One Plus One is Better than Two: An Approach Towards a Single Blastocyst Transfer Policy for All IVF Patients / Um mais um é melhor que dois: Uma abordagem pela prática da transferência de embrião único para todos os pacientes de FIV

Abstract Objective It is known that the single embryo transfer (SET) is the best choice to reduce multiples and associated risks. The practice of cryopreserving all embryos for posterior transfer has been increasingly performed for in vitro fertilization (IVF) patients at the risk of ovarian hyperstimulation syndrome or preimplantation genetic testing for aneuploidy. However, its widespread practice is still controverse. The aim of this study was to evaluate how effective is the transfer of two sequential SET procedures compared with a double embryo transfer (DET) in freeze-only cycles. Methods This retrospective study reviewed 5,156 IVF cycles performed between 2011 and 2019, and 506 cycles using own oocytes and freeze-only policy with subsequent elective frozen-thawed embryo transfers (eFET) were selected for this study. Cycles having elective SET (eSET, n = 209) comprised our study group and as control group we included cycles performed with elective DET (eDET, n = 291). In the eSET group, 57 couples who had failed in the 1st eSET had a 2nd eFET, and the estimated cumulative ongoing pregnancy rate was calculated and compared with eDET. Results After the 1st eFET, the ongoing pregnancy rates were similar between groups (eSET: 35.4% versus eDET: 38.5%; p =0.497), but the estimated cumulative ongoing pregnancy rate after a 2nd eFET in the eSET group (eSET + SET) was significantly higher (48.8%) than in the eDET group (p < 0.001). Additionally, the eSET +SET group had a 2.7% rate of multiple gestations, which is significantly lower than the eDET group, with a 30.4% rate (p < 0.001). Conclusion Our study showed the association of freeze-only strategy with until up to two consecutive frozen-thawed eSETs resulted in higher success rates than a frozenthawed DET, while drastically reducing the rate of multiple pregnancies.

Resumo Objetivo Sabe-se que a transferência de embrião único (SET) é a melhor escolha para reduzir as gestações múltiplas e riscos associados. A prática da criopreservação de todos os embriões para transferência posterior tem sido cada vez mais utilizada para fertilização in vitro (FIV), em especial quando há risco de síndrome de hiperestimulação ovariana ou realização de teste genético pré-implantacional. Entretanto, sua utilização disseminada ainda é controversa. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de duas SET sequenciais em comparação com uma transferência de embrião dupla (DET) em ciclos de FIV onde todos os embriões foram criopreservados. Métodos Neste estudo retrospectivo foram revisados 5.156 ciclos de FIV realizados entre 2011 e 2019, e 506 ciclos usando oócitos próprios e criopreservação de todos os embriões com transferências eletivas subsequentes de embriões descongelados, foram selecionados para este estudo. Ciclos com transferência eletiva de embrião único (eSET, n = 209) compuseram nosso grupo de estudo e como grupo de controle incluímos os ciclos com transferência eletiva de dois embriões (eDET, n = 291). No grupo eSET, 57 casais que falharam na 1ª tentativa de eSET tiveram uma 2ª eFET e a taxa de gravidez em curso cumulativa foi estimada para o grupo eSET e comparada com o grupo eDET. Resultados Após a 1ª eFET, as taxas de gravidez em curso foram semelhantes entre os grupos (eSET: 35,4% versus eDET: 38,5%; p = 0,497), mas a taxa de gravidez em curso cumulativa estimada após a 2ª eFET no grupo eSET (eSET + SET) foi significativamente maior (48,8%) do que no grupo eDET (p <0,001). Além disso, as taxas de gestação múltipla foram expressivamente inferiores no grupo eSET + SET (2,7%) quando comparado ao grupo eDET (30,4%; p < 0,001). Conclusão Nosso estudo mostrou que a associação das estratégias de congelamento de todos os embriões com até duas eSETs sequenciais resultou em maiores taxas de sucesso do que uma DET com embriões descongelados, além de reduzir drasticamente a ocorrência de gestações múltiplas.

Asynchrony between in vivo and in vitro rabbit embryos

Background: Comparative features of embryos developed under in vitro and in vivo conditions are particularly important in designing embryo transfer procedures that fulfil embryo-recipient synchronization requirements. Objective: To determine the degree of asynchrony in rabbit embryo development between cultured and in vivo embryos. Methods: A total of 55 non- lactating multiparous female rabbits were used. Embryos were classified as 16-cells or early morulae at 48 hours post-coitum (hpc). Embryos were cultured during 30 or 32 h and embryo development was compared with in vivo embryos of 72 hpc. In vitro and in vivo embryos at 72 hpc were classified as early or compacted morulae. Bayesian statistics was used. Difference between in vivo and in vitro embryos and the actual probability of the difference between the in vivo and in vitro embryo higher than zero (P) was estimated. Results: The percentage of compacted morulae was higher in in vivo embryos than in in vitro embryos with +6 h of asynchrony (73.5 and 32.8%, P=1.00). But the percentage of compacted morulae was similar with +8 h asynchrony. Conclusions: In vitro embryos delay their development by + 8 hours compared to in vivo embryos.

Antecedentes: El desarrollo comparativo de embriones producidos in vitro e in vivo es particularmente importante para el diseño de procedimientos de transferencia de embriones cuando se requiere sincronización entre el embrión y la hembra receptora. Objetivo: Determinar el grado de asincronía en el desarrollo embrionario entre embriones in vivo y cultivados. Métodos: Un total de 55 conejas multiparas no lactantes fueron utilizadas. Los embriones se clasificaron en 16 células o mórulas tempranas a las 48 horas después del coito (hpc). Los embriones se cultivaron durante 30 ó 32 horas y el desarrollo embrionario se comparó con embriones de 72 hpc obtenidos in vivo. Los embriones in vitro e in vivo a 72 hpc se clasificaron como mórulas tempranas o compactas. Se utilizó estadística bayesiana. Se estimó la diferencia entre embriones in vivo e in vitro y la probabilidad de que la diferencia sea superior a cero (P). Resultados: El porcentaje de mórulas compactas fue mayor en embriones in vivo que en embriones in vitro con +6 horas de asincronía (73,5 y 32,8%, P=1,00), pero el porcentaje de mórulas compactas fue similar con asincronía de +8 horas. Conclusión: Los embriones cultivados retrasan +8 horas su desarrollo en comparación con los embriones in vivo.

Antecedentes: A aquisição do desenvolvimento de embriões produzidos in vitro e in vivo é particularmente importante na concepção de procedimentos de transferência de embriões em que a sincronização entre o embrião e a fêmea receptora é necessária. Objetivo: Determinar o grau de assincronia no desenvolvimento embrionário entre embriões cultivados e in vivo. Métodos: Um total de 55 coelhos multíparos não lactantes foram usados. Os embriões foram classificados em 16 células ou mórulas iniciais 48 horas de gestação (hpc). Os embriões foram cultivados por 30 ou 32 horas e o desenvolvimento embrionário foi comparado com embriões de 72 hpc obtidos in vivo. Embriões in vitro e in vivo a 72 hpc foram classificados como mórulas precoces ou compactadas. Estatísticas bayesianas foram usadas. A diferença entre embriões in vivo e in vitro e a probabilidade de que a diferença seja maior que zero (P) foi estimada. Resultados: A porcentagem de mórulas compactadas foi maior em embriões in vivo do que em embriões in vitro com +6 horas de assincronia (73,5 e 32,8%, P=1,00). Mas a porcentagem de mórulas compactadas foi semelhante com assincronia de +8 horas. Conclusão: Embriões cultivados atrasam seu desenvolvimento em +8 horas em comparação com embriões in vivo.

Is There Any Effect of the Physician Performing Embryo Transfer in IVF-ICSI Treatment: A Prospective Cohort Study / Existe algum efeito domédico que realiza a transferência de embriões no tratamento de FIV-ICSI: Um estudo de coorte prospectivo

Abstract Objective To evaluate whether there is an effect of the physician who transfers the embryos on pregnancy rates in in vitro fertilization-intracytoplasmic sperm injection (IVF-ICSI) treatment. Methods A total of 757 participants were analyzed between 2012 and 2017. Participants were classified according to 3 physicians who transferred the embryos: ([group 1=164 patients]; [group 2=233 patients]; [group 3=360 patients]). Baseline parameters and IVF-ICSI outcomes were compared between the groups. Results No differences were determined between the groups regarding the baseline parameters (age, age subgroups [20-29, 30-39, and ≥ 40 years old)], body mass index (BMI), smoking status, infertility period, cause of infertility, baseline follicle stimulating hormone, luteinizing hormone, estradiol (E2), thyroid stimulating hormone, prolactin levels, antral follicle count, duration of stimulation, stimulation protocol, gonadotropin dose required, maximum E2 levels, progesterone levels, endometrial thickness on human chorionic gonadotropin (hCG) administration and transfer days (p>0.05). The numbers of oocytes retrieved,metaphase II (MII), 2 pronucleus (2PN), transferred embryo, fertilization rate, day ofembryo transfer, the catheter effect and embryo transfer technique, and clinical pregnancy rates (CPRs) were also comparable between the groups (p>0.05). Conclusion Our data suggests that the physician who transfers the embryos has no impact on CPRs in patients who have undergone IVF-ICSI, but further studies with more participants are required to elucidate this situation.

Resumo Objetivo Avaliar se há ou não efeito do médico que realiza a transferência de embriões nas taxas de gravidez no tratamento com fertilização in vitro-injeção intracitoplasmática de espermatozoide (FIV-ICSI, na sigla em inglês). Métodos Um total de 757 participantes foram analisados entre 2012 e 2017. Os participantes foram classificados de acordo com 3 médicos que transferiram os embriões: ([grupo 1=164 pacientes]; [grupo 2=233 pacientes]; [grupo 3=360 pacientes]). Parâmetros basais e resultados de FIV-ICSI foram comparados entre os grupos. Resultados Nenhuma diferença foi determinada entre os grupos nos parâmetros basais (idade, subgrupos de idade [20-29, 30-39 e ≥ 40 anos)], índice de massa corporal (IMC), tabagismo, período de infertilidade, causa da infertilidade, hormônio folículo estimulante basal , hormônio luteinizante, estradiol (E2), hormônio estimulador da tireoide, níveis de prolactina, contagem de folículos antrais, duração da estimulação, protocolo de estimulação, dose de gonadotrofina necessária, níveis máximos de E2, níveis de progesterona e espessura endometrial na administração de hCG e nos dias de transferência (p>0,05). O número de oócitos recuperados, MII e 2PN, embrião transferido, taxa de fertilização, dia da transferência do embrião, o efeito do cateter e a técnica de transferência de embrião e taxas clínicas de gravidez (RCPs) também foram comparáveis entre os grupos (p>0,05). Conclusão Nossos dados sugerem que o médico que transfere os embriões não tem impacto sobre as RCPs em pacientes que se submeteram a FIV-ICSI, mas mais estudos com mais participantes são necessários para elucidar esta situação.

Impact of Plasmatic Progesterone on the Day of Frozen Embryo Transfer in Hormone-induced Cycles / Impacto da progesterona plasmática no dia da transferência de embriões congelados em ciclos induzidos por hormônios

Abstract Objective To establish a relationship between serum progesterone values on the day of frozen blastocyst transfer in hormone-replaced cycles with the probability of pregnancy, miscarriage or delivery. Methods This was an ambispective observational study including all frozen-thawed embryo transfer cycles performed at our department following in vitro fecundation from May 2018 to June 2019. The outcomes evaluated were β human chorionic gonadotropin (β-hCG)-positive pregnancy and delivery. Groups were compared according to the level of serum progesterone on the day of embryo transfer: the 1st quartile of progesterone was compared against the other quartiles and then the 2nd and 3rd quartiles against the 4th quartile. Results A total of 140 transfers were included in the analysis: 87 with β-HCG>10 IU/L (62%), of which 50 (36%) delivered and 37 had a miscarriage (42%).Women with lower progesterone levels (< 10.7ng/mL) had a trend toward higher β-HCG-positive (72 versus 59%; p>0.05), lower delivery (26 versus 39%; p>0.05) and higher miscarriage rates (64 versus 33%; p<0.01). Comparing the middle quartiles (P25-50) with those above percentiles 75, the rate of pregnancy was similar (60 versus 57%; p>0.05), although there was a trend toward a higher number of deliveries (43 versus 31%; p>0.05) and a lower number of miscarriages (28 versus 45%; p>0.05). These differences were not statistically significant. Conclusion There were no differences in pregnancy and delivery rates related with the progesterone level when measured in the transfer day. The miscarriage rate was higher in the 1st quartile group.

Resumo Objetivo Avaliar se existe alguma relação entre os valores plasmáticos de progesterona no dia da transferência de um blastocisto desvitrificado em ciclos hormonalmente substituídos e a taxa de gravidez, aborto ou nascido vivo. Métodos Estudo observacional, ambispectivo, incluindo todos os ciclos de transferência de blastocistos congelados no nosso departamento, entre maio de 2018 e junho de 2019. Avaliou-se a taxa de gravidez e de nascidos vivos após 24 semanas de gestação. Os grupos foram comparados de acordo com os valores de progesterona plasmáticos dosados no dia da transferência do blastocisto: comparou-se o 1° quartil com os outros e depois os 2° e 3° quartis com o 4°. Resultados Avaliaram-se 140 transferências: 87 com β gonadotrofina coriônica humana (β-HCG)>10 IU/L (62%), 50 das quais terminaram em nascido vivo (36% do total), enquanto 37 tiveram um aborto (42% das gravidezes). Verificou-se uma tendência para menor número de recém-nascidos nas transferências com níveis de progesterona no 1° quartil (<10.7ng/mL) (26 versus 39%; p>0.05) e ummaior número de abortos (64 versus 33%; p<0.01). Comparando o 2° e 3° quartis com o 4°, verificouse que nos casos em que a progesterona estava acima do percentil 75, apesar de uma taxa de gravidez semelhante (60 versus 57%; p>0.05), houve uma tendência para uma maior taxa de nascidos vivos (43 versus 31%; p>0.05) emenor número de abortos (28 versus 45%; p>0.05) abaixo do percentil 75. Estas diferenças não foram estatisticamente significativas. Conclusão Não se verificaram diferenças estatisticamente significativas para taxa de gravidez e de nascido vivo. A taxa de aborto foi maior no primeiro quartil.

Taxa de recuperação e características morfológicas de embriões muares (Equus caballus x Equus asinus) / Recovery rate and morphologic features of cross bred embryos (Equus caballus x Equus asinus)

A Transferência de Embrião (TE) contribuiu efetivamente para a produção de equinos e outras espécies. O mercado de muares tem apresentado um contínuo crescimento, entretanto, a aplicação das biotecnologias para a produção desses animais ainda é escassa. O presente estudo avaliou a taxa de recuperação embrionária e as características dos embriões provenientes do cruzamento de éguas com jumentos. Os embriões foram recuperados entre os dias 6 e 9 após a ovulação, dessa forma foi realizada a avaliação da taxa de recuperação embrionária e avaliação das características relacionadas com a idade, morfologia e diâmetro embrionário. A taxa de recuperação embrionária total foi de 55,9% (71/127), e não apresentou diferença para as colheitas realizadas em diferentes dias (D6-D9). Foram recuperados embriões nos estágios de mórula, blastocisto inicial, blastocisto e blastocisto expandido. O tamanho dos embriões variou entre 147-1688μm e a média do diâmetro de todos os embriões recuperados foi de 438,04μm. A recuperação de embriões muares pode ser realizada entre os dias 6 e 9 após a ovulação, e propicia a recuperação de embriões nos primeiros estágios de desenvolvimento.(AU)

Production biotechnologies, particularly embryo transfer (ET) has constantly been contributed to reproduce horses and other species. The mules market has shown continuous growth, however, the biotechnology for mule assisted reproduction is still scarce. The aim of this study was to evaluate the embryo recovery rate and the features of the embryos from mares bred with donkeys. The embryos recovery attempts were performed on days 6 to 9 after ovulation, in order to evaluate the embryo recovery rate and the features related to age, morphology and embryonic diameter in each day. The overall embryo recovery rate was 55,9% (71/127), and there was no significant difference (p>0,05) on different days (D6-D9). Embryos were recovered in stages of mórula, early blastocyst, blastocyst and expanded blastocyst. The diameter of the embryos ranged from 147-1688μm and the mean diameter of all the embryos collected was 438,04μm. The collection of hybrid embryos might be performed between days 6 and 9 after ovulation, and provides recovery of embryos in the early stages of development.(AU)

Taxas de perda gestacional até 60 dias são afetadas por características cíclicas da égua receptora de embrião Mangalarga Marchador / Rates of pregnancy loss up to 60 days are affected by cyclic characteristics of the Mangalarga Marchador recipient mare

Foram avaliadas taxas de gestação aos 15 dias e perda gestacional entre 15 e 60 dias em 430 transferências de embrião (TE) em éguas Mangalarga Marchador. Diagnósticos de gestação foram realizados entre 15 e 60 dias após TE. Para avaliar os efeitos da duração da fase folicular da receptora, foram formados três grupos: até três dias (<3d); quatro a seis dias (4-6d); sete ou mais dias (>7d). Para avaliar os efeitos do tamanho do folículo pré-ovulatório da receptora, foram formados outros três grupos: menor ou igual a 35mm (Ø<35); maior que 35 e menor ou igual a 45mm (35<Ø<45); maior que 45mm (Ø>45). Os grupos foram comparados pelo teste qui-quadrado (P<0,05). Quanto à duração da fase folicular, as taxas de gestação foram semelhantes (<3d - 83,1%; 4-6d - 86,4%; >d - 86,0%), e a perda gestacional maior em >7d (24,4%) que em <3d(12,0%) e 4-6d (13,3%), estas semelhantes entre si. Quanto ao tamanho folicular, as taxas de gestação foram semelhantes (Ø<35 - 86,4%; 35<Ø<45 - 86,5%; Ø>45 - 81,9%), assim como as de perda gestacional (Ø<35 - 13,2%; 35<Ø<45 - 18,1%; Ø>45 - 10,5%). Razões para a maior perda gestacional no grupo >7dnão foram esclarecidas, mas conclui-se que a duração da fase folicular pode ser fator de escolha de receptoras.

Pregnancy rates were evaluated at 15 days and pregnancy loss between 15 and 60 days on 430 embryo transfers (ET) in Mangalarga Marchador mares. Pregnancy diagnosis was performed between 15 and 60 days after ET. To evaluate the effects of the duration of the follicular phase of the recipient mare, three groups were formed: up to 3 days (<3d); 4 to 6 days (4-6d); 7 or more days (>7d). To evaluate the effects of the size of the pre-ovulatory follicle of the recipient mare, three other groups were formed: below or equal to 35mm (Ø<35); greater than 35 and below or equal to 45mm (35<Ø<45); greater than 45mm (Ø>45). The groups were compared by Chi-square test (P<0.05). Regarding the duration of the follicular phase, pregnancy rates were similar (<3d - 83.1%; 4-6d - 86.4%; >7d - 86.0%), and greater pregnancy loss in >7d (24.4%) than in <3d (12.0%) and 4-6d (13.3%), which were similar. Regarding the follicle size, pregnancy rates (Ø<35 - 86.4%; 35<Ø<45 - 86.5%; Ø>45 - 81.9%) and pregnancy loss (Ø<35 - 13.2%; 35<Ø<45 - 18.1%; Ø>45 - 10.5%) were similar. Reasons for the greatest pregnancy loss in the >7d group have not been elucidated, but we conclude that the duration of the follicular phase may be a factor for choosing recipient mares.

Comparação de diferentes métodos de manejo reprodutivo em receptoras de embrião bovino sobre a taxa de concepção

O objetivo deste experimento foi comparar a taxa de concepção de receptoras de embrião bovino utilizando dois diferentes métodos de manejo reprodutivo nesses animais, como a utilização do estro natural e a sincronização da ovulação para TETF. As 1802 receptoras utilizadas neste estudo foram divididas em dois grupos (controle, n=401 e TETF, n=1401). No grupo controle, os animais não receberam nenhum protocolo hormonal, sendo os embriões transferidos após observação do estro natural. No grupo TETF, as receptoras foram sincronizadas com protocolo hormonal iniciado em um dia aleatório do ciclo estral, com a inserção de um implante intravaginal com 1 g de progestágeno e administração de 2 mg de benzoato de estradiol, sendo esse considerado o dia 0 (D0). No D8, o implante intravaginal foi removido, sendo administrados 0,15 mg de PGF2, 0,5 mg de cipionato de estradiol e 300 UI de eCG. A transferência de embriões foi realizada sete dias após a detecção do estro no grupo controle e no D17 no grupo TETF. O diagnóstico de gestação foi realizado com o auxílio de ultrassom 30 dias após a transferência. Os dados foram avaliados pelo teste do Qui-quadrado, com nível de significância de 5%. Não houve diferença (P=0,3295, P 0,05) entre os grupos (grupo controle: 32,7%; grupo TETF: 30,1%). Desta forma, conclui-se que a utilização dos dois diferentes métodos de manejo reprodutivo mostrou a me