ABSTRACT
La regeneración de plantas mediante el cultivo de tejidos es un importante componente de la biotecnología que es requerido para procesos tales como la obtención de plantas transgénicas. Se estableció un sistema eficiente de regeneración para la especie Solanum tuberosum L. var. Pastusa Suprema, susceptible de ser transformada genéticamente. Se evaluó el efecto de las fitohormonas zeatina ribósido (ZR), ácido naftalénacetico (ANA) y ácido gibérelico (AG3), utilizadas en combinaciones específicas, sobre la inducción de callo, la regeneración y el número de brotes producidos por explante. La presencia de ANA demostró ser esencial en la respuesta callogénica y regenerativa de los explantes. Se encontró que la adición de 3,0 mg/L de ZR, 0,02 mg/L de ANA y 1,0 mg/L de AG3 sobre un medio básico M-S, es una formulación hormonal adecuada para inducir el proceso de organogénesis indirecta sobre la variedad de papa Pastusa Suprema; produce callogénesis y regeneración en porcentajes superiores al 90%, con un promedio de seis regenerantes por explante.
Plant regeneration using tissue culture represents an important biotechnological tool which is necessary in processes such as obtaining transgenic plants. An efficient regeneration system was established for Solanum tuberosum L. var. Pastusa Suprema; this specie is susceptible to being genetically transformed. The effect of zeatin riboside (ZR), gibberellic acid (GA3) and naphthalene acetic acid (NAA) phytohormones used in specific combinations was evaluated regarding callus induction and bud regeneration and number per explant.The presence of NAA was seen to be essential in explants callogenic and regenerative response. Adding 3.0 mg/L ZR, 0.02 mg/L NAA and 1.0mg/L GA3 to a basic M-S medium was an appropriate hormonal combination for inducing indirect organogenesis in the Pastusa Suprema potato variety; it produced more than 90% callus genesis and plant regeneration and an average of six regenerants per explant.
Subject(s)
Organogenesis/physiology , Organogenesis/immunologyABSTRACT
Se estableció un sistema de organogénesis indirecta para la obtención de brotes múltiples a partir de segmentos internodales de la variedad Diacol Capiro. La ubicación de explantes en medio Murashige y Skoog (MS) suplementado con 2 mg/l de zeatina ribosido (ZR), 0,02 mg/l de ácido naftalenácetico (ANA) y 0,02 mg/l de ácido giberélico (AG3), permite la obtención de plántulas entre la séptima y novena semana con una efectividad del 80-100%. Mediante ubicación de explantes previamente cocultivados con la cepa LBA4404 de Agrobacterium tumefaciens que contiene el plásmido recombinante pNOV022, se verificó la utilidad del medio para procesos de transformación, obteniéndose tasas hasta del 100% de regeneración. Finalmente, con el objetivo de determinar el uso potencial de la manosa como agente selectivo en procesos de transformación, se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de manosa sobre la viabilidad y capacidad regenerativa de explantes.
A system of indirect organogenesis for the multiple buds production from internode stem sections in Diacol Capiro variety was established. Explants on Murashige & Skoog (MS) medium with zeatine riboside (ZR) 2 mg/l, naftalenacetic acid (NAA) 0.02 mg/l and giberelic acid (GA3) 0.02 mg/l, produced plants ranging between 7 to 9 weeks with 80-100% effectiveness. In the same medium, explants infected with Agrobacterium LBA4404 strain which carries recombinant plasmid pNOV022, produced regeneration rates reached 100%, thus, the medium utility for trnsformation processes was verified. Finally, to determine the potential use of the mannose as selective agent in transformation processes, the effect of different mannose concentrations on explant viability and regenerative capacity was evaluated.