Serum concentrations of acute phase proteins and immunoglobulins of calves with rotavirus diarrhea / Concentração sérica de proteínas de fase aguda e imunoglobulinas em bezerros acometidos por diarreia por rotavírus

The aim of the present study was to characterize changes in acute phase protein levels according to the occurrence of rotavirus diarrhea in calves in the first month of life. Blood and fecal samples were taken before colostrum intake and at 1, 2, 7, 15, 21 and 30 days of age from 24 Holstein calves allotted in three experimental groups: calves that did not present diarrhea (group A), calves that presented diarrhea, but tested negative for rotavirus in feces (group B), and calves that presented diarrhea and tested positive for rotavirus in feces (group C) (experiment 1). When the animals presented episodes of diarrhea, blood and fecal samples were taken at 24-hour intervals until the end of clinical signs (experiment 2). Serum proteins were separated by SDS-PAGE technique and rotavirus in feces was detected by PAGE. Data of experiment 1 were analyzed by ANOVA and Tukey's test, considered significant at P<0.05. Data of experiment 2 were subjected to the HSD test. Total protein, globulins, and IgG concentrations were lower in group C than in groups A and B. Ceruloplasmin and transferrin levels were higher in group C than in groups A and B. Serum concentrations of haptoglobin and α1-acid glycoprotein did not differ significantly between groups throughout the experimental period. Calves presented diarrhea between 10.4 and 14.6 days of age in group B, and between 10.3 and 14.6 days of age in group C. In the moments of diarrhea manifestation, least square means of IgA, haptoglobin and α1-acid glycoprotein concentrations did not differ significantly between groups B and C, but ceruloplasmin and transferrin concentrations were higher in group C than in group B, as opposed to what occurred with IgG levels. These findings show that optimizing passive immunity transfer of immunoglobulins decrease the likelihood of calves developing diarrhea caused by rotavirus. In addition, ceruloplasmin presents characteristics of a biomarker of rotavirus infection in calves.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar alterações nos teores de proteínas de fase aguda de acordo com a ocorrência de diarreia por rotavírus em bezerros no decorrer do primeiro mês de vida. Amostras de sangue e fezes de 24 bezerros da raça Holandesa foram coletadas antes da ingestão de colostro e com um, dois, sete, quinze, vinte um e trinta dias de idade, sendo os bezerros alocados em três grupos: bezerros que não apresentaram diarreia (grupo A), bezerros que apresentaram diarreia, mas foram negativos para a detecção de rotavírus nas fezes (grupo B) e bezerros que apresentaram diarreia e foram positivos para detecção de rotavírus nas fezes (grupo C) (experimento 1). Sempre que os animais apresentavam episódio de diarreia, amostras de sangue e fezes eram coletadas em intervalos de 24 horas até o término dos sinais clínicos (experimento 2). As proteínas séricas foram separadas por meio da técnica de SDS-PAGE e a pesquisa de rotavírus nas fezes foi realizada por meio da técnica de PAGE. Os resultados do experimento 1 foram analisados por meio de ANOVA e do teste de Tukey, considerado significativo quando P<0,05. Os dados do experimento 2 foram submetidos ao teste HSD. Os teores de proteína total, globulinas e IgG foram menores no grupo C que nos grupos A e B, os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que nos grupos A e B e as concentrações séricas de haptoglobina e α1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre grupos. Os bezerros manifestaram diarreia, em média, com 10,4 a 14,6 dias de idade no grupo B e com 10,3 a 14,6 dias de idade no grupo C. Nos momentos de manifestação de diarreia, os teores de IgA, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre os grupos B e C, mas os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que no grupo B, oposto ao verificado para o teor de IgG. Esses achados mostram que a otimização da transferência de imunidade passiva de imunoglobulinas reduz a probabilidade de os animais apresentarem diarreia por rotavírus. Adicionalmente, a ceruloplasmina apresenta características de um biomarcador da infecção por rotavírus em bezerros.(AU)

Analysis of bovine rotavirus strains circulating in diarrheic dairy calves in Uberaba, Minas Gerais, Brazil, during 2008-2009 / Análise de cepas de rotavírus bovino circulantes em bezerros leiteiros com diarreia em Uberaba, Minas Gerais, Brasil, durante 2008-2009

O objetivo deste estudo foi detectar rotavírus em fezes de bezerros com diarreia em Uberaba, MG, e caracterizar os genes VP7 e VP4 por meio da genotipagem e da análise filogenética. Setenta e quatro amostras foram coletadas entre novembro de 2008 e setembro de 2009. A detecção do vírus foi feita por teste de aglutinação e as amostras positivas foram submetidas à transcrição reversa, seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), tipagem por PCR e sequenciamento. A taxa de detecção de rotavírus foi de 6,8% e todas as amostras apresentaram o genótipo G6P[5]. A análise filogenética mostrou que as amostras do genótipo G6 pertencem à linhagem IV e que, para ambos os genes (VP7 e VP4), as amostras deste estudo compõem um sub-cluster à parte daquele das cepas referências e das amostras campo mais similares. O alinhamento das sequências de aminoácidos deduzidas mostrou substituições em regiões antigênicas quando comparadas com as sequências das cepas bovinas UK e NCDV, presentes nas vacinas disponíveis no Brasil. Uma nova sublinhagem genética de G6P[5] foi evidenciada neste estudo. Substituições de aminoácidos nas regiões antigênicas dos rotavírus e a circulação de novas variantes podem representar desafios para as vacinas utilizadas atualmente. O presente estudo contribui para a compreensão da epidemiologia dos rotavírus bovinos no Brasil.(AU)

Análisis molecular del gen de la VP4 de la cepa de rotavirus bovino tipo P[5] aislada de becerros en el Estado Yaracuy / Molecular analysis of the VP4 genes of bovine rotavirus strain type P[5] isolated from calves in Yaracuy State

La diarrea neonatal bovina indiferenciada es una enfermedad multifactorial que afecta a una alta proporción de becerros (50% o más) causando hasta un 40% de mortalidad en los primeros 30 d de vida. Entre los agentes causales se incluyen muchos enteropatógenos (bacterias, virus, protozoarios), con predominio de infecciones combinadas. Entre los virus, los rotavirus constituyen los principales agentes causales de gastroenteritis aguda en diferentes especies animales. Su genoma, de 11 segmentos de ARN de doble cadena, puede rearreglarse genéticamente en coinfecciones de diferentes cepas, produciendo una progenie viral con un nuevo fenotipo. En la ganadería bovina venezolana, se han descrito los rotavirus con una prevalencia de 20-30% en animales con cuadros de diarrea entre 2-6 sem de edad. Los serotipos G6 y el genotipo P1 se han reportado con mayor frecuencia en becerros de la región central de Venezuela. Cepas de rotavirus bovino del grupo A fueron detectados por inmunoensayo enzimático (ELISA) y electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE), en 32 de 280 (11,43%) muestras de heces de becerros de 15 fincas del estado Yaracuy, Venezuela. La secuencia nucleotídica se logró para una de las variantes detectadas (A610). En el análisis comparativo de las secuencias de la VP8* (fragmento de la VP4) mostró corresponder al genotipo P[5]. Estos datos constituyen el primer reporte de una cepa de rotavirus bovino genotipo P[5], que circula en las fincas del estado Yaracuy, Venezuela, pudiendo servir de apoyo para la incorporación de este grupo viral en las vacunas que se utilizan en el país.

The undifferentiated neonatal bovine diarrhea is a multifactorial disease that affects a high proportion of calves (50% or more) causing up to 40% of mortality in the first 30 d of life. Among the infectious agents known to cause diarrhea in calves are the rotavirus and coronavirus. Rotaviruses are the major causative agents of acute gastroenteritis in different animal species. Their 11-segment genome of double ARN chain can genetically re-arrange different strains, producing a viral progeny with new or atypical phenotype. Rotaviruses have been described in the bovine Venezuelan cattle, with a prevalence of 20-30% in animals between 2-6 weeks of age, with episodes of diarrhea. The serotypes G6 and the genotype P1 have been reported with higher frequency in calves from the central region of Venezuela. In this investigation, rotavirus strains of cattle from Group A were detected by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) in 32 of 280 (11.43%) stool samples of calves in 15 farms in the State of Yaracuy, Venezuela. The nucleotide sequence was obtained for one of the variants detected (A610) and the comparative analysis of the sequences of the VP8* (the VP4 fragment) corresponded to the P [5] genotype. These data constitute the first report of a strain of bovine rotavirus genotype P[5], which circulates in the States of Yaracuy, Venezuela, and can serve as a support for the inclusion of this viral group to the vaccines that are being used in the country.