings limited by sinusoids and radiating to central veins, but with absence of liver lobules. The central veins are distributed throughout the parenchyma, while the portal space consists in most cases only of a hepatic vein and bile duct; elsewhere exist artery and duct. Formation of portal triads was not founde. Melano macrophages were frequently seen dispersed throughout the central parenchyma. The morphofunctional study of the digestive system of fishes of the Amazon basin is important to obtain knowledge about their weight gain, large scale production for human consumption and preservation of the species, and has also its importance for being used as bioindicators today.

Genetic variability of wild and captivity populations of Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) - doi: 10.4025/actascibiolsci.v34i2.7149

Tambaqui (Colossoma macropomum) is among the most important fish species of the Amazon and one of the most cultivated in Brazil. In the present work we have evaluated the genetic variability of wild and captivity populations of C. macropomum. Enzymatic markers were used to estimate the genetic variability of 41 specimens from a wild group; and 30, 33 and 45 from three captivity groups, which came from Pentecostes (Ceará State), Jaboticabal (São Paulo State) and Itacoatiara (Amazonas State), respectively. Nine isoenzymic systems were used to evaluate the genetic variability of these populations. Using zimogram data we obtained the polymorphism level, allele number, allelic frequency, observed and expected heterozigosity, Wright F statistics (FIS, FST), genetic distance, level of similarity and group analysis. The isoenzymic data showed that, from the nine systems, six presented polymorphic loci (Fbp-2, G6pdh-2, G6pdh-3, Pgi-1, Pgi-2 and Pgm-1). The populations from Pentecostes and Jaboticabal presented loss of genetic variability and low heterozigosity, compared to the wild population and to the artificial population acquired at Itacoatiara fish farm. Based on these results and on fish farmer information we could consider the population from Itacoatiara as recently derived from a wild population. Concluding, we suggest that the artificial populations of tambaqui, which contain a

Genetic variability of wild and captivity populations of Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) / Variabilidade genética de populações selvagens e de cativeiro de Colossoma macropomum (Cuvier, 1818)

Tambaqui (Colossoma macropomum) is among the most important fish species of the Amazon and one of the most cultivated in Brazil. In the present work we have evaluated the genetic variability of wild and captivity populations of C. macropomum. Enzymatic markers were used to estimate the genetic variability of 41 specimens from a wild group; and 30, 33 and 45 from three captivity groups, which came from Pentecostes (Ceará State), Jaboticabal (São Paulo State) and Itacoatiara (Amazonas State), respectively. Nine isoenzymic systems were used to evaluate the genetic variability of these populations. Using zimogram data we obtained the polymorphism level, allele number, allelic frequency, observed and expected heterozigosity, Wright F statistics (FIS, FST), genetic distance, level of similarity and group analysis. The isoenzymic data showed that, from the nine systems, six presented polymorphic loci (Fbp-2, G6pdh-2, G6pdh-3, Pgi-1, Pgi-2 and Pgm-1). The populations from Pentecostes and Jaboticabal presented loss of genetic variability and low heterozigosity, compared to the wild population and to the artificial population acquired at Itacoatiara fish farm. Based on these results and on fish farmer information we could consider the population from Itacoatiara as recently derived from a wild population. Concluding, we suggest that the artificial populations of tambaqui, which contain animals originated from this funding population at Pentecostes, should be renewed with the introduction of a new group of individuals with genetic variability equivalent to the wild population.

O tambaqui é uma espécie de peixe bastante importante na região amazônica e uma das espécies mais cultivadas no Brasil. O objetivo deste trabalho foi avaliar a variabilidade genética do Colossoma macropomum de cativeiro e selvagem, utilizando marcadores isoenzimáticos. Utilizamos 41 indivíduos de uma população da natureza e 30, 33 e 45 de populações de cativeiro de Pentecoste, Jaboticabal e Itacoatiara, respectivamente. Nove sistemas isoenzimáticos foram utilizados para verificar a variabilidade genética do tambaqui, bem como os níveis de polimorfismos, números de alelos, freqüências alélicas, heterozigosidade observada e esperada, estatística F de Wright (FIS e FST), distância e similaridade genética, e análise de agrupamento. Das nove isoenzimas analisadas apenas seis sistemas apresentaram polimorfismo (Fbp-2, G6pdh-2, G6pdh-3, Pgi-1, Pgi-2 and Pgm-1). Verificamos que as populações de Pentecostes e Jaboticabal estão com falta de heterozigotos e apresentam-se estruturadas geneticamente em relação às populações de Itacoatiara e da Natureza que apresentam excesso de heterozigotos e não são estruturadas. Concluímos que os indivíduos de Itacoatiara são provenientes de populações selvagens e sugerimos que se realize uma renovação dos plantéis de tambaqui de Pentecostes e Jaboticabal, com o intuito de recuperar a variabilidade genética perdida.

Optimum dietary protein requirement for Amazonian Tambaqui, Colossoma macropomum Cuvier, 1818, fed fish meal free diets / Exigência protéica de juvenis de tambaqui, Colossoma macropomum Cuvier, 1818, alimentados com rações livres de farinha de peixe

Fish meal free diets were formulated to contain graded protein levels as 25% (diet 1), 30% (diet 2), 35% (diet 3) and 40% (diet 4). The diets were fed to tambaqui juveniles (Colossoma macropomum) (46.4 ± 6.3g) in randomly designed recirculating systems for 60 days, to determine the optimum protein requirement for the fish. The final weight of the fish, weight gain (28.1, 28.5, 32.2, 28.0g) and specific growth rate increased (P>0.05) consistently with increasing dietary protein up to treatment with 35% protein diet and then showed a declining trend. Feed intake followed the same trend resulting in best feed efficiency (62.5%) in fish fed diet with 35% protein. Similarly, the protein intake increased significantly with increasing dietary protein levels and reduced after the fish fed with 35% protein; while protein efficiency ratio (2.28, 1.99, 1.87, 1.74) decreased with increasing dietary protein levels. Carcass ash and protein had linear relationship with dietary protein levels while the lipid showed a decreasing trend. Ammonia content (0.68, 0.73, 0.81, 1.21 mg L-1) of the experimental waters also increased (P<0.05) with increasing protein levels while pH, dissolved oxygen and temperature remained fairly constant without any clear pattern of inclination. Broken-line estimation of the weight gain indicated 30% protein as the optimum requirement for the fish.

Foram formuladas quatro dietas sem a inclusão de farinha de peixes contendo os níveis crescentes de proteína de 25% (dieta 1), 30% (dieta 2), 35% (dieta 3) e 40% (dieta 4). As dietas foram fornecidas a juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum) (46.4 ± 6.3g) distribuídos ao acaso em um sistema de recirculação durante 60 dias, para determinar o requerimento protéico ótimo para o peixe nesta faixa etária. O peso final dos peixes, o ganho de peso (28.1, 28.5, 32.2, 28.0g) e a taxa de crescimento específico tiveram um aumento não significativo (P>0,05) conforme aumentou o nível protéico das rações até o nível de 35% proteína e então uma tendência ao declínio. O consumo de alimento seguiu a mesma tendência resultando em melhor eficiência alimentar (62.5%) para os peixes alimentados com a dieta contendo 35% de proteína. Similarmente, o consume de proteína aumentou significativamente com o aumento crescente dos níveis protéicos dietários e reduziu após os peixes serem alimentados com a dieta com 35% de proteína, enquanto a taxa de eficiência protéica (2.28, 1.99, 1.87, 1.74) diminuiu com o aumento dos níveis protéicos dietários. A cinza e a proteína da carcaça apresentaram uma relação linear com os níveis protéicos dietários enquanto o lipídio mostrou uma tendência decrescente. O aumento do conteúdo da amônia (0.68, 0.73, 0.81, 1.21 mg L-1) da água dos tanques experimentais com a elevação dos níveis de proteína não foi significativo (P>0,05) enquanto o pH, oxigênio dissolvido e a temperatura permaneceram claramente constantes sem qualquer padrão claro de inclinação. O "ponto de virada" da curva de ganho de peso indicou 30% como o nível protéico ótimo para esta espécie de peixe, nesta fase de crescimento, nas condições deste experimento.

Uso do probiótico Efinol®L durante o transporte de tambaqui (Colossoma macropomum) / The use of probiotic Efinol®L during transportation of tambaqui (Colossoma macropomum)

Verificou-se a eficácia da adição de um probiótico potencialmente redutor de estresse, durante o transporte de juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum). Os peixes foram transportados em sacos plásticos com probiótico (20mg/L) ou sem adição do produto à água. O transporte teve duração de 16 horas. Após o transporte, os peixes foram colocados em caixas de 150L para monitorar a recuperação por 96 horas. Para o monitoramento do estresse, avaliaram-se a glicose, o hematócrito e a hemoglobina, além das características de qualidade da água. Após o transporte, a glicose aumentou significativamente, permaneceu elevada nas amostras por 24 e 48 horas e retornou à concentração inicial, 96 horas depois, em ambos os tratamentos. A hemoglobina não se alterou durante e após o transporte, e o hematócrito aumentou significativamente no tratamento sem probiótico nos tempos 24 e 48 horas após o transporte. O probiótico utilizado não foi eficiente em suprimir as respostas de estresse em tambaqui durante o transporte, porém foi eficiente em suprimir as respostas pós-transporte.

The effectiveness of the addition of a potentially stress reducing probiotic during transportation of tambaqui juveniles was studied. Fish were transported with (20mg/L) and without probiotic in the water. The transport duration was 16 hours. After transportation, fish were placed in 150L tanks to monitor their recovery for 96-hours. The following stress parameters were evaluated: glucose, hematocrit, and hemoglobin, and also some water quality parameters. The responses of glucose presented similar pattern between the treatments. Glucose concentrations significantly increased after transportation, kept high for 24 and 48-hours after transportation, and returned to control-like concentration at 96-hours after transportation. Hemoglobin did not present significant difference during or after transportation. Hematocrit significantly increased in probiotic-free treatment at 24 and 48 hours after transportation. The stress response in tambaqui was similar between the tested treatments, indicating that the used probiotic was not efficient in suppressing the stress during transportation; however, it was able to mitigate post-transportation stress response.

Diversidade genética de estoques de reprodutores de Colossoma macropomum / Genetic diversity of Colossoma macropomum broodstocks

Analisou-se a diversidade genética de estoques de reprodutores de Tambaqui (Colossoma macropomum), mediante o uso de marcador RAPD, utilizando-se 10 primers para analisar 30 amostras do estoques de reprodutores das pisciculturas de Boa Esperança e Vale Verde, localizadas no Estado de Rondônia. A porcentagem de fragmentos polimórficos e o índice de diversidade genética de Shannon foram altos nos dois estoques de reprodutores. O estoque de reprodutores de Boa Esperança apresentou um fragmento exclusivo. A diferenciação genética foi baixa e o número de migrantes por geração foi alto entre os estoques de reprodutores. O dendrograma não separou os indivíduos dos estoques de reprodutores em grupos distintos. Há alta variabilidade genética nos estoques de reprodutores, um pouco inferior no estoque de Vale Verde, e há grande proximidade genética entre os indivíduos dos estoques de reprodutores.

The genetic diversity of tambaqui (Colossoma macropomum) broodstocks from two hatchery station in Rondônia State was studied by the RAPD marker. Ten primers were used to analyze 30 broodstocks samples from the hatchery stations of Boa Esperança and Vale Verde. The polymorphic fragments percentage and Shannon genetic diversity index were high in the two broodstocks. The Boa Esperança broodstock presented an exclusive fragment. The genetic differentiation was low and the number of migrants per generation was high among the broodstocks. The dendrogram did not separate the broodstocks individuals in different groups. The results indicate a high genetic variability in the broodstocks, being a little bit lower in the Vale Verde broodstock. Besides, there is a genetic proximity among the broodstocks.

Suplementação de metionina e/ou lisina em rações para juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum Cuvier, 1818)

It was evaluated the effect of the reduction of crude protein level (CP) and the lysine and/or methionine supplementation in total ammonia nitrogen excretion on tambaqui (Colossoma macropomum) juveniles. The experiment developed in a factorial and randomized design with two levels of protein contents (20% and 25% CP) and four levels of amino acid supplementation: a) Dl-methionine (0% of CP) and L-lysine (0% of CP), b) Dl-methionine (3% of CP), c) L-lysine (5% of CP), d) Dl-methionine (3% of CP) + L-lysine (5% of CP), during 55 days. The water sampling from experimental units was done at 3 moments (1(0) day, 27(0) day e 55(0) day). In these days, 3 samples of each experimental unit were collected in elapsing of the time (08:00 a.m., 02:00 p.m. and 08:00 p.m.). The ammonia excretion data were analysed by repeated-measures ANOVA (p>0,05) with time as within effect. The reduction of 5% in diet protein, decreased in 28,4% total ammonia excretion decreased, however, the lysine and methionine supplementation did not influenced this factor.

Foi avaliado o efeito da redução dos níveis de proteína e a suplementação de metionina e/ou lisina em rações sobre a excreção de amônia em juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum). O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado com esquema fatorial de duas entradas: 2 níveis protéicos (25 e 20%) e 4 níveis de inclusão de aminoácidos: a) 0% de suplementação, b) DL-Metionina (3% da PB), c) L-lisina (5% da PB) e d) Dl-Metionina (3% da PB) + L-lisina (5% da PB), com duração de 55 dias. A coleta de água das unidades experimentais ocorreu em três momentos (1º dia, 27º dia e 55º dia) durante o período experimental. Nestes dias, foram realizadas 3 coletas de amostras de água para análise de amônia de cada unidade experimental (08:00 , 14:00 e 20:00 horas). Os dados de excreção de amônia foram analisados por ANOVA com medidas repetidas no tempo a 5% do nível de significância. A redução em 5% do nível de proteína na dieta gerou uma diminuição de 28,4% na excreção de amônia. Contudo, a suplementação de lisina e metionina não influenciaram esta diminuição.

Avaliação espermática pós-descongelamento em tambaqui, Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) / Sperm evaluation of tambaqui, Colossoma macropomum (Cuvier, 1818), after thawing

Este estudo testa procedimentos de congelamento do sêmen de tambaqui, Colossoma macropomum , e eficiência na fertilização de ovócitos. Sêmen de um reprodutor induzido hormonalmente foi amostrado e armazenado em tubos de ensaio. O material foi diluído em soluções crioprotetoras (dimetilacetamida [DMA], dimetilsulfóxido [DMSO], metanol, propilenoglicol e etilenoglicol) (proporção de 1:3; sêmen:diluente), e submetido a procedimentos de rotina de congelamento. A motilidade foi avaliada antes e depois deste procedimento. Testes de fertilização foram feitos com o sêmen criopreservado. A motilidade pré-congelamento foi de 80 por cento e após o congelamento foi de 20-25 por cento para propilenoglicol e etilenoglicol, 5-10 por cento para DMSO e 5 por cento para DMA e metanol. A fertilização foi de 76 por cento e 88 por cento para propilenoglicol e etilenoglicol, respectivamente.

This work tests freezing procedures of tambaqui, Colossoma macropomum , and efficiency in egg fertilizing. Sperm of a hormonally induced reproducer was collected and stored in assay pipes. The material was diluted in cryoprotectant solutions (dimetilacetamida [DMA], dimetilsulfóxido [DMSO], metanol, propilenoglicol e etilenoglicol) (1:3 ratio: sperm:diluting), and subjected to routine freezing procedures. The motility was evaluated before and after this procedure. Fertilization tests were made with cryopreserved sperm. The motility was evaluated before and after these tests. Fertilization tests were made with the cryopreserved semen. The pre-freezing motility was 80 percent, and after freezing, it was 20-25 percent for propilenoglicol and etilenoglicol, 5-10 percent for DMSO and 5 percent for DMA and methanol. The fertilization was 76 percent and 88 percent for propilenoglicol and etilenoglicol, respectively.