Interação de cepas de Lactobacillus crispatus com Streptococcus agalactiae em culturas celulares mimetizando o ambiente vaginal / Interaction between Lactobacillus crispatus and Streptococcus agalactiae strains in cell cultures mimicking the vaginal environment

A microbiota vaginal é dominada pelo gênero Lactobacillus, mantendo um pH ácido crucial para a saúde. Alterações hormonais e a menopausa podem impactar essa microbiota. Estreptococos do Grupo B (EGB) são associados a infecções neonatais e podem colonizar a microbiota vaginal. A interação entre Lactobacillus e EGB é complexa, com resultados conflitantes em estudos in vitro e in vivo. O uso de probióticos contendo Lactobacillus pode ter benefícios, como alterar a positividade para EGB em um grupo que recebeu o tratamento. Contudo a replicabilidade deste resultado é limitada, e os mecanismos envolvidos nessa interação ainda são pouco elucidados. Portanto o objetivo desse estudo foi caracterizar cepas de EGB, avaliar sua interação com L. crispatus em diversas condições. Neste estudo foram selecionadas seis cepas, pertencentes aos sorotipos Ia, II, III e V. Essas cepas foram caracterizadas de acordo com o sorotipo capsular, presença de genes de virulência (hialuronidase, ß-citolisina/hemolisina, e ilhas de pili 1, 2a e 2b), resistência a antimicrobianos (penicilina, cefepima, vancomicina, eritromicina e clindamicina), curva de crescimento, Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) e Multi-Locus Sequence Typing (MLST). O resultado de MLST identificou os sequence types ST1, ST23 ST28 e ST182, e os clonal complexes CC1, CC19 e CC23. Cepas possuem a maior parte dos genes de virulência testados. Somente uma cepa apresentou alguma resistência, no caso à eritromicina e clindamicina. Resultados que estão de acordo com a literatura como os principais descritos em isolados clínicos. Os ensaios de interação realizados foram: crescimento em co-cultura, formação de biofilme, ensaios de adesão e exclusão em cultura celular e por fim, análise do perfil proteico. Alguns efeitos de L. crispatus no EGB observados foram aumento na formação de biofilme de EGB e diminuição da sua proliferação quando em co-cultura. Contudo esses resultados variaram de acordo com a cepa de EGB. Nos ensaios de competição em cultura celular, a presença de L. crispatus levou à diminuição da adesão em uma cepa pertencente ao sorotipo III, e aumento de adesão em uma cepa pertencente ao sorotipo V. Quando a cultura de células recebeu tratamento prévio de L. crispatus, nos ensaios de exclusão, houve menor adesão de EGB. Contudo todos os efeitos observados são cepa-dependente; não foram encontradas associações entre o comportamento das cepas e seu sorotipo capsular ou fenótipo MLST. Estudos futuros podem elucidar as respostas ativadas na presença de microrganismos comensais

The vaginal microbiota is dominated by the genus Lactobacillus, which helps to maintain a crucial acidic pH for health. Hormonal changes and menopause can impact this microbiota. Group B Streptococcus (GBS) are associated with neonatal infections and can colonize the vaginal microbiota. The interaction between Lactobacillus and GBS is complex, with conflicting results in in vitro and in vivo studies. The use of probiotics containing Lactobacillus may have benefits, such as altering GBS positivity in a treated group. However, the replicability of this result is limited, and the mechanisms involved in this interaction are still poorly understood. The use of probiotics containing Lactobacillus may have some benefits, but further research is needed. These strains were characterized based on capsular serotype, presence of virulence genes (hyaluronidase, ß-cytolysin/hemolysin, and pili islands 1, 2a, and 2b), antimicrobial resistance (penicillin, cefepime, vancomycin, erythromycin, and clindamycin), growth curve, Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP), and Multi-Locus Sequence Typing (MLST) Therefore, the aim of this study was to characterize GBS strains, evaluate their interaction with L. crispatus under various conditions. Six strains were selected for this study, belonging to serotypes Ia, II, III, and V. MLST results identified sequence types ST1, ST23, ST28, and ST182, and clonal complexes CC1, CC19, and CC23. Most strains possessed the tested virulence genes, with only one strain showing resistance to erythromycin and clindamycin. These results are in line with the literature. Interaction assays included co-culture growth, biofilm formation, adhesion and exclusion assays in cell culture, and, finally, protein profile analysis. Some observed effects of L. crispatus on GBS included an increase in GBS biofilm formation and a decrease in GBS proliferation during co-culture. However, these results varied according to the GBS strain. GBS interaction with L. crispatus resulted in increased biofilm formation and decreased proliferation in co-culture. In cell culture competition assays, the presence of L. crispatus led to decreased adhesion in one GBS strain belonging to serotype III and increased adhesion in one strain belonging to serotype V. When cell culture received pre-treatment with L. crispatus, exclusion assays showed lower GBS adhesion. However, all observed effects are strain-dependent; no associations were found between strain behavior and capsular serotype or MLST phenotype. Future studies may elucidate the responses activated in the presence of commensal microorganisms

Beta-lactam antibiotics and viridans group streptococci / Antibióticos beta-lactámicos y estreptococos grupo viridans

Abstract The aim of this review is to present an update on the susceptibility of viridans groupstreptococci (VGS) to -lactam antimicrobials, with emphasis on the Argentinean scenario. VGSare a heterogeneous group including five groups of species, each one exhibiting peculiar sus-ceptibility patterns to penicillin (PEN). Species of the Streptococcus mitis group are frequentlynonsusceptible to PEN. PEN resistance is associated with changes in PEN-binding proteins. InArgentina, one to two thirds of VGS are nonsusceptible to PEN. Third generation cephalosporinsand carbapenems are currently more effective in vitro than PEN against VGS. Mortality was asso-ciated to nonsusceptibility to PEN in at least two studies involving patients with bacteremiacaused by VGS. Treatment of endocarditis due to VGS should be adjusted/to the PEN suscepti-bility of the isolates. Vancomycin may be an alternative choice for treating endocarditis causedby PEN-resistant isolates (MIC 4 g/ml).

Resumen El objetivo de esta revisión es presentar una actualización sobre la sensibilidad de los estreptococos del grupo viridans (EGV) a los antimicrobianos p-lactámicos, con énfasis en el escenario argentino. Los EGV son un grupo heterogéneo que incluye cinco grupos de especies, y cada una presenta su patrón especial de sensibilidad a la penicilina (PEN). Las especies del grupo Streptococcus mitis, con mayor frecuencia, no son sensibles a la PEN. La resistencia a la PEN se asocia con cambios de las proteínas ligadoras de PEN. En la Argentina, de uno a dos tercios de los EGV no son sensibles a la PEN. Las cefalosporinas de tercera generación y los carbapenemes son actualmente más eficaces in vitro que la PEN contra los EGV. La mortalidad se asoció con la no sensibilidad a la PEN en al menos dos estudios de pacientes con bacteriemia por EGV. El tratamiento de las endocarditis por EGV debe ajustarse según la sensibilidad a la PEN de los aislados. La vancomicina podría ser una elección alternativa para el tratamiento de las endocarditis por cepas resistentes a PEN (CIM >4 ^g/ml).

Perfil antibiótico de estreptococos del grupo viridans aislados de cavidad oral en individuos con uso prolongado de antibióticos / Antibiotic profile of viridans streptococci group isolated of oral cavity from patients with prolonged use of antibiotics

RESUMEN Los estreptococos del grupo viridans (EGV) son un grupo heterogéneo de bacterias saprófitas anaerobias facultativas que forman parte de la flora normal de cavidad oral. El incremento de la resistencia antibiótica de este grupo de bacterias cobra importancia en pacientes hospitalizados con terapia antibiótica prolongada, en los cuales estos microorganismos pueden ser sustituidos por bacterias multirresistentes. Objetivos: Determinar el porcentaje de cepas de EGV aisladas de cavidad oral resistentes a los antibióticos utilizados en el tratamiento de diversas patologías infecciosas hospitalarias. Material y Métodos: Estudio observacional descriptivo en el que se incluyeron 60 pacientes hospitalizados con historia de terapia antibiótica por más de 3 semanas. Las muestras se procesaron siguiendo protocolos estandarizados de recolección, aislamiento e identificación para EGV de cavidad oral y un protocolo de pruebas de sensibilidad antibiótica. Los resultados se muestran en tablas y gráficas de frecuencia. Resultados: La principal indicación para terapia antibiótica intrahospitalaria fue infección orofacial: 28,33%. La penicilina fue el antibiótico más utilizado ya sea en terapia única, combinada o múltiple en todos los pacientes. Se aislaron en total 108 cepas de EGV, con un promedio de 1,8 cepas por paciente. La especie predominantemente identificada fue S. mutans. El 96,3% de las cepas de EGV fue sensible a todos los antibióticos incluidos en el panel. Conclusiones: El uso de distintas combinaciones y modalidades de terapia antibiótica no tiene efecto en la susceptibilidad de EGV aislados de cavidad oral en pacientes hospitalizados, independiente de la duración del tratamiento.

ABSTRACT Viridans group streptococci (VGS) are a heterogeneous group of saprophytic facultative anaerobic bacteria that are part of the normal flora of the oral cavity. The increased resistance to multiple antibiotics in this group of bacteria becomes important in prolonged antibiotic therapies inpatient where these common microorganisms are replaced by multi-resistant bacteria. Objectives: To determine the percentage of VGS strains isolated from oral cavity resistant to antibiotics used in hospital infectious diseases. Material and methods: This is a descriptive cross-sectional study that included 60 hospitalized patients with a history of antibiotic therapy for more than 3 weeks. The samples were processed following standardized protocols for collection, isolation and identification of oral cavity VGS and a protocol of antibiotic susceptibility testing. The results are shown in tables and graphics of absolute and relative frequencies. Results: The main indication for antibiotic therapy was orofacial infection with a 28.33%. Penicillin was the antibiotic further used either in single, combined or multiple therapies in all patients. A total of 108 samples (1.8 per patient swabs) were collected. The predominantly identified specie was Streptococcus mutans. The 96.3% of all VGS strains were sensitive to all antibiotics included in the panel. Conclusion: Using different combinations and types of antibiotic therapy inpatient has no effect on the susceptibility of VGS isolated from oral cavity separate from treatment.

Characterization and distribution of viridans group streptococci isolated from infectious endophthalmitis and keratitis / Caracterização e distribuição de estreptococos do grupo viridans isolados de endoftalmite infecciosa e ceratite

ABSTRACT Purpose: The aims of this study were to characterize alpha-hemolytic streptococci among isolates from cases of infectious endophthalmitis and keratitis and to determine their distributions. Methods: The sample included 27 and 35 nonduplicated isolates of alpha-hemolytic streptococci recovered from patients with infectious endophthalmitis (2002-2013) and keratitis (2008-2013), respectively. Isolates were identified by the optochin susceptibility and bile solubility tests, using a biochemical identification system. The minimum inhibitory concentration was determined by the broth microdilution method. Molecular identification was performed by analyses of three constitutive genes and the complementary multilocus sequence. The molecular epidemiology of Streptococcus pneumoniae was investigated using multilocus sequence typing, and the presence of the capsular polysaccharide-encoding gene was assessed using conventional polymerase chain reaction. Outcomes were evaluated using the patients' medical records. Results: Phenotypic tests differentiated S. pneumoniae from other alpha-hemolytic streptococci, consistent with later molecular identifications. Streptococcus oralis was significantly prevalent among the endophthalmitis isolates, as was S. pneumoniae in the keratitis isolates. High levels of susceptibility to antibiotics were observed, including vancomycin, cephalosporins, and fluoroquinolones. High genetic variability was detected among the 19 S. pneumoniae strains, with 15 predicted to be encapsulated. The medical records of patients with infectious endophthalmitis were reviewed (n=15/27; 56%), and final visual acuity was assessed in 12 cases (44%). Many patients progressed to a final visual acuity state of "no light perception" (6/12; 50%), "light perception" (3/12; 25%), or "hand motion" (1/12; 8%). The medical records of patients with infectious keratitis were also reviewed (n=24/35; 69%), and final visual acuity was assessed in 18 cases (51%). Similarly, most patients progressed to a final visual acuity state of "no light perception" (6/18; 33%), "light perception" (1/18; 6%), or "hand motion" (6/18; 33%). Overall, the majority of patients progressed to a final visual acuity state of "no light perception" (12/30), "light perception" (4/30), or "hand motion" (7/30). Conclusions: The distribution of alpha-hemolytic streptococci in ocular infections suggested the presence of a species-specific tissue tropism. The prognoses of patients with ocular streptococcal infections were highly unfavorable, and antibiotic resistance did not contribute to the unfavorable clinical progressions and poor outcomes.

RESUMO Objetivo: O objetivo deste estudo foi caracterizar os estreptococos alfa-hemolíticos isolados de endoftalmite infecciosa e ceratite e determinar sua distribuição. Métodos: A amostra incluiu 27 e 35 isolados não-duplicados de estreptococos alfa-hemolíticos recuperados de pacientes com endoftalmite infecciosa (2002-2013) e ceratite (2008-2013), respectivamente. Os isolados foram identificados pelos testes de suscetibilidade à optoquina e bile solubilidade, utilizando um sistema de identificação bioquímica. A concentração inibitória mínima foi determinada pelo método de microdiluição em caldo. A identificação molecular foi realizada pela análise de três genes constitutivos e análise complementar de sequências multilocus. A epidemiologia molecular do Streptococcus pneumoniae foi investigada por tipagem de sequência multilocus, e a presença do gene codificador do polissacarídeo capsular foi avaliada por reação em cadeia da polymerase convencional. Os resultados foram avaliados utilizando os prontuários médicos dos pacientes. Resultados: Os testes fenotípicos diferenciaram S. pneumoniae dos outros estreptococos alpha-hemolíticos, consistentes com identificações moleculares posteriores. S. oralis foi significativamente prevalente entre os isolados de endoftalmite, assim como S. pneumoniae nos isolados de ceratite. Foram observados altos níveis de suscetibilidade a antibióticos, incluindo vancomicina, cefalosporinas e fluoroquinolonas. Alta variabilidade genética foi detectada entre as 19 cepas de S. pneumoniae, com 15 previstas para serem encapsuladas. Os prontuários médicos dos pacientes com endoftalmite infecciosa foram revisados (n=15/27; 56%), e a acuidade visual final foi avaliada em 12 casos (44%). Muitos pacientes evoluiram para um estado final de acuidade visual de "sem percepção luminosa" (6/12; 50%), "percepção luminosa" (3/12; 25%) ou "movimentos de mãos" (1/12; 8%). Também foram revisados os prontuários médicos dos pacientes com ceratite infecciosa (n=24/35; 69%), e a acuidade visual final foi avaliada em 18 casos (51%). Da mesma foram, a maioria dos pacientes evoluiu para um estado final de acuidade visual de "sem percepção luminosa" (6/18; 33%), "percepção luminosa" (1/18; 6%) ou "movimentos de mãos" (6/18; 33%). No geral, a maioria dos pacientes evoluiu para um estado final de acuidade visual de "sem percepção luminosa" (12/30), "percepção luminosa" (4/30) ou "movimentos de mãos" (7/30). Conclusões: A distribuição de estreptococos alfa-hemolíticos nas infecções oculares sugeriu a presença de um tropismo de tecido específico da espécie. Os prognósticos dos pacientes com infeções oculares por estreptococos foram altamente desfavoráveis e a resistência a antibióticos contribuiu não para as progressões clínicas des­favoráveis e os maus resultados.

Morbilidad de Faringitis Aguda Estreptocócica en el Dispensario del Seguro Social Campesino Llimpe Grande Enero - Junio 2019 / Acute Streptococcal Pharyingitis Morbidity in the Llimpe Grande Peasant Social Security Dispensary January - June 2019

La faringitis bacteriana es una enfermedad infectocontagiosa que históricamente ha afectado al ser humano durante cualquier etapa de su vida, resultando un área de estudió de importancia para la salud pública.Esta investigaciónpresenta el reporte epidemiológico de morbilidad de Faringitis Aguda Estreptocócica (FAE) atendidos en el dispensario del Seguro Social Campesino Llimpe Grande durante los meses de enero a julio del año 2019. Esto se logró, en dos fases apartir de la revisión de 2538 registros de morbilidad atendidos en el periodo de estudio, correlacionando los caracteres diagnósticos clínicos con la resolución de casos posterior a la indicación del tratamiento con terapia de antibióticos, información levantada a partir del 10% de historias clínicas, corroborando la misma con la población médica (n=9).La información fue analizada en Excel para la determinación de intervalos de confianza apoyado en estadística descriptiva.La FAE en el caso de Ecuador se asocia ala época húmeda, con prevalencia hacia el sexo femenino (Rm=0,2) para el periodo en estudio. Sintomatología:úvula inflamada enrojecida, petequias suaves, náuseas, dolor abdominal degarganta. Los casos se presentan en todas las edades con predominio en el grupo de 18 a 64 años. El 100% de los casos respondieron a la terapia de antibióticos solo un 1,14% no respondió a la antibioterapia por abandonar en forma tempranael mismo.Aún quedan preguntas por responder, por lo que hacemos un llamado a la comunidad científica en general a realizar acciones tendentes a optimizar los registros FAE, robusteciendo a futuro los reporte epidemiológico(AU)

Bacterial pharyngitis is an infectious disease that has historically affected humans during any stage of their life, resulting in an area of study of importance for public health. This research presents the epidemiological report of morbidity of Acute Streptococcal Pharyngitis (AED) treated at the Llimpe Grande Peasant Social Security dispensary during the months of January to July 2019. This was a chieved, in two phases, from there view of 2538 morbidity records attended in the study period, correlating the clinical diagnostic characteristics with there solution of cases after the indication of treat ment with antibiotic therapy, information gathered from the 10% of medical records, corroborating the same with the medical population (n = 9). The information was analyzed in Excel for the determination of confidence intervals supported by descriptive statistics. FAE in the case of Ecuador is associated with the wetseason, with a prevalence tow ards the female sex (Rm = 0.2) for the period understudy. Symptoms: red swollenuvula, mildpetechiae, nausea, abdominal sorethroat. Cases occur in all ages with a predominance in the 18 to 64 age group. 100% of the cases responded to antibiotictherapy, only 1.14% did not respond to antibiotic therapy dueto abandoning it early. There are still questions to be answered, so we call on the scientific community in general to take action saimed at optimizing AED records, streng the ning the epidemiological reports in the future(AU)

Prevalence of rectovaginal colonization by group B Streptococcus in pregnant women seen at prenatal care program of a health organization / Prevalência de colonização retovaginal por estreptococo do grupo B em gestantes de programa de atendimento pré-natal de instituição de saúde

ABSTRACT Objective To evaluate the prevalence of group B Streptococci in pregnant women of a corporate health program, as well as the epidemiological correlations. Methods This retrospective study used medical records of patients who participated of the prenatal care program at a private hospital in the city of São Paulo (SP), Brazil, from 2015 to 2016. Those who abandoned the program or had incomplete data in their medical records were excluded. Quantitative variables were described by means, standard deviations, median, minimal and maximal values. Parity and socioeconomic status were described by absolute frequency and percentages. We used logistic regression models in the software (SPSS) to analyze correlations of variables according to vaginal-rectal culture, considering a 95%CI and p-values. Variables were age, number of pregnancies, weight gain in pregnancy and gestational age at delivery. Results A total of 347 medical records were included, and after applying the exclusion criteria, 287 medical records composed the final sample. Patients' age ranged between 17 and 44 years. Mean age was 30.6 years, 67 patients had positive result for group B Streptococcus (prevalence of 23.3%; 95%CI: 18.7-28.5). Conclusion Considering the high prevalence of group B Streptococcus in our service, the antibiotic prophylaxis strategy based on rectovaginal culture screening approach seems to be cost-effective.

RESUMO Objetivo Identificar a prevalência de estreptococo do grupo B entre gestantes que frequentaram um programa de saúde corporativa, bem como as correlações com a colonização positiva. Métodos Estudo retrospectivo dos prontuários do pré-natal de um hospital privado em São Paulo, no período de 2015 a 2016. Foram excluídas as mulheres que abandonaram o programa ou apresentavam dados incompletos nos prontuários. As variáveis quantitativas foram descritas por média, desvios padrão, mediana, valores mínimos e máximos. A paridade e a condição socioeconômica foram descritos por frequência absoluta e percentagens. Utilizamos modelos de regressão logística no programa (SPSS) para analisar as correlações de variáveis de acordo com a cultura retovaginal, considerando IC95% e valores de p. As variáveis foram idade, número de gestações, peso ganho na gestação e idade gestacional no parto. Resultados Foram incluídos 347 prontuários e, após a aplicação dos critérios de exclusão, 287 prontuários compuseram a amostra final. A idade dos pacientes variou entre 17 e 44 anos. A média de idade foi de 30,6 anos, e 67 pacientes tiveram resultado positivo para o estreptococo do grupo B (prevalência de 23,3%; IC95%: 18,7-28,5). Conclusão Considerando a alta prevalência de estreptococos do grupo B em nosso serviço, existem evidências de que a estratégia de antibiótico profilaxia baseada na cultura retovaginal é custo-efetiva.

Validation of an adherence assay to detect group mutans streptococci in saliva samples / Validación del Test de adherencia para el recuento de estreptococcos del grupo mutans en muestras de saliva

The aim of the present study was to validate and establish a cut off point and the predictive value of an adhesion test (AA-MSMG), as a microbiological method for evaluating cariogenic risk. The study is based on a variant (20% sucrose) of a selective medium descripted by Gold et al. (MSMG). This method differentiates mutans group streptococci (MGS) by exacerbating the production of insoluble extracellular polysaccharide which gives adhesion to surfaces such as glass, plastic and dental enamel. Caries assessment according to ICDAS was conducted in 154 patients (aged >21 years) who were attended at Preventive and Community Dentistry Department, School of Dentistry, University of Buenos Aires, Argentina, between August 2017 to August 2018. The study population was assigned to groups according to the presence/ absence of caries lesions: Group A: ICDAS lesion code = 0 (L=0) on all dental surfaces (n=23); and Group B: L>1 (n=131). After mouth-rinsing with distilled water, saliva samples were collected with fasting and hygiene protocol, and sent immediately to the Microbiological Diagnosis Laboratory, Microbiology Department, School of Dentistry, University of Buenos Aires. Samples were homogenized and serially diluted to the tenth. 100 pl of the dilutions were cultured in 25 cm² sterile plastic flasks containing 9.9 ml of modified selective medium described by Gold (MSMG-selective and differential medium). Cultures were incubated in an anaerobic atmosphere at 36 ± 1°C for 48 hours. The supernatants were eluted and the samples washed with sterile distilled water. Colony forming unit counts were performed by calibrated researchers (Kappa >0.75) using a stereoscopic microscope at 50X. Mutans group streptococci (MGS) counts ranged from 1x10(4) to 1x10(5) CFU/ml in group A, and were higher than 1x10(6) CFU/ml in Group B. Statically analysis of results (ROC) showed that the AAMSMG has a satisfactory predictive value (91%) and established a cutoff point in 1.68x10(5) UFC / ml. This would indicate that individuals whose MGS saliva counts are higher than the cutoff value would be 5 times more likely to develop dental caries. Adherence assay could be a useful microbiological predictor of caries risk.

El objetivo del presente estudio fue validar, establecer el punto de corte y valor predictivo de una técnica microbiológica para evaluar el nivel de estreptococos del grupo mutans en saliva. La técnica consiste en un test de adherencia que emplea un medio selectivo modificado (20% sacarosa) descripto por Gold et al. (TA-MSMG). Este método permite diferenciar a los estreptococos del grupo mutans (SGM) exacerbando la producción del polisacárido extracelular insoluble que le confiere adhesión a superficies como vidrio, plástico y esmalte dental. De acuerdo con los criterios de ICDAS se sembraron 154 salivas de pacientes mayores de edad, que asistieron al Servicio de Odontología Preventiva y Comunitaria de la Facultad de Odontología de la Universidad de Buenos Aires entre los meses de agosto de los años 2017 y 2018. La población estudiada fue asignada a dos grupos según la presencia / ausencia de lesiones de caries: Grupo A: código de lesión ICDAS = 0 (L = 0) en todas las superficies dentales (n = 23); y Grupo B: L> 1 (n = 131). Después de realizar un enjuague bucal con agua destilada, las muestras de saliva se recogieron según protocolo (ayuno de 4 horas y suspensión de higiene dental de 12 hs). Las muestras se remitieron de inmediato al Laboratorio de Diagnóstico Microbiológico, Departamento de Microbiología de la Facultad de Odontología, Universidad de Buenos Aires. Para su procesamiento, las muestras fueron homogeneizadas y diluidas al décimo. Se cultivaron 100 pl de las diluciones en botellas de plástico estériles de 25 cm² que contenían 9,9 ml de medio de Gold modificado (MSMG-20% sacarosa). Los cultivos se incubaron en atmósfera anaeróbica a 36 ± 1°C durante 48 horas. El sobrenadante se eluyó y las muestras se lavaron con agua destilada estéril. Los recuentos de unidades formadoras de colonias SGMfueron realizados por investigadores calibrados (Kappa >0.75) utilizando un microscopio estereoscópico a 50X. Los recuentos de SGM presentaron una variación entre 1x10(4)y 1x10(5) UFC/ml en el grupo A, mientras que en el Grupo B fueron superiores a 1x10(6) UFC/ml. El análisis estadístico de los resultados determinó una curva ROC que establece para el TA-MSMG un valor predictivo del 91% y un punto de corte en 1.68x10(5) UFC SGM / ml. Esto indicaría que los individuos cuyos recuentos en saliva de SGM sean superiores al valor de corte, tendrían 5 veces más posibilidades de desarrollar caries (5:1). Este método podría ser un instrumento útil al momento de evaluar (indicador microbiológico) el riesgo cariogénico del paciente.

Endocarditis infecciosa nativa en pediatría: enfoque clínico cardiológico / Native valve infective endocarditis in children: From the focus of clinical cardiology

Objetivos: Analizar las características demográficas, clínicas, microbiológicas, evolución y factores de riesgo de morbimortalidad asociados a la endocarditis de válvula nativa (EIN) en pacientes (p) pediátricos. Población y métodos: Se evaluaron 176 p con EIN, divididos en grupo I: <3meses (27p) y grupo II: >3meses (149p). Resultados: Grupo I: el 66% tenía corazón sano. El microorganismo más frecuente fue Staphylococcus aureus (44,4%). Afectación derecha (77,8%-p<0,0001). Evento principal: infección no controlada (INC) (52%, p=0,0009) y asociada a Candida (p<0,00001). Se indicó tratamiento quirúrgico a 10 p (37%). Mortalidad 29,6%(8p). Grupo II: el 57% presentaba cardiopatía previa. Microorganismos prevalentes: S.aureus (49,1%) y estreptococos del grupo viridans (22,5%). Hubo compromiso predominantemente izquierdo (p=0,001). Eventos: embolias sistémicas (36,2%-p=0,01), perforación valvular (51%-p=0,0005), insuficiencia cardíaca (26%-p=0,03) e INC (21,5%). La embolia sistémica se asoció a S.aureus (p=0,01). El 36,2% requirió cirugía. Mortalidad 6,7% (10p). En el análisis univariado la mortalidad se asoció a edad <3meses (p=0,0003), INC (p=0,002) y S.aureus (p=0,03). En el multivariado la mortalidad se relacionó a edad < 3meses (OR:7,50 ­IC95%:1,77­31,69) y a INC (OR:4,2-IC95%:1,16­15,29). Conclusiones: La EN se presentó en pacientes con corazón sano en el 50% de los casos. El microorganismo más frecuente fue S.aureus. En los <3 meses la infección no controlada fue la complicación más frecuente asociada a Candida, con afectación predominante de cavidades derechas. Los >3meses tuvieron mayor prevalencia de perforación valvular izquierda asociada a embolias sistémicas e insuficiencia cardíaca. El 35% de los p requirió cirugía. Los predictores de mortalidad fueron la edad <3meses y la INC.

Objectives: To analyze demographic, clinical, and microbiological, outcome, and morbidity and mortality risk factors associated with native valve endocarditis (NVE) in pediatric patients (p). Population and methods: 176 p with NVE were evaluated and divided into group I: <3 months (27p) and group II: >3 months (149p). Results: Group I: 66% had a healthy heart. The most common microorganism was Staphylococcus aureus (44.4%). Right-sided involvement (77.8%-p<0.0001). Main event: Uncontrolled infection (UCI) (52%, p-0.0009) and association with Candida (p<0.00001). Surgical treatment was indicated in 10 p (37%). Mortality was 29.6% (8p). Group II: 57% had previous heart disease. Prevalent microorganisms: S. aureus (49.1%) and viridans group streptococci ( (22.5%). Left-sided involvement predominated (p-0.001). Events: systemic embolism (36.2%-p-0.01), valve perforation (51%-p-0.0005), heart failure (26%-p-0.03), and UCI (21.5%). Systemic embolism was associated with S. aureus infection (p-0.01). 36.2% required surgery. Mortality was 6.7% (10p). In univariate analysis, mortality was associated with age <3 months (p-0.0003), UCI (p-0.002), and S. aureus infection (p-0.03). In multivariate analysis, mortality was related to age <3 months (OR:7.50 ­ 95% CI:1.77­31.69) and UCI (OR:4.2 -95% CI:1.16­15.29). Conclusions: NVE was observed in patients with a healthy heart in 50% of cases. The most common microorganism found was S. aureus. In the <3 months group, uncontrolled infection was the most common complication associated with Candida, predominantly affecting the right side. The >3 months group had a higher prevalence of left-valve perforation associated with systemic embolism and heart failure. 35% of p required surgery. Predictors of mortality were age <3 months and UC (AU)

Identificación y sensibilidad a los antimicrobianos de aislados de estreptococos del grupo viridans provenientes de pacientes internados en un hospital universitario de la ciudad de Buenos Aires / Identification and antibiotic susceptibility of viridans group streptococci isolates recovered from patients hospitalized at a teaching hospital in Buenos Aires City

Los estreptococos del grupo viridans (EGV) son agentes causales de infecciones localizadas e invasivas. Dada la gravedad de las infecciones producidas por EGV sumada a las escasas comunicaciones actuales en nuestro país, los objetivos de este trabajo fueron la identificación y el estudio de la sensibilidad a los antibióticos de aislados caracterizados como EGV, recuperados de pacientes internados, para actualizar el conocimiento sobre el perfil de resistencia y la epidemiología de las infecciones ocasionadas por EGV. Se recuperaron 132 aislados de EGV en el Hospital de Clínicas «José de San Martín¼ en el período 2011-2015. La identificación se realizó mediante pruebas convencionales y espectrometría de masas (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight Mass Spectrometry). El grupo Streptococcus anginosus fue el más frecuente (42%) seguido por el grupo Streptococcus mitis (33%). Dentro del grupo S. mitis se excluyó a Streptococcus pneumoniae. El 100% de los aislados fue sensible a ertapenem, linezolid y vancomicina; el 96,9% a cef-triaxona y cefepima. Se encontró un 25,8% de resistencia a penicilina (I+R) fundamentalmente en aislados de grupo S. mitis. La resistencia a tetraciclina fue del 27,2% y solo 2/132 aislados fueron resistentes a levofloxacina. Los valores de CIM de gentamicina oscilaron entre 0,5 y 32 -og/ml. El 17,4% de los aislados presentó resistencia a eritromicina sin diferencia significativa en la distribución de fenotipos M y MLS. Los resultados muestran la importancia de la vigilancia continua de las infecciones producidas por estos microorganismos con el fin de generar aportes para la elección de la terapia antibiótica adecuada.

Members of the viridans group streptococci (VGS) are the cause of local and invasive infections. Due to the severity of these infections and taking into account that reports regarding epidemiological aspects are scarce, the aims of this work were the identification and the study of the antibiotic susceptibility profiles of the isolates recovered from patients that were hospitalized in order to find out about the resistance level and the epidemiology of infections in which VGS are involved. A hundred and thirty two isolates identified as VGS were isolated at Hospital de Clínicas «José de San Martín¼ during the period 2011-2015. The identification was performed by biochemical test and mass spectrometry by Matrix Assisted Laser Desorption Ionization -Time of Flight Mass Spectrometry. Streptococcus anginosus group was prevalent (42%) followed by Streptococcus mitis group (33%). In the latter, isolates of Streptococcus pneumoniae were excluded. All the VGS isolates were susceptible to ertapenem, meropenem, linezolid and vancomycin; 25.8% were resistant (I+R) to penicillin, being prevalent in the S. mitis group. Regarding ceftriaxone and cefepime 96.9% of the isolates were susceptible. Only two isolates were resistant to levofloxacin, 27.2% to tetracycline and it was not found high level resistance to gentamycin (MIC range 0.5-32 µg/ml). Resistance to erythromycin was 17.4% with no significant difference between M and MLS phenotypes. The most active antibiotics were in addition to ceftriaxone and cefepime, vancomycin, ertapenem, meropenem and linezolid. These results highlight the importance of the continuous surveillance of the infections caused by VGS in order to predict a correct antibiotic therapy.

Streptococcus agalactiae - Distribuição sorotípica e relação com fatores de virulência e resistência antimicrobiana / Streptococcus agalactiae - Serotype distriburion and correlation with virulence factors and antibiotic resistance

Streptococcus agalactiae, ou Estreptococo do Grupo B, é um microrganismo que encontrado na microbiota intestinal, vaginal e/ou geniturinária de 10-30% de mulheres saudáveis. A principal infecção causada por S. agalactiae é a sepse neonatal. O bebê pode adquirir o microrganismo durante o parto ao passar pelo canal vaginal, ou até mesmo durante a gestação, caso haja ascensão de S. agalactiae para o útero. Existem diversos fatores associados à infecção do feto por S. agalactiae quando a mãe é colonizada, tais como fator CAMP, cápsula de polissacarídeos, hialuronidase, ß-citolisina/hemolisina e pili. Não existe consenso ou recomendação técnica sobre o tema no Brasil. Segundo o Caderno de Atenção Básica ao Pré-Natal, não existem estudos que levem à recomendação da antibioticoterapia intraparto. É necessário elucidar as características genotípicas de cepas de S. agalactiae isoladas no Brasil para alinhar as práticas clínicas às características fenotípicas do microrganismo. Desta forma, os objetivos deste projeto são: i) classificar cepas de S. agalactiae isoladas de gestantes e não gestantes quanto ao sorotipo capsular, por PCR Multiplex, ii) avaliar a presença e distribuição de fatores de virulência, por PCR e iii) avaliar o perfil de resistência antimicrobiana, pelo método de disco difusão e teste D. Os achados de virulência e resistência a antimicrobianos foram comparados com os sorotipos, gestação, localização geográfica e sítio de isolamento. Foram analisadas 292 cepas isoladas de gestantes e não gestantes em São Paulo, São José dos Campos e Rio de Janeiro. O sorotipo Ia foi o mais prevalente entre as cepas. Na cidade de São José dos Campos não houve diferença significativa entre a prevalência dos sorotipos Ia e V, sendo que o sorotipo V foi mais abundante do que nas cidades de São Paulo e Rio de Janeiro. O sorotipo II foi mais abundante em mulheres não gestantes do que gestantes. Não foram encontradas cepas resistentes à Penicilina e vancomicina; contudo a resistência a Cefepima, Eritromicina e Clindamicina ficou em torno de 22%. Foram encontradas diferenças entre os sorotipos quanto à resistência, genes de virulência e sítio de isolamento das cepas. Portanto essas diferenças podem se refletir no perfil epidemiológico da infecção por S. agalactiae quanto à localização geográfica também quanto à gestação. A incidência de sepse causada por S. agalactiae diminuiu muito nas últimas décadas, contudo o monitoramento constante é necessário para alinhar as práticas clínicas às características fenotípicas do microrganismo

Streptococcus agalactiae, or Group B Streptococcus, is a microorganism found in intestinal, vaginal and/or genitourinary microbiota from about 10-30% of all healthy women. The main infection caused by S. agalactiae is neonatal sepsis. The baby can contract the infection during labor when passing through the vaginal canal, or even during pregnancy, if S. agalactiae ascends from the vaginal canal to the uterus. There are several factors associated to the infection of the fetus by S. agalactiae when the mother is colonized, such as the CAMP factor, polysaccharide capsule, hyaluronidase, ß-cytolysin/hemolysin and pili. There is no consensus or technical recommendation regarding this theme in Brazil. According to the Brazilian guidelines to prenatal care, there is no research that justifies the implementation of intrapartum antibiotic therapy. There is a need to clarify genotype characteristics of S. agalactiae strains isolated in Brazil in order to align clinical practices to phenotypical characteristics of this microorganism. This way, the goals of this project are: i) to classify S. agalactiae strains isolated from pregnant and nonpregnant women according to their capsular serotype, using PCR Multiplex, ii) to evaluate the presence and distribution of virulence factors, using PCR and iii) to evaluate their antibiotic resistance profile, using disk-diffusion and D-zone tests. The findings regarding virulence and resistance were compared to serotypes, pregnancy, geographic localization and the site where the sample was isolated. A total of 292 strains from pregnant and nonpregnant women from the cities of São Paulo, São José dos Campos and Rio de Janeiro were analyzed. Serotype Ia was the most prevalent among the strains. In São José dos Campos there was no significate difference in the prevalence of serotypes Ia and V. Serotype V was the most abundant in São Paulo and Rio de Janeiro. Serotype II was most prevalent in nonpregnant women when compared to pregnant women. No resistance to Penicillin nor Vancomycin was found. However, resistance to Cefepime, Erythromycin or Clindamycin was found in around 22% of strains. There were differences among serotypes regarding resistance, virulence genes and site where the strain was isolated. Therefore these differences can reflect into the epidemiologic profile of S. agalactiae infection in regards to geographic localization and pregnancy. The incidence of sepsis caused by S. agalactiae has decrease in the last few decades, however constant monitoring is necessary in order to align clinical practice to the microorganisms phenotypical characteristics

Suscetibilidade antimicrobiana de Streptococcus agalactiae isolados de gestantes em um hospital materno infantil de Porto Alegre, Rio Grande do Sul / Antimicrobial susceptibility of Streptococcus agalactiae isolated from pregnant women at a maternity hospital in Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil

OBJETIVOS: Caracterizar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana de Streptococcus agalactiae isolados de gestantes atendidas em um hospital público. MÉTODOS: O estudo foi realizado em um hospital materno-infantil público de Porto Alegre, RS, no qual a pesquisa de S. agalactiae em gestantes faz parte da rotina obstétrica. Foram incluídas no estudo as pesquisas por swab anal/vaginal realizadas no período de julho de 2015 a fevereiro de 2016. Os isolados bacterianos foram identificados por testes fenotípicos e foi determinada a suscetibilidade aos antimicrobianos ampicilina, clindamicina, eritromicina e ofloxacino. Foram investigados também os genes de resistência à eritromicina ermB e mefA. RESULTADOS: No total, 294 coletas foram incluídas e destas, 26 (8%) foram positivas para S. agalactiae. Todos os isolados avaliados foram sensíveis à ampicilina e foram observadas resistências à eritromicina (21,4%), clindamicina (14,3%) e ofloxacino (7,1%), sendo que 66% dos isolados resistentes à eritromicina apresentaram o genótipo mefA. CONCLUSÕES: Os resultados deste estudo corroboram com o consenso de que em gestantes colonizadas com S. agalactiae é aconselhada a antibioticoprofilaxia intraparto com penicilina G ou ampicilina. A expressiva proporção de isolados resistentes à eritromicina e clindamicina, indicados para a antibioticoprofilaxia intraparto em caso de alergia aos antibióticos beta-lactâmicos, enfatiza a importância da determinação do perfil de suscetibilidade antimicrobiana prévia desses isolados, medida que ainda não faz parte da rotina de exames pré-natais em muitas instituições.

AIMS: To characterize the antimicrobial susceptibility profile of Streptococcus agalactiae isolated from pregnant women attended at a public hospital. METHODS: The study was carried out in a public maternal and child hospital in Porto Alegre, RS, Brazil, in which the screening for S. agalactiae in pregnant women is part of the obstetrics routine. The study was carried out on anal/vaginal swab tests performed from July 2015 to February 2016. Bacterial isolates were identified by phenotypic tests, and the susceptibility to ampicillin, clindamycin, erythromycin and ofloxacin was determined. The erythromycin resistance genes ermB and mefA were also investigated. RESULTS: A total of 294 samples were included, and of these, 26 (8%) were positive for S. agalactiae. All isolates were susceptible to ampicillin, and resistance to erythromycin (21.4%), clindamycin (14.3%) and ofloxacin (7.1%) were observed. The mefA genotype was observed in 66% of the erythromycin resistant isolates. CONCLUSIONS: Results of this study corroborate the consensus that in pregnant women colonized with S. agalactiae, intrapartum antibiotic prophylaxis with penicillin G or ampicillin is indicated. The relevant proportion of isolates resistant to erythromycin and clindamycin, indicated for intrapartum antibiotic prophylaxis in case of allergy to beta-lactam antibiotics, emphasizes the importance of determining the profile of antimicrobial susceptibility of these isolates, a measure that is not yet part of routine prenatal tests in many institutions.

Molecular Characterization of Group B Streptococcus Serotypes By Multiplex Polymerase Chain Reaction / Caracterização molecular dos sorotipos de estreptococos do grupo b por reação multiplex pcr

OBJECTIVE: Group B Streptococcus (GBS) serotypes (Ia, Ib and II to IX) are classified based on variations in their capsular polysaccharide; their prevalence differs between different geographic areas. We examined the prevalence of all GBS serotypes in rectal and vaginal swab samples obtained from 363 pregnant women followed at a Brazilian referral center (Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti); bacterial susceptibility to antibiotics was further determined. METHOD: Prevalence of positive GBS was evaluated by latex agglutination and by multiplex PCR analysis; bacterial susceptibility to antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, levofloxacin, linezolid, penicillin and tetracycline was determined by the disk diffusion method. RESULTS: (a) standard GBS culture and the multiplex PCR analysis tested positive for 83 swabs, collected from 72 women (prevalence of GBS colonization: 72/363; 20%); the most prevalent Serotype was Ia (n=43/83; 52%), followed by serotype V (n=14/83; 17%); according to anatomical origin, serotype Ia accounted for 27/59 (46%) and 16/24 (67%) of the vaginal and rectal samples, respectively; PCR also identified serotypes Ib, II, III and VI. Serotype VI is rarely described and had not been previously reported in Brazil or in Latin America. (b) The latex agglutination test only identified 44 positive samples, all of which were serotyped: 34 of these samples (77%) had serotypes matching those identified by multiplex PCR. (c) Only one sample (serotype Ia) showed resistance to erythromycin and clindamycin. CONCLUSION: Regional studies on GBS serotypes prevalence are essential to guide immunoprophylactic interventions (vaccines) and the implementation of adequate antibiotic prophylaxis or treatment. In this study, the incidence of the serotype VI, a new and rare serotype of GBS was described for the first time in a Brazilian population.

OBJETIVO: Os sorotipos (Ia, Ib e II ao IX) do estreptococo do grupo B (GBS) são classificados baseado nas variações em seus polissacarídeos capsulares; sua prevalência difere entre diferentes áreas geográficas. Nós examinamos a prevalência de todos os sorotipos do estreptococo do grupo B em amostras de swabs vaginal e retal obtidas de 363 mulheres seguidas em um centro de referência brasileiro, o Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti; a susceptibilidade bacteriana a antibióticos foi também determinada. MÉTODO A prevalência de estreptococo do grupo B positivo foi avaliada por aglutinação em látex e através de análise por multiplex PCR; susceptibilidade bacteriana a antibióticos, tais como clindamicina, eritromicina, levofloxacin, linezolide, penicilina e tetraciclina foi determinada pelo método de disco difusão. RESULTADOS: (a) Tanto a cultura padrão para estreptococo do grupo B quanto a análise por multiplex PCR testaram positivos para 83 swabs. A prevalência para colonização por GBS foi 20%. O sorotipo Ia foi o mais prevalente (n= 43/83; 52%), seguido pelo sorotipo V (n= 14/83; 17%); De acordo com a origem anatômica, o sorotipo Ia positivou 27/59 (46%) e 16/24 (67%) das amostras vaginais e retais, respectivamente; o teste de PCR também identificou os sorotipos Ib, II, III, VI. O sorotipo VI é raramente descrito e não reportado no Brasil ou na América Latina até esta data. (b) O teste de aglutinação em látex somente identificou 44 amostras positivas, todas das quais foram sorotipadas: 34 destas amostras (77%) tiveram os sorotipos coincidindo com aqueles identificados pela multiplex PCR. (c) Somente uma amostra (sorotipo Ia) mostrou resistência a eritromicina e clindamicina. CONCLUSÃO: Estudos regionais sobre a prevalência dos sorotipos do estreptococo do grupo B são essenciais para guiar medidas imunoprofiláticas (vacinas) e a implementação de adequada antibiótico profilaxia. Neste estudo, a incidência do sorotipo VI foi descrita pela primeira vez na população Brasileira, um novo e raro sorotipo do estreptococo do grupo B.

Efecto antimicrobiano del aceite de coco sobre cepas de Estreptococos mutans. Estudio in vitro / Antimicrobial effect of coconut oil on strains of mutans streptococci. In vitro study

La planta de coco (Cocos nucifera L) llamada el árbol de la vida, se encuentra en los primeros lugares de las especies de plantas alimenticias vitales para el hombre; debido a las múltiples propiedades que posee es que se planteó la presente investigación con el objetivo fundamental de determinar el efecto antimicrobiano del aceite de coco sobre las cepas ATCC25175 de Estreptococos mutans, considerando que este microorganismo es el principal causante de la formación de la caries, por encontrarse presente en la placa dental y es uno de los productores de ácidos que erosionan el esmalte dando inicio a lesiones cariosas. Por otro lado, a nivel mundial se está consolidando la consciencia sobre la necesidad de utilizar productos naturales en la terapéutica humana, es por ello que la Organización Mundial de la Salud, propuso como objetivo a cumplir el programa "salud para todos" considerando la importancia de establecer estrategias formales de atención primaria en salud con medicina tradicional y elementos terapéuticos naturales de reconocida utilidad lo cual se ha estado realizando en muchas partes del mundo. El presente estudio fue in vitro, realizado en el laboratorio de microbiología de la Facultad de Odontología de la Universidad Central aplicando procedimientos que permitieron conocer el efecto antimicrobiano del aceite de coco mediante la determinación del grado de inhibición sobre cepas ATCC25175 de Estreptococos mutans, estableciendo una comparación con el efecto de la clorhexidina al 0,12%. Los resultados obtenidos manifiestan que el aceite de coco a diferentes concentraciones presenta efecto inhibitorio sobre las cepas de Estreptococos mutans ATCC25175, por lo tanto el microorganismo es "sensible o inhibido", sin demostrar diferencias significativas en el efecto producido por las tres concentraciones. Se evidencia que el microorganismo presenta significativamente mayor sensibilidad frente a la clorhexidina al 0,12% que al aceite de coco en sus tres concentraciones.

La resistencia a vancomicina más allá de los enterococos / Resistance to vancomycin beyond enterococci

La vancomicina (VAN) es un glucopéptido que inhibe la síntesis de la pared celular y con el tiempo se había transformado en la droga de elección para el tratamiento de infecciones graves por gram positivos. La resistencia observada en enterococos y la sensibilidad disminuida registrada en estafilococos hasta cierto punto han limitado su uso. La aparición de estreptococos del grupo viridans y del grupo B con marcadores de resistencia a vancomicina enciende un alerta en función de su posible pasaje a neumococos y Streptococcus pyogenes (AU)

Vancomycin (VAN) is a glycopeptide inhibiting cell-wall synthesis and has become the drug of choice for the treatment of severe gram-positive infections. Resistance observed in enterococci and decreased sensitivity in staphylococci have to a certain point limited its use. The appearance of the viridans group and group B streptococci showing markers for resistance to vancomycin have caused an alert regarding the possible passage to pneumococci and Streptococcus pyogenes (AU)

Endocarditis infecciosa por granulicatella adiacens: reporte de un caso / Infective endocarditis due to granulicatella adiacens: a case report

ResumenEl diagnóstico de endocarditis infecciosa subaguda causa un reto para el clínico, puesto que puede simular otra entidad que confunde el diagnóstico. La endocarditis por Granulicatella adiacens es poco frecuente, sin embargo es un microorga nismo difícil de aislar y cultivar ya que requiere un medio especial para crecer. El porcentaje de endocarditis con cultivos negativos es alto y este podría estar enmascarando microorganismos no identificados. Se presenta un caso muy intere sante de endocarditis por el germen mencionado, donde el tiempo de diagnóstico y de identificación del microorganismo pudieron ser cruciales en el manejo y desenlace del paciente.

AbstractSubacute infective endocarditis is a challeging diagnosis for the clinician, since it can simulate other entities that confound the final diagnosis. Endocarditis by Granulicatella adiacens is rare, and it is a difficult organism to isolate, because it needs a special culture medium to grow. The percentage of culture - negative endocarditis is high and this could be masking unidentified microorganisms. In the following case report, we present an interesting case of endocarditis, whose diagnosis and the time for microorganism identification may have been crucial in the management and patient outcome.

Caracterización molecular de cepas invasivas de Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis: estudio multicéntrico Argentina 2011-2012 / Molecular characterization of invasive Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis. Multicenter study: Argentina 2011-2012

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis (SDSE) has virulence factors similar to those of Streptococcus pyogenes. Therefore, it causes pharyngitis and severe infections indistinguishable from those caused by the classic pathogen. The objectives of this study were: to know the prevalence of SDSE invasive infections in Argentina, to study the genetic diversity, to determine the presence of virulence genes, to study antibiotic susceptibility and to detect antibiotic resistance genes. Conventional methods of identification were used. Antibiotic susceptibility was determined by the disk diffusion and the agar dilution methods and the E-test. Twenty eight centers from 16 Argentinean cities participated in the study. Twenty three isolates (16 group G and 7 group C) were obtained between July 1 2011 and June 30 2012. Two adult patients died (8.7%). Most of the isolates were recovered from blood (60.9%). All isolates carried speJ and ssa genes. stG62647, stG653 and stG840 were the most frequent emm types. Nineteen different PFGE patterns were detected. All isolates were susceptible to penicillin and levofloxacin, 6 (26.1%) showed resistance or reduced susceptibility to erythromycin --#91;1 mef(A), 3 erm(TR), 1 mef(A) + erm(TR) and 1 erm(TR) + erm(B)--#93; and 7 (30.4%) were resistant or exhibited reduced susceptibility to tetracycline --#91;2 tet(M), 5 tet(M) + tet(O)--#93;. The prevalence in Argentina was of at least 23 invasive infections by SDSE. A wide genetic diversity was observed. All isolates carried speJ and ssa genes. Similarly to other studies, macrolide resistance (26.1%) was mainly associated to the MLS B phenotype.

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis (SDSE) posee factores de virulencia similares a Streptococcus pyogenes y, en consecuencia, produce faringitis e infecciones graves indistinguibles de las generadas por este patógeno clásico. Los objetivos del estudio fueron conocer la prevalencia de SDSE en infecciones invasivas en Argentina, estudiar su diversidad genética, determinar la presencia de genes de virulencia, ensayar su sensibilidad a los antibióticos y conocer los genes de resistencia. Se emplearon métodos convencionales de identificación. La sensibilidad se determinó por difusión, Etest y dilución en agar. Participaron 28 centros de 16 ciudades argentinas. Se obtuvieron 23 aislamientos (16 del grupo G y 7 del grupo C) desde el 1-7-2011 hasta el 30-6-2012. Se registraron 2 muertes en adultos (8,7%). La mayoría de los aislamientos fueron obtenidos de sangre (60,9%). Todos eran portadores de los genes speJ y ssa. Los genotipos más frecuentes fueron stG62647, stG653 y stG840. Se detectaron 19 pulsotipos distintos. Todos los aislamientos fueron sensibles a penicilina y levofloxacina, 6 (26,1%) presentaron resistencia o sensibilidad disminuida a eritromicina (1 mef--#91;A--#93;, 3 erm--#91;TR--#93;, 1 mef--#91;A--#93; + erm--#91;TR--#93; y 1 erm--#91;TR--#93; + erm--#91;B--#93;) y 7 (30,4%) fueron resistentes o tuvieron sensibilidad disminuida a tetraciclina (2 tet--#91;M--#93;, 5 tet--#91;M--#93; + tet--#91;O--#93;). La prevalencia anual en la Argentina fue de al menos 23 infecciones invasivas por SDSE y se observó una amplia diversidad genética. Todos los aislamientos presentaron los genes ssa y speJ. Como en otros estudios, la resistencia a macrólidos (26,1%) estuvo asociada, principalmente, al fenotipo MLS B.

Frecuencia de estreptococos betahemolíticos y títulos de antiestreptolisina O en estudiantes del Estado Aragua, Venezuela / Frequency of betahemolytic streptococci and antistreptolysin O titers in students from Aragua, Venezuela

Para determinar la frecuencia de estreptococos betahemolíticos (EBH) y el valor referencial de los títulos de antiestreptolisina O (ASTO) en estudiantes, con edades comprendidas entre 10 a 15 años del municipio Girardot, estado Aragua, se recolectaron hisopados faríngeos y muestras de sangre de 204 escolares. El hisopo se empleó para el cultivo bacteriológico y posterior identificación de los serogrupos de EBH. La sangre se utilizó para determinar los títulos de ASTO. Se estableció el nivel de referencia de ASTO siguiendo el protocolo C28 A3 del Clinical and Laboratory Standars Institute. Se determinó la concordancia de los resultados de los títulos de la prueba de aglutinación con los resultados de los cultivos. 21,1% de los cultivos resultaron positivos (n=43). 37,20% de los aislados correspondieron a EBH del grupo B, 25.58% del grupo A, 23% del grupo G, 12% del grupo F y 2% del grupo C. El valor referencial de ASTO fue hasta 800 UI.mL-1, valor que difiere del señalado por el equipo diagnóstico empleado. No se observó concordancia entre los resultados positivos del cultivo bacteriológico y los títulos de ASTO (κ=0,0403; p=0,6061), lo cual indica que ambas pruebas son discordantes y arrojan resultados diferentes.

Throat swabs and blood samples were collected from 204 students to determine the frequency of betahemolytic streptococci (BHS) and ASO titers in students aged 10 to 15 years from the Girardot municipality in Aragua State,. The swabs were used for bacterial culture and subsequent BHS serogroups identification. Blood samples were used to determine ASO titers. The ASO reference level was established following the C28 A3 protocol from Clinical and Laboratory Standards Institute. The concordance of the agglutination test titers results with the culture results was determined. 43 cultures were positive with a BHS frequency of 21.1%. 37.20% of the isolates were group B beta-hemolytic streptococci, 25.58% group A, 23% group G, 12% group F and 2% group C. The ASO reference value was up to 800 UI.mL-1, which differs from the value indicated by the diagnostic equipment used. There is no agreement among the positive results of bacterial culture and ASO titers (κ=0.0403, p=0.6061), indicating that both tests are discordant and yield different results.

Impacto do uso da prova rápida para estreptococo beta-hemolítico do grupo A no diagnóstico e tratamento da faringotonsilite aguda em pronto-socorro de Pediatria / Impact of the rapid antigen detection test in diagnosis and treatment of acute pharyngotonsillitis in a Pediatric emergency room / Impacto del uso de la prueba rápida para estreptococos beta-hemolíticos del grupo A en el diagnóstico y tratamiento de la faringotonsilitis en emergencia de Pediatría

OBJETIVO: Avaliar o impacto da realização rotineira da prova rápida para pesquisa de estreptococo do grupo A no diagnóstico e tratamento da faringotonsilite aguda em crianças. MÉTODOS: Estudo prospectivo e observacional que contou com a utilização de protocolo de pesquisa estabelecido na Unidade de Emergência do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo para o atendimento de crianças e adolescentes com faringotonsilite aguda. RESULTADOS: Com base na avaliação clínica, dos 650 pacientes estudados, antimicrobianos seriam prescritos para 389 indivíduos (59,8%) e, com o uso da pesquisa de estreptococo do grupo A, foram prescritos em 286 pacientes (44,0%). Das 261 crianças que não receberiam antibiótico pelo quadro clínico, 111 (42,5%) tiveram pesquisa de estreptococo do grupo A positiva. O diagnóstico baseado no quadro clínico apresentou sensibilidade de 61,1%, especificidade de 47,7%, valor preditivo positivo de 44,9% e valor preditivo negativo de 57,5%. CONCLUSÕES: O diagnóstico clínico da faringotonsilite estreptocócica mostrou baixa sensibilidade e especificidade. O uso rotineiro da prova rápida para pesquisa de estreptococo permitiu a redução do uso de antibióticos e a identificação de um grupo de risco para as complicações da infecção estreptocócica, pois 42,5% dos pacientes com prova rápida positiva não receberiam antibióticos, se levado em consideração apenas o diagnóstico clínico.

OBJECTIVE: To evaluate the impact of the routine use of rapid antigen detection test in the diagnosis and treatment of acute pharyngotonsillitis in children. METHODS: This is a prospective and observational study, with a protocol compliance design established at the Emergency Unit of the University Hospital of Universidade de São Paulo for the care of children and adolescents diagnosed with acute pharyngitis. RESULTS: 650 children and adolescents were enrolled. Based on clinical findings, antibiotics would be prescribed for 389 patients (59.8%); using the rapid antigen detection test, they were prescribed for 286 patients (44.0%). Among the 261 children who would not have received antibiotics based on the clinical evaluation, 111 (42.5%) had positive rapid antigen detection test. The diagnosis based only on clinical evaluation showed 61.1% sensitivity, 47.7% specificity, 44.9% positive predictive value, and 57.5% negative predictive value. CONCLUSIONS: The clinical diagnosis of streptococcal pharyngotonsillitis had low sensitivity and specificity. The routine use of rapid antigen detection test led to the reduction of antibiotic use and the identification of a risk group for complications of streptococcal infection, since 42.5% positive rapid antigen detection test patients would not have received antibiotics based only on clinical diagnosis.

OBJETIVO: Evaluar el impacto de la realización de rutina de la prueba rápida para investigación de estreptococos del grupo A en el diagnóstico y tratamiento de la faringotonsilitis aguda en niños. MÉTODOS: Estudio prospectivo y observacional que contó con el uso de protocolo de investigación establecido en la Unidad de Emergencia del Hospital Universitario de la USP para la atención a niños y adolescentes con faringotonsilitis aguda. RESULTADOS: Con base en la evaluación crítica, de los 650 pacientes estudiados, antimicrobianos serían prescritos a 389 individuos (59,8%) y, con el uso de la investigación de estreptococos del grupo A se los prescribieron a 286 pacientes (44,0%). De los 261 niños que no recibirían antibióticos por el cuadro clínico, 111 (42,5%) tuvieron investigación de estreptococos del grupo A positiva. El diagnóstico basado en el cuadro clínico presentó sensibilidad del 61,1%, especificidad del 47,7%, valor predictivo positivo del 44,9% y valor predictivo negativo del 57,5%, CONCLUSIONES: En este estudio, el diagnóstico clínico de la faringotonsilitis estreptocócica mostró baja sensibilidad y especificidad. El uso de rutina de la prueba rápida para investigación de estreptococos permitió la reducción del uso de antibióticos y la identificación de un grupo de riesgo para las complicaciones de la infección estreptocócica, pues el 42,5% de los pacientes con prueba rápida positiva no recibirían antibióticos si se llevara en consideración solamente el diagnóstico clínico.

Apoptose induzida por estreptococos do grupo B em células epiteliais respiratórias A549 / Apoptosis induced by group B streptococci in respiratory epithelial cells A549

Streptococcus agalactiae, ou Streptococcus do grupo B (GBS), é um importante patógeno oportunista que causa pneumonia, sepse e meningite em recém-nascidos e infecções em adultos imunocomprometidos. O pulmão aparentemente é o portal de entrada para o EGB na corrente sanguínea o que pode evoluir para uma septicemia. Os mecanismos de virulência relevantes envolve a habilidade do EGB em penetrar e sobreviver intracelularmente em células hospedeiras. Neste trabalho, foram analisados os mecanismos moleculares da apoptose epitelial induzida pelo EGB, e a produção de óxido nítrico (NO) e espécies reativas de oxigênio (ROS) em células epiteliais respiratórias A549 durante a infecção por EGB. Todas as amostras de EGB exibiram a capacidade de aderir e invadir células A549. A sobrevivência intracelular do EGB em células A549 ocorreu durante 24 h de incubação sem replicação do patógeno. No entanto, a amsotra 88641-V isolada de vagina não sobreviveu após 0,5 h de interação. O EGB promoveu a perda de viabilidade do epitélio durante a infecção. As alterações morfológicas em células A549 infectadas com o EGB incluem arredondamento celular, condensação nuclear, encolhimento celular e perda de contato célula-célula e célula-substrato. A dupla marcação AV/IP revelou que amostras de EGB sorotipo III induziram apoptose enquanto amostras do sorotipo V induziram morte celular semelhante a necrose em células A549. Caspase-3 foi ativada durante a apoptose induzida por EGB em células epiteliais. No entanto, a ativação de caspases-8 e -9 foi detectada apenas para a amostra 88641-V e as amostras EGB do sorotipo III, respectivamente. Experimentos comparativos de Immunoblotting revelaram que o EGB induziu um aumento da expressão Bim, uma proteína pró-apoptótica e diminuiu a expressão de Bcl-2 e Bcl-xL, proteínas anti-apoptóticas. As células A549 apresentaram perda de potencial de membrana mitocondrial Δψm e co-localização com o Bax...

Streptococcus agalactiae, or group B Streptococcus (GBS), is an important opportunistic pathogen that causes pneumonia, sepsis, and meningitis in neonates and severe diseases in immunocompromised adults. The lung is the apparent portal of entry for GBS into the bloodstream, after which septicemia may ensue. A relevant virulence mechanism involves the ability of GBS to penetrate and to survive intracellularly within these host cells. In this work, we analyzed the molecular mechanisms of GBS-induced epithelial apoptosis, and nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) production by lung epithelial cell line A549 cells during infection with GBS. All GBS exhibited the ability to adhere and to invade A549 cells. The survival of GBS within A549 cells without replication was shown during 24 h incubation. However, the 88641-V strain isolated from vagina did not survive after 0.5 h of interaction. GBS promoted the loss of viability of the epithelium during infection. The morphological changes in A549 cells infected with GBS included cell rounding, nuclear condensation, cellular shrinkage and loss of cell-cell contact and cell-substrate. The double staining AV / IP revealed that GBS serotype III induced apoptosis while GBS serotype V induced like necrosis cell death in A549 cells. Caspase-3 was activated during GBS-induced endothelial apoptosis. However, activation of caspases-8 and -9 was detected only by GBS 88641-V and GBS-III, respectively. Comparative immunoblotting experiments revealed that GBS induced an increasing pro-apoptotic Bim expression and decreasing anti-apoptotic Bcl-2 and Bcl-XL expression. A549 cells exhibited loss of mitochondrial membrane potential Δψm with Bax colocalization...

Effects of typified propolis on mutans streptococci and lactobacilli: a randomized clinical trial / Efeitos da própolis tipificada nos estreptococcos do grupo mutans e lactobacilos: ensaio clínico randomizado

Objective: The aim of this study was to determine in a randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial the effects of typified propolis and chlorhexidine rinses on salivary levels of mutans streptococci (MS) and lactobacilli (LACT). Methods: One hundred patients were screened for salivary levels of MS >100,000 CFUs/mL of saliva. All patients presented with at least one cavitated decayed surface. Sixty patients met entry criteria. Subjects were adults 18-55 years old. After restoration of cavitated lesions patients were randomized to 3 experimental groups:1) PROP-alcohol-free 2% typified propolis rinse (n= 20); 2) CHX- 0.12% chlorhexidine rinse; 3) PLplacebo mouthrinse. Patients rinsed unsupervised 15 mL of respective rinses twice a day for 1 min for 28 days. Patients were assessed for the salivary levels of MS (Dentocult SM) and LACT (Dentocult LB) at baseline, 7-day, 14-day, and at 28-day visits (experimental effects) and at 45-day visit (residual effects). General linear models were employed to analyze the data. Results: PROP was superior to CHX at 14-day and 28-day visits in suppressing the salivary levels of MS (p < .05). PROP was superior to PL at all visits (p < .01). The residual effects of PROP in suppressing the salivary levels of MS could still be observed at the 45-day visit, where significant differences between PROP and CHX (p < .05), were demonstrated. PROP was significantly superior than CHX in suppressing the levels of salivary LACT at the 28-day visit (p < .05). Conclusion: Typified propolis rinse was effective in suppressing cariogenic infections in caries-active patients when compared to existing and placebo therapies.

Objetivo: O objetivo deste estudo foi determinar, em um estudo randomizado, duplo-cego, placebo-controlado os efeitos da própolis tipificada e clorexidina sobre os níveis salivares de estreptococos do grupo mutans (EM) e lactobacilos (LACT). Métodos: Cem pacientes foram selecionados para níveis salivares de MS > 100.000 UFC/mL de saliva. Todos os pacientes apresentaram pelo menos uma superfície cariada com cavitação. Sessenta pacientes preencheram os critérios de inclusão. Os indivíduos eram adultos com 18-55 anos de idade. Após a restauração das lesões cavitadas, os pacientes foram randomizados para três grupos experimentais: 1) PROP- bochecho livre de álcool de 2% de própolis tipificada (n = 20), 2) CHX- bochecho de clorexidina 0,12%, 3) PL- bochecho placebo. Os participantes bochecharam sem supervisão 15 mL dos enxaguatórios duas vezes por dia, durante 1 minuto, durante 28 dias. Os pacientes foram avaliados para os níveis salivares de MS (Dentocult SM) e LACT (Dentocult LB) na linha de base, e após 7 dias, 14 dias, 28 dias (efeitos experimentais) e 45 dias (efeitos residuais). Modelos lineares foram utilizados para analisar os dados. Resultados: PROP foi superior ao CHX nas visitas de 14 dias e de 28 dias na supressão dos níveis salivares de SM (p < 0,05). PROP foi superior ao PL em todas as visitas (p < 0,01). Os efeitos residuais de PROP na supressão dos níveis salivares de MS ainda foi observado na visita de 45 dias, onde diferenças significativas entre PROP e CHX (p < 0,05) foram demonstradas. PROP foi significativamente superior a CHX na supressão dos níveis salivares de LACT na visita de 28 dias (p < 0,05). Conclusão: O enxaguatório de própolis tipificada foi eficaz na supressão de infecções cariogênicas em pacientes com atividade de cárie quando comparado a terapias existentes e ao placebo