Tratamiento de la tuberculosis drogorresistente en adultos y niños. Revisión narrativa / Treatment of drug-resistant tuberculosis in adults and children. A narrative review

Resumen Desde 2018 han surgido a la luz de la evidencia importantes cambios en el tratamiento de la tuberculosis drogorresistente. El descubrimiento de nuevas drogas antituberculosis, como la bedaquilina y los derivados de nitroimidazopiranos, así como la utilización de drogas repropuestas, llevó a la recomendación de organismos internacionales de nuevos esquemas de tratamiento de la tuberculosis monorresistente y multidro gorresistente que son totalmente orales y así dejan de lado el uso prolongado de inyectables, con su inherente toxicidad e incomodidad. Algunas de las definiciones de tuberculosis drogorresistente han cambiado. También está en revisión el tiempo de su tratamiento y con algunos nuevos esquemas en estudio, como el BpaL (bedaquilina, pretomanid y linezolid), se ha logrado una duración similar a la del tratamiento de la tuberculosis pansensible. En esta revisión bibliográfica narrativa describimos las nuevas definiciones, algunos aspectos diagnósticos básicos, los aspectos farmacológicos y la nueva clasificación de las drogas a utilizar en el tratamiento de la tuberculosis drogorresistente, así como los esquemas actualmente propuestos para tratarla, contextualizados con la realidad nacional. Finalizamos con una breve reseña de los estudios clínicos en curso de nuevos esquemas acortados de tratamiento.

Abstract Since 2018, important changes in the treatment of drug-resistant tuberculosis have been produced in the light of new evidence. The discovery of new anti-tuberculosis drugs, such as bedaquiline and nitroimidazopirane derivatives, as well as the use of repurposed drugs, led to international organizations to recommend new, totally oral, treatment regimens for mono-resistant and multidrug-resistant tuberculosis, leaving aside the prolonged use of injectables, with their inherent toxicity and discomfort. Some definitions of drug-resistant tuberculosis have changed. The duration of treatment is also under review, leading some new regimens under study, such as BPaL (bedaquiline, pretomanid and linezolid), to a duration similar to that for treating susceptible tuberculosis. In this narrative review, we describe the new definitions, some basic diagnostic aspects, the pharmacological aspects, and the new classification of drugs to be used in the treatment of drug-resistant tuberculosis as well as the cur rently proposed schemes to treat it available within the Argentinean context. Finally, we include a brief review of ongoing clinical trials on new shortened treatments.

Validación de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) acoplada a curvas melting como herramienta alternativa para el diagnóstico de Tuberculosis Mutidrogorresistente / Validation of the real time polymerase chain reaction (qPCR) coupled to melting curves as an alternative tool for the diagnosis of Multi-Drug Resistant Tuberculosis

INTRODUCCIÓN: la tuberculosis es una enfermedad infecto-contagiosa, causada por diversas especies del Complejo Mycobacterium tuberculosis, actualmente se estima que un tercio de la población mundial se encuentra afectada por lo que representa una amenaza para la salud pública, principalmente por el surgimiento de cepas Multidrogorresistentes (TB-MDR). En Bolivia se reportaron 7.538 personas enfermas con Tuberculosis, los últimos datos sobre TB-MDR indican un aumento de 0,2% por año, en 2019 se registró un 3,1% de TB-MDR. Actualmente en nuestro país se emplean métodos moleculares para la identificación de este agente infeccioso; no obstante, existen muy pocos o ningún trabajo acerca de la aplicación de métodos moleculares para la detección precisa y efectiva de cepas TB-MDR que otorguen validez a los resultados emitidos. Este trabajo resuelve el cuestionamiento de, si la PCR en tiempo real (RT-qPCR) acoplada a curvas melting es una herramienta de diagnóstico alternativo aplicable, para la identificación de Tuberculosis Multidrogorresistente MATERIALES Y MÉTODOS: se trabajó con 74 cepas de Mycobaterium tuberculosis fenotípicamente identificadas por cultivo (método de las proporciones, Canetti Rist) como gold standar. El material genético para las pruebas moleculares se obtuvo por el método de columnas, se utilizaron dos controles primarios para la determinación de resistencia a los fármacos Isoniacida y Rifampicina, tanto los controles como las muestras se procesaron por RT-qPCR acoplada a curvas melting, mediante cambios de temperatura de disociación. RESULTADOS: los parámetros de test diagnóstico de la prueba demostraron sensibilidad: 67.4%, especificidad: 83.3%, Exactitud: 73.97%, VPP: 85.3%, VPN: 64.1% para Isoniacida. Mientras que para Rifampicina: Sensibilidad: 97%, especificidad: 20%, exactitud: 58.9%, VPP: 55.4% y VPN: 87.5%. CONCLUSIÓN: el método evaluado para la determinación de resistencia a Isoniacida presenta un equilibrio entre sensibilidad y especificidad, por lo que representa una alternativa diagnóstica confiable, mientras que para resistencia a Rifampicina presenta una alta sensibilidad que es muy útil para países endémicos como el nuestro.

INTRODUCTION: tuberculosis is an infectious-contagious disease, caused by various species of the Mycobacterium tuberculosis Complex, it is estimated that one third of the world population is affected by what represents a threat to public health, mainly by the emergence of multidrugresistant strains (MDR-TB). In Bolivia, 7,538 people are reported sick with Tuberculosis, the latest data on MDR-TB indicate an increase of 0.2% per year, in 2018 there was 3.1% of MDR-TB. Currently in our country molecular methods are used to identify this infectious agent; however, there is very little or no work on the application of molecular methods for the precise and effective detection of MDR-TB strains that give validity to the results issued. This work resolves the question of whether real-time PCR (RT-qPCR) coupled to melting curves is an applicable alternative diagnostic tool for the identification of multidrug-resistant tuberculosis MATERIALS AND METHODS: we worked with 74 strains of Mycobaterium tuberculosis phenotypically identified by culture (method of proportions, Canetti Rist) as a gold standar. The genetic material for molecular methods was obtained by the column assay, two primary controls were used for the determination of resistance to the drugs Isoniazid and Rifampicin, both the controls and the samples were processed by RT-qPCR coupled to melting curves, by means of temperature changes of dissociation. RESULTS: the diagnostic test parameters of the test demonstrated sensitivity: 67.4%, specificity: 83.3%, Accuracy: 73.97%, PPV: 85.3%, NPV: 64.1% for Isoniazid. While for Rifampicin: Sensitivity: 97%, Specificity: 20%, Accuracy: 58.9%, PPV: 55.4% and NPV: 87.5% CONCLUSION: the method evaluated for the determination of resistance to Isoniazid presents a balance between sensitivity and specificity, therefore it represents a reliable diagnostic alternative, while for resistance to Rifampicin it presents a high sensitivity that is very useful for endemic countries such as ours.

Perfil de resistencia del Mycobacterium tuberculosis a fármacos antituberculosos de primera línea y sus combinaciones / Resistance profile of Mycobacterium tuberculosis to first-line antituberculosis drugs and their combinations

Introducción: En Colombia el control de la tuberculosis se ha visto amenazado por la resistencia a los fármacos antituberculosos y especialmente la tuberculosis multidrogorresistente. Objetivo: Determinar la resistencia global y perfiles de resistencia del Mycobacterium tuberculosis a fármacos antituberculosos de primera línea y combinaciones. Métodos: Estudio descriptivo, transversal, en el que se evaluaron 2 701 pacientes con tuberculosis en el Departamento del Atlántico (Colombia), durante los años 2011 a 2016. Se valoraron aspectos sociodemográficos, clínicos y condiciones de riesgo. Se realizó análisis de frecuencias relativas y absolutas, diferencia de proporciones ((2) y razón de prevalencias. Resultados: El 66,5 por ciento de los pacientes eran hombres, el 53 por ciento tenían entre 15 y 44 años de edad. El 47,34 por ciento con pérdida en el seguimiento y el 11,62 por ciento monorresistentes a isoniacida. La resistencia en casos nuevos fue 7,30 por ciento (IC95 por ciento: 6,3-8,5), para este grupo la multidrogorresistencia fue de 1,1 por ciento; mientras que en los previamente tratados la resistencia fue de 18,27 por ciento (IC95 por ciento: 15,6- 22,4) y la multidrogorresistencia de 5,7 por ciento. Los factores asociados a resistencia fueron presencia de VIH/TB (RP= 2,6; p= 0,000), otros factores inmunosupresores (RP= 3,5; p= 0,009), contacto de paciente con tuberculosis multidrogorresistente (RP= 16; p= 0,000) y caso previamente tratado (RP= 2,24; p= 0,00). Conclusiones: Se evidencia un descenso en la resistencia global a rifampicina e isoniacida, así como en la prevalencia multidrogorresistente tanto en casos nuevos como en previamente tratados en la población estudiada; lo que genera una línea base para la toma de decisiones que permita continuar mejorando la vigilancia y control de la resistencia del M. tuberculosis a fármacos de primera línea, debido a los nuevos retos que este microorganismo representa para la salud pública(AU)

Introduction: Tuberculosis control in Colombia has been hampered by resistance to antituberculosis drugs and particularly by multi-drug resistant tuberculosis. Objective: Determine the overall resistance and resistance profiles of Mycobacterium tuberculosis to first-line antituberculosis drugs and their combinations. Methods: A descriptive cross-sectional study was conducted of 2 701 tuberculosis patients from Atlántico Department in Colombia in the period 2011-2016. The evaluation included sociodemographic aspects, clinical characteristics and risk conditions. Data analysis was based on relative and absolute frequencies, proportion difference (x2) and prevalence ratio. Results: Of the total sample, 66.5 percent were men and 53 percent were aged 15-44 years. 47.34 percent were lost to follow-up and 11.62 percent were monoresistant to isoniazid. In new cases resistance was 7.30 percent (CI 95 percent: 6.3-8.5) and multi-drug resistance was 1.1 percent, whereas in previously treated cases resistance was 18.27 percent (CI 95 percent: 15.6-22.4) and multi-drug resistance was 5.7 percent. The factors associated to resistance were the presence of HIV/TB (AR= 2.6; p= 0.000), other immunosuppressive factors (AR= 3.5; p= 0.009), contact with multi-drug resistant tuberculosis patient (AR= 16; p= 0.000) and previously treated case (AR= 2.24; p= 0.00). Conclusions: A reduction is observed in overall resistance to rifampicin and isoniazid, as well as in the prevalence of multi-drug resistance, both in new cases and in previously treated cases, which creates a baseline for the taking of decisions aimed at the continuing improvement of the surveillance and control of M. tuberculosis resistance to first-line drugs, due to the new challenges posed by this microorganism to public health(AU)

Factores de riesgo que influyen en el fracaso al tratamiento individualizado de tuberculosis multidrogorresistente en la provincia de Ica. 2000-2014 / Risk factors that influence in the failure to the individualized treatment of multidrug-resistant tuberculosis in the province of ica. 2000-2014

Objetivo: Determinar los factores de riesgo que influyen en el fracaso al tratamiento individualizado de Tuberculosis Multidrogorresistente en la provincia de Ica. 2000-2014. Materiales y métodos: Estudio observacional, retrospectivo, tipo analítico, de casos y controles. La muestra estuvo conformada por 19 casos de fracaso al tratamiento individualizado, y por cada caso se tuvo dos controles de pacientes que curaron con tratamiento individualizado. Se realizó el análisis bivariado con un nivel de significancia del 5% se calculó del Odds Ratio (OR) con intervalo de confianza (IC) al 95%. Se realizó análisis de regresión logística. Resultados: En el análisis multivariado resultaron 4 factores de riesgo asociados a fracaso al tratamiento individualizado: resistencia a 5 o más drogas (OR=6,67, p=0,027), tener IMC menor de 18.5 al inicio del tratamiento (OR=7,61 p=0,023), presentar hemoptisis durante el tratamiento (OR= 19,89, P=0,001) y la presencia de cavernas en la radiografía de tórax inicial (OR=27,95, p=0,005). Conclusiones: Los pacientes con resistencia a 5 o más drogas antituberculosas, con IMC menor a 18.5, con hemoptisis durante el tratamiento y los que presentan caverna en la radiografía de tórax, tienen mayor riesgo de fracasar al tratamiento individualizado. (AU)

Objective: To determine the risk factors that influence the failure to individualized treatment of multidrug-resistant tuberculosis in the province of Ica. 2000-2014. Materials and methods:Observational, retrospective study, analytical type, of cases and controls. The sample consisted of 19 cases of failure to individualized treatment, and for each case there were two controls of patients who cured with individualized treatment. The bivariate analysis was performed with a level of significance of 5% was calculated from the Odds Ratio (OR) with 95% confidence interval (CI). Logistic regression analysis was performed. Results: In the multivariate analysis, there were 4 risk factors associated with failure to individualized treatment: resistance to 5 or more drugs (OR = 6.67, p = 0.027), having a BMI less than 18.5 at the beginning of treatment (OR = 7, 61 p = 0.023), presenting hemoptysis during treatment (OR = 19.89, P = 0.001) and the presence of caverns on the initial chest radiograph (OR = 27.95, p = 0.005). Conclusions: Patients with resistance to 5 or more antituberculous drugs, with a BMI less than 18.5, with hemoptysis during treatment and those who have a cavern on chest radiography, have a higher risk of failing individualized treatment. (AU)

Sensibilidad a drogas de primera línea frente a cepas de M. tuberculosis del CRN Micobacterias, Guayas, 2016 / Sensitivity to first-line drugs against strains of M. tuberculosis of the CRN Micobacterias, Guayas, 2016

Objetivo: Determinar el perfil de sensibilidad de Mycobacterium tuberculosis a drogas de primera línea en cepas que llegan de diferentes unidades de salud de la provincia del Guayas. Materiales y métodos. Se trabajó con 614 cepas de Mycobacterium tuberculosis, las cuales se le realizó las pruebas de sensibilidad a drogas de primera (rifampicina, isoniacida, estreptomicina y etambutol) por el por el método de proporciones (Rist, Canetti, Grosset) y pirazinamida evaluada por el método Wayne. Resultado: Se realizó perfil de sensibilidad a 614 cepas, de las cuales el 70 % (n=427) es sensible a todas las drogas, 20 % (n=124) presentó resistencia al menos a una droga, el restante corresponden a cepas MDR. TB-Monorresistente tiene mayor incidencia (n=83) que la MDR (n=12) en pacientes sin tratamiento previo. Por otro lado en pacientes antes tratado la TB-Monorresistente es menor a la MDR (n=41 y n=51 respectivamente). Conclusiones: el método de proporciones sigue siendo la técnica de referencia. Se observa mayor sensibilidad a drogas de primera línea en pacientes sin tratamiento previo. Es de importancia clínica llevar un correcto seguimiento a pacientes que presenten algún tipo de resistencia, pero es prioridad preventiva la no conversión de los pacientes sensibles a fin de evitar la diseminación de cepas resistentes.

Objective: Difine first line susceptibility drug profile of Mycobacterium tuberculosis, to diferent strain from Province Guayas health establishments. Material and Methods.614 Mycobacterium tuberculosis strain were analized by first line susceptibility drug test (rifampicin, isoniazid, streptomycin, ethambutol) used proportions method (Rist, Canetti, Grosset) and pyrazinamide Wayne´s methods. Results: 614 strain were studied, 70 % strains (n=427) result sensible, 20 % (n=124) have at least resistence one drug; the residue responds to MDR strains. The TB-Monoresistence haved more incidence (n=83) than MDR (n=12) in virgin treatments patients. Nevertheless; in previous treatment patients, the TB-Monoresistence is smaller than MDR (n=41 y n=51 respectively). Conclutions: The proportion method is the reference technique. The analize shown biggest sensibility in virgin treatment patients for first line drugs. Is very important have a correct control of resistant pactients, but is preventive priority the non conversion of sensibility patients to avoid dissemination resistance strain.

Detección de genes asociados a resistencia para isoniacida y rifampicina en cepas de Mycobacterium tuberculosis en Ecuador / Detection of genes associated to resistance for isoniacida and rifampicin in cepas of Mycobacterium tuberculosis in Ecuador

Antecedentes: La incidencia de la multidrogorresistencia (MDR) adquirida a drogas antituberculosas de Mycobacterium tuberculosis en el Ecuador es aproximadamente del 27,83 %. Objetivo: Detectar las mutaciones asociadas con la resistencia a los fármacos en cepas de M. tuberculosis resistentes a fármacos utilizando la PCR-RFLP y PCR en tiempo real. Materiales y métodos: En cepas de M. tuberculosis drogorresistentes (DR) aisladas de muestras provenientes de 18 provincias del Ecuador (2006-2012), se analizaron mutaciones en los genes rpoB y KatG que conducen a la resistencia a rifampicina e isoniazida, respectivamente. EL ADN fue amplificado por Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), siendo luego analizado por RFLP (40 cepas), qPCR (346 cepas). Resultados: Nuestros resultados demostraron una correlación entre la resistencia fenotípica a rifampicina e isoniazida y las mutaciones encontradas en los genes rpoß (91,6 %) y katG (90,3 %) en cepas ecuatorianas de M. tuberculosis. Conclusiones: Las mutaciones asociadas a la drogorresistencia de aislados del M. tuberculosis en el Ecuador fueron similares a las reportadas en otros países.

Background: The incidence of multidrug-resistance (MDR) acquired in Mycobacterium tuberculosis antituberculosis drugs in Ecuador is approximately 27,83 %. Objective: To detect mutations associated with drug resistance in drug-resistant M. tuberculosis using PCR-RFLP and real-time PCR. Materials and methods: Mutations in rpoB and KatG genes leading to resistance to rifampicin and isoniazid, respectively, were analyzed in isolates of M. tuberculosis (DR) isolated from samples from 18 provinces of Ecuador (2006-2012). The DNA was amplified by Polymerase Chain Reaction (PCR) and then analyzed by RFLP (40 strains), qPCR (346 strains) and Results: Our results demonstrated a correlation between the phenotypic resistance to rifampicin and isoniazid and the mutations found in the rpoß (91, 6 %) and katG (90,3%) genes in Ecuadorian M. tuberculosis strains. Conclusions: Mutations associated with the drug resistance of M. tuberculosis isolates in Ecuador were similar to those reported in other countries.

Avances en el tratamiento de la tuberculosis multirresistente / Advances in the treatment of multi-drug resistant tuberculosis

Resumen El tratamiento de las tuberculosis multidrogorresistentes (TBC-MDR) se basa en esquemas de fármacos con diseños muy variables, en pacientes con patrones de resistencia heterogéneos y seguimientos no estandarizados, lo que hace dificil plantear recomendaciones con fuerte nivel de evidencia. Además, sólo una minoría de estos enfermos recibe tratamiento a nivel mundial y con los actuales esquemas menos del 50% de los que logran ser tratados curan. Afortunadamente, durante los últimos años han aparecido nuevos medicamentos, (bedaquilina, delamanid y pretomanid), que están demostrando ser de real utilidad para estos pacientes en ensayos con mejor diseño y seguimiento, donde se puede establecer con mayor precisión la eficacia, toxicidad y grado de recaídas. Además, algunos fármacos ya conocidos, (fluoroquinolonas, linezolid, clofazimina) están siendo introducidos dentro de los nuevos esquemas de tratamiento.

Abstract Therapy of multi-drug resistant tuberculosis (MDR TB) is based on trials with drugs with highly variable patterns of resistance and non-standardized follow-ups that make it difficult to provide recommendations with strong levels of evidence. Also, the vast majority of MDR-TB patients fail to receive therapy and those who receive it, only achieve around 50% of good results. Fortunately new drugs have emerged (bedaquiline, delamanid, pretomanid) that are being useful for these patients with better designed trials and monitoring, in which the efficacy, toxicity and degree of relapses can be evaluated more accurately. Some drugs already known (fluorquinolones, linezolid and clofazimine) are also being introduced in new schemes of therapy.

Evaluación por el laboratorio de los casos de tuberculosis en profesionales del área de la salud / Laboratory evaluation of cases of tuberculosis in health professionals

Objetivo: analizar la información con que cuenta el Laboratorio Nacional de Referencia de los casos de tuberculosis en profesionales del área de la salud. Diseño: estudio de serie de casos con toma de información retrospectiva de los formatos únicos y los resultados de pruebas de sensibilidad obtenidos en estos casos. Pacientes. 128 casos de tuberculosis en personal de salud, diagnosticados entre los años 2009 a 2012 en la Red Nacional de Laboratorios. Mediciones: se evaluó la distribución de casos por sexo, edad, forma de la enfermedad, tipo de muestra, presencia de infección concomitante con el VIH, ocupación, procedencia por entidad territorial y resultados obtenidos en las pruebas de sensibilidad entre casos nuevos y previamente tratados. Resultados: el 64.8% de los casos eran de sexo femenino, con edades entre los 20 y 40 años, una mediana de 32; el 78.9% eran formas pulmonares, se identificó una coinfección TB/VIH en 7.9% de los casos; las ocupaciones más afectadas fueron médicos con 21.4%, seguido de auxiliares de enfermería con 8.6%. Las entidades territoriales que evaluaron más casos fueron Antioquia, Valle del Cauca y Bogotá; se identificó una resistencia global a los fármacos antituberculosos de 7.9% en casos nuevos y una multirresistencia de 4%; en casos previamente tratados la resistencia global y la multirresistencia fueron de 12.5%. Conclusión: el país debe fortalecer la vigilancia de la resistencia en este grupo de riesgo haciendo diagnóstico por baciloscopia, cultivo y pruebas de sensibilidad a los fármacos, incluyendo dentro de los lineamientos del programa la realización de pruebas rápidas de diagnóstico avaladas por la OMS/OPS, en especial por la presencia de la enfermedad en población joven y el hallazgo de resistencia en profesionales dedicados a la atención en salud de las personas.

Objective: analyze information available to the National Reference Laboratory for TB cases in health professionals. Design: case series study with retrospective information of unique formats and the results of sensitivity tests obtained in these cases. Patients: 128 cases of tuberculosis in health personnel, diagnosed between 2009-2012 at the National Laboratory Network. Measurements: the distribution of cases by sex, age, form of the disease, type of sample, presence of concomitant HIV infection, occupation, origin by territorial entity and results of susceptibility testing among new and previously treated cases were evaluated. Results: 64.8% of patients were female, aged between 20 to 40 years, median 32; 78.9% were to pulmonary forms; a TB / HIV co-infection was identified in in 7.9% of cases; occupations most affected were physicians with 21.4%, followed by nursing assistants with 8.6%. The territorial entities that evaluated more cases were Antioquia, Valle del Cauca and Bogota; a global resistance to antituberculosis drugs was identified in 7.9% in new cases and a multi-resistance in 4%; in previously treated cases the overall resistance and multi-drug resistance was 12.5%. Conclusion: the country should strengthen surveillance of resistance in this risk group making diagnosis by bacilloscopy, culture and susceptibility testing of drugs, including within the guidelines of the program the performance of rapid diagnostic tests endorsed by WHO / PAHO due especially to the presence of the disease in young people and the finding of resistance in professionals dedicated people health care.

Factores asociados a tuberculosis multidrogorresistente primaria en pacientes de Callao, Peru / Factors associated with primary multidrug-resistant tuberculosis in patients from Callao, Peru

Introducción:En el Perú, Lima y Callao constituyen regiones con riesgo alto de transmisión activa de tuberculosis. La tuberculosismultidrogorresistente se presenta en el 5,54% de los casos nuevos de tuberculosis pulmonar (TB MDR primaria) en Lima y Callao. Susfactores de riesgo no han sido estudiados en pacientes del Callao.Objetivos:Determinar los factores de riesgo para TB MDR primariaen pacientes atendidos en centros de salud de Callao, durante los años 2009- 2010.Diseño:Estudio caso control.Lugar:Centros deSalud de Callao.Participantes:Participaron 29 pacientes con TB MDR primaria y 37 con tuberculosis sensible, según los registros delPrograma de Control de Tuberculosis y las historias clínicas ubicadas en los centros de salud.Intervenciones:Toda la información fueobtenida de fuentes secundarias. En el análisis bivariado se calculó el OR de cada covariable. Para el cálculo de los OR multivariadosse utilizó modelos de regresión logística.Principales medidas de resultados:Factores de riesgo para TB MDR.Resultados:En elanálisis bivariado, el haber tenido contacto con pacientes TB MDR o XDR fue un factor de riesgo significativo (OR: 5,56; IC95%: 1,05a 29,27); lo mismo se demostró en el análisis multivariado (OR: 14,56; IC95%: 1,52 a 139,54). Además, en el análisis multivariado, lavariable edad≥40 años mostró ser un factor protector significativo (OR: 0,94; IC95%: 0,90 a 0,99).Conclusiones:El tener contactocon pacientes TB MDR/XDR fue factor de riesgo y una edad menor a 40 años un factor protector para contraer TB MDR primaria enlos pacientes del Callao estudiados.

Introduction: Lima and Callao are high risk areas for tuberculosis active transmission in Peru. Multidrug-resistant tuberculosis represents 5.54 per cent of the new cases of pulmonary tuberculosis (primary MDR-TB) in Lima and Callao. Involved risk factors have not been studied in patients from Callao. Objectives: To determine risk factors for primary MDR-TB in patients attending health care facilities in Callao during 2009-2010. Design: Case-control study. Setting: Health care facilities from Callao. Participants: Twenty nine primary MDR-TB patients and 37 drug-sensitive TB patients were studied through assessment of the Tuberculosis Control Program Registries and healthcare facilities’ clinical records. Interventions: Information was obtained from secondary sources. Odds-ratios were calculated by bivariate analysis. Logistic regression models were used to calculate multivariate odd-ratios. Main outcome measures: Risk factors for primary MDR-TB. Results: Prior contact with a MDR-TB or XDR-TB patient was a significant risk factor (OR: 5.56; 95 per cent CI: 1.05-29.27) in bivariate analysis; the same was found in multivariate analysis (OR: 14.56; 95 per cent CI: 1.52–139.54). Being 40 or more years old was a significant protective factor in multivariate analysis (OR: 0.94; 95 per cent CI: 0.90–0.99). Conclusions: Previous contact with a MDR-TB or XDR-TB patient was a risk factor, and being 40 or more years old was a protective factor for primary MDR-TB in Callao patients studied.

Evaluación de un micrométodo colorimétrico para determinar la concentración inhibitoria mínima de drogas antituberculosas frente a Mycobacterium tuberculosis / Evaluation of a colorimetric micromethod for determining the minimal inhibitory concentration of antibiotics against Mycobacterium tuberculosis

La tuberculosis multidrogorresistente (MDR), originada por aislamientos de cepas simultáneamente resistentes a isoniacida y rifampicina, es reconocida en la actualidad como un problema sanitario mundial. Nuevas técnicas que permitan detectar en forma temprana cepas MDR son necesarias para evitar su dispersión en la comunidad. En este trabajo hemos evaluado el empleo de un micrométodo colorimétrico para determinar las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) de las drogas de primera línea frente a dichas cepas, usando el indicador: bromuro de 3-(4,5 dimetiltiazol-2-yl)-2,5 difeniltetrazolio (M-MTT). Junto a la cepa de referencia H37Rv se procesaron 603 aislamientos clínicos, 507 provenientes de casos pulmonares (84,1%) y 96 de extrapulmonares (15,9%). Como estándar de referencia se utilizó el método de proporciones en medio de Löwenstein-Jensen (MP), con isoniacida (INH), 0,20 µg/ml; estreptomicina (SM), 4,00 µg/ml; etambutol (EMB), 2,00 µg/ml y rifampicina (RMP), 40,00 µg/ml. Los intervalos de concentraciones de las drogas empleadas en el M-MTT fueron: INH, 1,00-0,03 µg/ml; SM, 8,00-0,25 µg/ml; EMB, 32,00-1,00 µg/ml y RMP: 2,00-0,06 µg/ml. El resultado de la CIM por el M-MTT fue obtenido en un tiempo promedio de 8 días (rango total: 7 a 12 días). Los puntos de corte para cada una de las drogas, calculados mediante el análisis de la curva ROC, fueron: INH, 0,25 µg/ml; RMP, 0,50 µg/ml; SM, 4,00 µg/ml y EMB, 4,00 µg/ml. Los valores de sensibilidad y especificidad fueron 100% en el caso de RMP; y 97,8% y 99,5%, respectivamente, para INH. El análisis estadístico de los resultados permitió concluir que el M-MTT es un método seguro para la rápida detección de MDR. Por su sencillez y bajo costo, podría ser aplicado en los países en vías de desarrollo.

Multidrug-resistant tuberculosis (MDR) caused by strains resistant to both isoniazid and rifampin is now considered a serious sanitary problem worldwide. New technical tools for the early detection of these strains are urgently needed to avoid their spread within the community. We have evaluated a microplate colorimetric-based method to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of first-line antituberculosis drugs by using 3-(4, 5 dimethylthiazolyl 1-2 yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide as a bacterial growth indicator (MTT) (M-MTT). A total of 603 clinical isolates, 507 from respiratory cases (84.1%) and 96 from non-respiratory cases (15.9%) were processed. The proportion method on a Löwenstein-Jensen medium (PM) with isoniazid (INH), 0.20 µg/ml; streptomycin (SM), 4.00 µg/ml; ethambutol (EMB), 2.00 µg/ml and rifampin (RMP), 40.00 µg/ml, was used as the gold standard. The drugs and the concentration range tested were: INH, 1.00-0.03 µg/ml; SM, 8.00-0.25 µg/ml; EMB, 32.00-1.00 µg/ml and RMP, 2.00-0.06 µg/ml. MIC results were obtained on an average of 8 days (range: 7-12). The cut-off values for each drug, calculated by the ROC curve method, were: INH, 0.25 µg/ml, RMP, 0.50µg/ml, SM, 4.00 µg/ml and EMB, 4.00 µg/ml. Sensitivity and specificity for RMP were 100 %, while for INH, they were 97.8% and 99.5% respectively. The results obtained suggested that M-MTT is a low cost and easy to set up method that could be applied to MDR clinical diagnosis in developing countries.