Proportional vascularization along the fallopian tubes and ovarian fimbria: assessment by confocal microtomography / Proporção vascular ao longo das tubas uterinas e fímbria ovariana: avaliação pela microtomografia confocal

Abstract Objective: To evaluate and reconstruct three-dimensional images of vascularization along the fallopian tube (FT), as well as to determine its relationship with the ovary and ovarian fimbria, and to quantify the blood vessels along the FT according to its anatomical segments, using confocal microtomography (micro-CT). Materials and Methods: Nine specimens (six FTs and three FTs with ovaries) were fixed in a solution of 10% formalin for > 24 h at room temperature. Iodine staining was performed by soaking the specimens in 10% Lugol's solution for 24 h. All specimens were evaluated using micro-CT. A morphometric analysis was performed on the reconstructed images to quantify the vascular distribution along the FT. Results: In the FTs evaluated, the density of blood vessels was significantly greater in the fimbrial segments than in the isthmic segments (p < 0.05). The ovarian fimbria was clearly identified, demonstrating the important relationship between these vessels and the FT fimbriae. Conclusion: We believe that the vascularization in the fimbriae is greater than and disproportional that in the other segments of FT, and that the ovarian fimbria plays an important role in the development of that difference.

Resumo Objetivo: Avaliar e reconstruir imagens tridimensionais da vascularização ao longo da trompa de Falópio (TF) e sua relação com o ovário e fímbria do ovário, além de quantificar os vasos sanguíneos ao longo da TF de acordo com seus segmentos anatômicos usando microtomografia confocal (micro-TC). Materiais e Métodos: Nove espécimes (seis com TFs e três com TFs e ovários) foram fixados em solução de formol a 10% por mais de 24 h à temperatura ambiente. A coloração com iodo foi realizada usando solução de Lugol a 10% durante 24 h. Todos os espécimes foram avaliados usando micro-TC. Uma análise morfométrica foi realizada nas imagens reconstruídas para quantificar a distribuição vascular ao longo da TF. Resultados: A densidade dos vasos sanguíneos nas fímbrias foi significativamente aumentada em comparação ao segmento ístmico da TF (p < 0,05). A fímbria ovariana foi claramente identificada, demonstrando importante relação entre esses vasos e as fímbrias da TF. Conclusão: Acreditamos que as fímbrias apresentam vascularização aumentada e desproporcional em comparação com os demais segmentos da TF e que a fímbria ovariana desempenha importante papel nessa diferença.

Direct in vitro regeneration of castor bean plants (Ricinus communis) using epicotyls / Regeneração direta in-vitro de plantas de mamona ( Ricinus communis ) usando epicótilos

A regeneration protocol for castor bean plant (Ricinus communis) was successfully developed using epicotyl sections obtained from in vitro seedlings. The maximum number of induced shoots (4.3 shoots/explant) and highest shoots frequency (75,56%) was obtained in WPM medium supplemented with TDZ (1 mg/L) and zeatin (0.5 mg/L), whereas the minimum number (0.8 shoots/explant) and lowest shoots frequency (37,78%) was obtained in medium containing TDZ (1 mg/L) and BAP (0.5 mg/L). The highest percentage of rooting (93.3%) was obtained in a medium containing IBA (1 mg/L). These plants were transplanted in a mesh house and achieved a high adaptability to acclimatization, reaching 77% survival. On the other hand, the maximum elongation (height) during this stage was 7.9 cm in plants supplemented with WPM nutrients, whereas it was only 4.38 cm in control plants

Foi desenvolvido com sucesso um protocolo de regeneração para a planta de Mamona (Ricinus communis) utilizando seções de epicótilos, obtidas a partir de mudas in vitro. O número máximo de brotações induzidas (4.3 brotos/explante), assim como a maior frequência de brotações (75,56%), foi obtido em meio WPM suplementado com TDZ (1 mg/L) e zeatina (0,5 mg/L). Enquanto que o número mínimo (0,8 brotos/explante), como a menor freqüência de rebentos (37,78%), foi obtido em meio contendo TDZ (1 mg/L) e BAP (0,5 mg/L). Adicionalmente, a maior percentagem de enraizamento (93,3%) foi obtida em um meio contendo IBA (1 mg/L). Depois da regeneração, as plantas foram transplantadas em casa de vegetação e conseguiram uma alta adaptabilidade e aclimatização, atingindo 77% de sobrevivência. Por outro lado, oalongamento máximo (altura) durante este estágio foi de 7,9 cm em plantas suplementadas com nutrientes de WPM, enquanto as plantas de controle presentaram apenas 4,38 cm

Morphogenesis of the rhea (Rhea americana) respiratory system in different embryonic and foetal stages / Morfogênese do sistema respiratório da ema (Rhea americana) em diferentes estágios embrionários e fetais

The rhea (Rhea americana) is an important wild species that has been highlighted in national and international livestock. This research aims to analyse embryo-foetal development in different phases of the respiratory system of rheas. Twenty-three embryos and foetuses were euthanized, fixed and dissected. Fragments of the respiratory system, including the nasal cavity, larynx, trachea, syrinx, bronchi and lungs, were collected and processed for studies using light and scanning electron microscopy. The nasal cavity presented cubic epithelium in the early stages of development. The larynx exhibited typical respiratory epithelium between 27 and 31 days. The trachea showed early formation of hyaline cartilage after 15 days. Syrinx in the mucous membrane of 18-day foetuses consisted of ciliated epithelium in the bronchial region. The main bronchi had ciliated epithelium with goblet cells in the syringeal region. In the lung, the parabronchial stage presented numerous parabronchi between 15 and 21 days. This study allowed the identification of normal events that occur during the development of the rhea respiratory system, an important model that has not previously been described. The information generated here will be useful for the diagnosis of pathologies that affect this organic system, aimed at improving captive production systems.(AU)

A ema (Rhea americana) representa importante espécie silvestre que vem se destacando na pecuaria nacional e internacional. Esta pesquisa objetiva analisar o desenvolvimento embrionário-fetal, em diferentes fases, do sistema respiratório de emas. Vinte e três embriões e fetos foram eutanasiados, fixados e dissecados. Fragmentos do sistema respiratório: cavidade nasal, laringe, traqueia, siringe, brônquios e pulmões, foram coletados e processados para estudos por meio de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. A cavidade nasal apresentou, nas primeiras fases de desenvolvimento, epitélio estratificado cúbico. A laringe exibiu epitélio respiratório típico entre 27 e 31 dias. A traqueia aos 15 dias apresentou início de formação da cartilagem hialina. Na siringe a túnica mucosa de fetos de 18 dias e formada por epitélio estratificado ciliado na região bronquial. Os brônquios principais apresentavam epitélio estratificado ciliado com células caliciformes na região siringeal. No pulmão, o estágio parabronquial apresentou numerosos parabrônquios entre 15 a 21 dias. Este estudo permitiu a identificação de eventos normais que ocorrem durante o desenvolvimento do sistema respiratório de emas, importante modelo ainda não descrito. As informações geradas serão úteis para o diagnóstico de patologias que acometem este sistema orgânico, visando a melhoria dos sistemas de produção em cativeiro.(AU)

Date palm micropropagation: Advances and applications / Micropropagação de tamareira: Avanços e aplicações

ABSTRACT Date palm (Phoenix dactylifera L.) is a fruit tree resilient to adverse climatic conditions predominating in hot arid regions of the Middle East and North Africa. The date fruit contains numerous chemical components that possess high nutritional and medicinal values. Traditional propagation by offshoots is inefficient to satisfy current demands for date palm trees. Alternatively, micropropagation provides an efficient means for large-scale propagation of date palm cultivars. Both somatic embryogenesis and organogenesis, either directly or indirectly though the callus phase, have been demonstrated in date palm in vitro regeneration. Culture initiation commonly utilizes shoot-tip explants isolated from young offshoots. Recently, the immature inflorescences of adult trees were utilized as an alternative nondestructive source of explants. In addition to the nature of the explant used, successful plant regeneration depends on the cultivar, composition of the culture medium and physical status. Challenges of date palm micropropagation include long in vitro cycle, latent contamination, browning, somaclonal variation as well as ex vitro acclimatization and transplanting. A remarkable amount of research investigating these factors has led to optimized protocols for the micropropagation of numerous commercially important cultivars. This has encouraged the development of several international commercial tissue culture laboratories. Molecular characterization provides an assurance of genetic conformity of regenerated plantlets, a key feature for commercial production. This article describes date palm micropropagation protocols and also discusses recent achievements with respect to somaclonal variation, molecular markers, cryopreservation and future prospects.

RESUMO A tamareira (Phoenix dactylifera L.) é uma arvore frutífera adaptada à condições climáticas adversas predominantemente em regiões áridas do Oriente Médio e Norte Africano. As tâmaras possuem vários componentes químicos com alto valor medicinal e nutricional. A propagação tradicional por estacas não é suficiente para satisfazer a demanda por mudas e assim, a micropropagação apresenta-se como uma alternativa eficiente para a produção de mudas em larga escala. Embriogênese somática e organogênese, tanto direta quanto indireta via calos, tem sido usada para obter a regeneração in vitro de tamareira. O inicio do cultivo in vitro normalmente utiliza meristemas excisados de brotações jovens. Recentemente, inflorescências imaturas de árvores adultas são usadas como fonte alternativa de explantes não destrutiva. Além da origem do explante, o sucesso da regenerção depende do cultivar, da composição do meio de cultura e de condições físicas. Desafios na micropropagação de tamareira incluem um longo ciclo in vitro, contaminação, escurecimento do tecido, variação somaclonal além do enraizamento e aclimatização ex vitro. Diversos estudos investigando esses fatores tem conduzido à otimização de protocolos de micropropagação de inúmeros cultivares comerciais proporcionando o estabelecimento de vários laboratórios de cultura de tecidos de plantas. A caracterização molecular permite uma segura conformidade genética do material regenerado, considerado uma característica chave na produção comercial. Essa revisão descreve protocolos de micropropagação de tamareira e aborda as mais recentes conquistas relacionadas à variação somaclonal, marcadores moleculatres, criopreservação e perspectivas futuras.

Induction of in vitro shoots of Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) from leaf explants / Indução in vitro de brotos de Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) a partir de explantes foliares

Bromeliads are an important group for the maintenance of the Atlantic Forest, with many threatened species due to exacerbated extraction and destruction of their natural habitats. Considering the need of developing protocols for the conservation of these species, the aim of this work was to evaluate the effect of different growth regulators in the in vitro induction of shoots of Billbergia euphemiae. Leaf explants were excised from seedlings derived from in vitro germination and grown on MS medium supplemented with NAA (0, 1 or 2 µM) and BA (0, 2, 4 or 6 µ M) combinations. The evaluation of the number of shoots per explant, shoot length, number of leaves per shoot and longest leaf length average was carried out after 30 and 60 days of culture. The best in vitro responses were observed in the presence of 1 µM NAA after 60 days of culture, which induced the best production of shoots per explant (16.39), as well as the highest rates of shoot length (1.08 cm), number of leaves per shoot (5.00) and the longest leaf length (0.56 cm). This work determined the best conditions for shoot production from leaf explants of B. euphemiae, being the first report on micropropagation of this species.

As bromélias constituem um importante grupo para a manutenção da Floresta Atlântica, com várias espécies ameaçadas de extinção pelo extrativismo exacerbado e a destruição dos habitats naturais. Considerando a necessidade do desenvolvimento de protocolos para a conservação destas espécies, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes reguladores de crescimento na indução de brotos de Billbergia euphemiae. Explantes foliares foram excisados de plântulas derivadas da germinação in vitro e inoculados em meio MS suplementado com combinações de ANA (0, 1 ou 2 µM) e BA (0, 2, 4 ou 6 µM). O número de brotos por explantes, comprimento dos brotos, número médio de folhas por broto e comprimento médio da maior folha foram avaliados após 30 e 60 dias de cultura. As melhores respostas foram observadas na presença de ANA a 1 µM, após 60 dias de cultura, que induziu a maior produção de brotos por explante (16,39), assim como as maiores taxas de comprimento dos brotos (1,08 cm), número médio de folhas por broto (5,00) e comprimento da maior folha (0,56 cm). Este trabalho determinou as melhores condições para produção de brotos de B. euphemiae a partir de explantes foliares, representando o primeiro relato de micropropagação desta espécie.

Somaclones em batata identificados pelos descritores mínimos de broto / Potato somaclones identified by minimum descriptors sprout

Este estudo objetivou verificar a estabilidade fenotípica das cultivares de batata 'Asterix' e 'Macaca', avaliar o efeito do tipo de explante (organogênese direta e indireta) e do tempo de subcultivo (12 e 70 meses) em meio nutritivo MS sobre a ocorrência de somaclones nas duas cultivares na produção de batata semente, mediante o emprego de sete descritores mínimos de broto. Em 'Asterix' e 'Macaca' ocorreram somaclones em quatro dos sete descritores, contudo, apenas no formato e pubescência da base do broto houve variação, simultaneamente, em ambas. Os dois genótipos são suscetíveis à ocorrência de variação somaclonal. Registrou-se somaclonesnos dois tempos de subcultivo nas duas cultivares. Diferente do amplamente registrado, identificaram-se somaclones em segmentos apicais caulinares e nodais originados de organogênese direta em 'Asterix' e 'Macaca'.

It was examined the phenotypic stability of potato cultivars 'Asterix' and 'Macaca', evaluated the effect of explant type (direct and indirect organogenesis) and subculture time (12 and 70 months) in MS nutrient medium on the occurrence of somaclonal variation in both cultivars in seed potato production through the use of seven minimum descriptors sprout. In 'Asterix' and 'Macaca' somaclones have occurred in four of the seven descriptors, however, only in the shape and in the base of the bud pubescence that somaclonal variation occurred simultaneously in both cultivars. Both genotypes are susceptible to the occurrence of somaclonal variation. It was identify the occurrence of somaclones both at 12 months and 70 months of subculture in both genotypes. Unlike the widely recorded, somaclones were identified in shoot apical segments and nodal segments derived from direct organogenesis in 'Asterix' and 'Macaca'.

Fitorreguladores e posição de explantes foliares na indução à calogênese em cerejeira-do-mato / Phytoregulators and leaf explants position on callus induction in cerejeira-do-mato

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes formas de inoculação, no meio nutritivo, de explantes foliares de Eugenia involucrata DC., uma espécie florestal nativa com diversas potencialidades econômicas. Foram avaliadas as posições abaxial, adaxial, com e sem cortes no limbo foliar. Foi utilizado o meio de cultura MS acrescido de 10 µM de ANA isolado ou das combinações, em µM, de 2,4-D e BAP: 5-5 e 5-10. A posição dos explantes afeta a calogênese e a organogênese em segmentos foliares de E. involucrata, sendo mais adequada a abaxial sem cortes na região do limbo. A associação dos reguladores de crescimento 2,4-D + BAP na concentração de 5-10 µM foi mais promissora para a obtenção de calos, especialmente os nodulares, putativos à embriogênese somática.

The aim of this research was to evaluate the effect of different forms of leaf explants inoculation in nutritive medium of Eugenia involucrata DC., an native forest species with diverse economic potentials. Inoculations were evaluated at abaxial and adaxial positions, with and without cuts on the leaf surface in the MS nutritive medium supplemented with 10 µM NAA or combination, in µM, of 2.4-D and BAP: 5-5 and 5-10. The explants position inoculation affects the callus induction and organogenesis in E. involucrata leaf segments, being the abaxial the most suitable position, without cuts in the leaf surface. The combination of growth regulators 2.4-D and BAP, at concentrations of 5-10( µM) was most promising of callus obtaining, especially nodular callus, putative at somatic embryogenesis.

Micropropagação de umburana de cheiro / Micropropagation of umburana de cheiro

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.

Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars / Otimização do protocolo e análise histológica da regeneração in vitro de plantas dos cultivares de cana-de-açúcar RB92579 e RB93509

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

In vitro morphogenesis of Syngonanthus mucugensis Giul: subsp. mucugensis / Morfogênese in vitro de Syngonanthus mucugensis Giul: subsp. mucugensis

Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis is an herbaceous plant with significant economic value in the ornamental dry flower business. The restricted occurrence of the municipality Mucugê-BA, Brazil, exclusively associated with extractive exploitation, has considered this species as endangered. The objective of this work was to evaluate the organogenic potential of three different types of S. mucugensis subsp. mucugensis explants to promote the development of an alternative method to the propagation of the genetic resources of this important plant. The morphogenetic capacities of the leaf, stem and root this species was tested using Murashige and Skoog culture medium at half salt concentration and different concentrations of growth of regulators benzylaminopurine - BAP (0.00; 2.22 and 4.44 µM), and naphthalene acetic acid - NAA (0.00; 1.34 and 2.68 µM). The morphoanatomic events that lead to formation of shoots were described. Stems proved to be the best source of explants, showing 58.75 percent regeneration of shoot by direct organogenesis in the absence of growth regulators, and 32.18 and 47.55 percent of shoot regeneration by indirect organogenesis in the presence of 2.22 and 4.44 µM BAP, respectively. As for leaves, there was callus formation, but without regenerating shoots. Morphogenesis was not observed when roots were used as explants. The histological analyses showed that shoot regeneration in S. mucugensis subsp. mucugensis occurred both indirectly, by unorganized tissue differentiation, and directly through returning to merismatic activity in differentiated mature cells and preexisting bud proliferation.

Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis é uma herbácea com grande potencial de utilização no comércio de flores secas ornamentais. A ocorrência restrita ao município de Mucugê-BA, Brasil, associado à exploração extrativista tem levado essa espécie ao risco de extinção. Neste estudo, objetivou-se avaliar o potencial organogênico de três diferentes tipos de explantes de S. mucugensis subsp. mucugensis visando ao desenvolvimento de um método alternativo para a sua propagação. A capacidade morfogênica de caule, folha e raiz foi testada utilizando o meio de cultura Murashige e Skoog com metade da concentração salina e diferentes concentrações dos reguladores de crescimento benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,22 e 4,44 µM) e ácido naftaleno acético - ANA (0,00; 1,34 e 2,68 µM). Os eventos morfoanatômicos que levaram a formação dos brotos foram descritos. O caule demonstrou ser a melhor fonte de explante, apresentando 58,75 por cento de regeneração de brotos via organogênese direta, em meio livre de regulador de crescimento; e 32,18 e 47,55 por cento de regeneração de brotos por organogênese indireta na presença de 2,22 e 4,44 µM de BAP, respectivamente. Para folha, foi obtida a formação de calos sem regeneração de brotos, não sendo observada morfogênese, quando se utilizou raiz como explante. As análises histológicas mostraram que a regeneração de brotos em S. mucugensis subsp. mucugensis ocorreu tanto por via indireta, pela diferenciação do tecido calogênico desorganizado, quanto por via direta pela retomada da atividade meristemática em células maduras diferenciadas e proliferação de gemas pré existentes.

Meios de cultura no desenvolvimento de ápices caulinares de mamoneira (Ricinus communis L.) in vitro / Culture media on in vitro development of castor bean (Ricinus communis l.) stem tips

A pesquisa da composição do meio de cultura mais adequado à espécie vegetal e ao tipo de explante empregado é o fator de maior relevância da cultura de tecidos. O cultivo de ápice caulinar com recuperação da planta matriz é uma técnica de grande impacto para a propagação de plantas in vitro, regeneração de plantas livres de vírus, conservação de germoplasma e modificação genética. Objetivou-se, neste trabalho, avaliar composições do meio de cultivo para organogênese direta in vitro a partir de ápices caulinares pertencentes à população FCA-UNESP-PB de mamoneira (Ricinus communis L.), com vistas à propagação clonal de genótipos elite. Foram testadas quatro formulações: MS básico (T1), MS modificado 1 (T2), MS modificado 2 (T3) e WPM (T4), em delineamento experimental inteiramente casualizado, com 20 repetições em cada tratamento, sendo a repetição 1 ápice caulinar/frasco. O T3 apresentou-se superior e diferiu significativamente dos outros tratamentos apresentando 35 por cento dos ápices caulinares diferenciados e desenvolvidos; seguiu-se o T2 com 10 por cento e os tratamentos T1 e T4 não apresentaram diferenciação de tecidos. Os resultados permitiram concluir que os balanceamentos de sais minerais nos meios de cultura avaliados, especialmente a relação NO3 / NH4 e ausência de FeSO4.7H2O, indicaram grande influência no desenvolvimento de ápices caulinares de mamoneira.

The research of the culture medium composition suitable for plant species and the type of explant to be used is the most significant factor in plant tissue culture. The culture of stem tips with plant donor recovery is a technique of great impact for the in vitro plant production, regeneration of virus-free plants, germoplasm conservation and genetic modification. The objective of this study was to evaluate culture media composition in vitro on direct organogenesis of the FCA-UNESP-PB population of castor bean (Ricinus communis L.), from stem tips for clonal propagation of elite genotypes. Four formulations were tested: basic MS (T1), modified MS 1 (T2), modified MS 2 (T3) and WPM (T4) in a completely randomized experimental design with 20 replicates pertreatment with 1stem tip/flask. The treatment T3was superior, and differed significantly from the other treatments, with 35 percent of stem tips developed, followed by 10 percent in T2. T1 and T4 showed no plant tissue differentiation. The results allowed to conclude that the balance of mineral salts and culture media evaluated especially the rate NO3 / NH4 and the absence of FeSO4.7H2O showed nigh influence on the development of stem tips of castor bean.

In vitro shoot regeneration of boldo from leaf explants / Regeneração in vitro de boldo a partir de explantes foliares

A shoot regeneration system for Plectranthus neochilus was studied from leaf explants. Leaves developed under in vitro conditions were cultured on Wood Plant Medium supplemented with 0.2mg dm-3 α-naphthaleneacetic acid (NAA) and different 6-benzilaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ) concentrations (0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0mg dm-3). An increase in percentage of responsive explants (85.3 percent) and in the number of shoots developed per explant (3.2) was observed when the explants were treated with 5.3 and 4.7mg dm-3 BAP, respectively. The leaf explants cultured on media supplemented with TDZ became vitreous and did not form buds. The regeneration system used is efficient for boldo bud induction and shoot development, showing high potential for advanced cellular and molecular studies.

O objetivo do presente trabalho foi adequar um protocolo de regeneração a partir de explantes foliares de Plectranthus neochilus. Folhas desenvolvidas sob condições in vitro foram cultivadas em meio WPM suplementado com 0,2mg L-1 de ácido α-naftaleno acético (ANA) e diferentes concentrações (0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0mg L-1) de 6-benzilaminopurina (BAP) ou thidiazuron (TDZ). Observou-se o aumento na percentagem de explantes regenerantes (85,3 por cento) e no número de brotações por explante (3,2), quando os explantes foliares foram cultivados em meio contendo 5,3 e 4,7mg L-1 de BAP, respectivamente. Os explantes foliares cultivados em TDZ tornaram-se vítreos e não formaram gemas. O protocolo utilizado é eficiente para a indução de gemas e brotações, demonstrando a potencialidade de seu uso para estudos mais avançados de biologia celular e molecular.

Regeneração de Euphorbia heterophylla L. in vitro / In vitro regeneration of Euphorbia heterophylla L.

Objetivou-se neste trabalho estudar a regeneração in vitro da planta daninha Euphorbia heterophylla a partir de explantes hipocotiledonares, cotiledonares e radiculares com diferentes concentrações do hormônio 2iP, combinado ou não com auxina e cinetina adicionado ao meio MS/2. Foram avaliados os números de explantes com gema, número de gemas por explante, número de plântulas enraizadas e aclimatadas. Obteve-se em média duas gemas por explante hipocotiledonar em 50 por cento desses, a partir de organogênese direta com o uso de 0,5 mg.L-1 de 2iP. Não houve regeneração a partir dos explantes cotiledonares e radiculares. A cultura racinar desenvolveu-se em todos os tratamentos contendo ou não auxina. Esses resultados poderão auxiliar em futuros testes fisiológicos de resistência dessa planta a herbicidas.

This work aimed to study the in vitro regeneration of the weed Euphorbia heterophylla from hypocotyls, cotyledon and root explants grown under different concentrations of the hormone 2iP, combined or not with auxin added to MS/2 medium. The parameters analyzed were the number of explants with shoot, number of shoot for explants, number of rooted and acclimatized plants. The results showed an average of two shoot for hypocotyls explants, in 50 percent of these, from direct organogenesis with the use of 0.5 mg. L-1 of 2iP. No regeneration from the cotyledon and root explants was verified. The root culture developed in all treatments with or without auxin. These results will be able to assist in future physiological tests of resistance of this plant of herbicides.