Un problema de diagnóstico perinatal: pacientes serológicamente negativos pero infectados por el VIH / A perinatal diagnostic problem: HIV infected patients who are serologically negative

A 142 pacientes se les realizó ELISA, Inmuno blot de IgG, Inmuno blot de IgA (en los menores de 24 meses), determinación de antígeno en plasma, aislamiento viral por cultivo de detección de genoma viral por amplificación con la reacción de polimerasa en cadena (PCR). El diagnóstico integral demostró que 10 por ciento (14 pacientes) que resultaron negativos o indeterminados para detección de anticuerpos IgG anti-VIH-1, estaban infectados por el virus. Once de estos pacientes tienen entre 2 y 24 meses de edad; dos, entre 4 y 6.5 años, y uno, 30 años. El diagnóstico se emitió en cuatro de los casos por presencia de antígeno en plasma; en cinco por amplificación por PCR de ADN proviral presente en células mononucleares periféricas; en cuatro casos por PCR positivo e inmunofluorescencia (IF) del cultivo, y el último caso, presentó Inmuno blot positivo e IF del cultivo. Dichos casos presentan el problema de resultados falsos negativos por serología de anticuerpos anti-VIH, especialmente en niños menores de 24 meses

Comprehensive HIV diagnosis of 142 patients was done by ELISA, IgG immunoblot, IgA immunoblot (in patients under 24 months), plasma antigen determination, viral isolation by culture and genome detection by polymerasa chain reaction (PCR) amplification. Results showed that 14 patients (10%) with negative or indefinite results for anti-HIV-1 IgG antibody were in fact infected by the virus. Eleven of these patients were between 2 and 24 months of age, two between 4 and 6.5 years and one was 30 years old. Diagnosis was obtained by antigen positivity in four of them; by PCR amplification of peripheral mononuclear cells of proviral DNA in five of them; by PCR and immunofluorescence (II) of cultured cells in four cases, and the last diagnosis was made by IgG immunoblot and IF of the viral culture. These cases pose a problem because of false negative HIV serology, particularly in patients under 24 months of age.

Respuesta inmune humoral hacia VIH-2 en México / Humoral immune response to HIV-2 in Mexico

Objetivo. Estudiar las reacciones hacia antígenos de VIH-2 de sueros mexicanos VIH-1 positivos, en relación con la vía de transmisión y el estado clínico de los individuos infectados. Material y métodos. Se estudiaron 654 sueros (492 VIH-1 positivos y como controles 162 VIH-1 negativos). Se preparon Inmuno blots (IB) con antígenos semipurificados de MS-VIH-2 y de IIIb/LAV-VIH-1 y se corrieron en ambos todas las muestras de suero. Resultados. En el análisis de los IB de los sueros VIH-1 positivios se encontró que 79 por ciento (388/492) presentaron reactividad con, por lo menos, una proteína VIH-2; 71 por ciento (352/492) de los sueros reconocen la proteína de cápside p24; la glicoproteína transmembranal de VIH-2 es reconocida por 24 por ciento (119/492) de los sueros y 9 por ciento (44/492) reconocieron la glicoproteína externa de este retrovirus. La reactividad con VIH-2 de sueros VIH-1 positivos está significativamente asociada a la vía de adquisición de la infección (81 por ciento en vía sexual contra 39 por ciento en vía sanguínea) y al estado clínico (84 por ciento en pacientes asintomáticos o con linfadenopatía contra 31 por ciento en pacientes con SIDA). Se descartó la posible infección con los dos tipos de VIH por medio del ensayo comercial Liatek (Organon Teknica). Conclusiones. Se propone como hipótesis que las cepas introducidas originalmente en nuestro país a través de las dos vías principales de transmisión son de orígenes diferentes

Objective. To study the reactions of Mexican HIV-1 positive sera to HIV-2 antigens, and their relation to the mode of ransmission and the clinical status of infected individuals. Material and Methods. Six-hundred and fifty-four sera samples collected in Mexico were tested using HIV-2 immunoblot (IB) techniques; 492 samples were from HIV-1 positive cases and 162 from HIV-1 negative controls. Results. Seventy-nine percent (388/492) of the HIV-1 reactive sera showed reactivity with at least one HIV-2 protein: 71% (352/492) recognized the capsid protein p24, 24% (119/492) the transmembrane glycoprotein and 9% (44/492) the external glycoprotein of HIV-2. Considering the transmission mechanism, HIV-2 reactivity occurred in 81% (324/401) of the sexually infected patients, and only in 39% (16/41) of people infected through blood products. Ten highly reactive gp32 HIV-2 sera samples were titrated and results showed that reactivity with HIV-1 gp41 was always higher than that to HIV-2 gp32. HIV-1-HIV-2 dual infection was discarded by negative results with the commercial assay Liatek HIV 1+2. Conclusions. We propose that the serological cross-reactivity found can be due to a possible initial introduction in Mexico of two different viral strains through the two main ransmission routes and that the strains circulating in sexually infected individuals are more similar to the HIV-2 strains, at least with respect to their glycoproteins, than the HIV-1 strains predominant in other countries.

Diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas: autosuficiencia y concordancia interlaboratorios / Serologic diagnosis of Chagas disease: Self sufficiency and interlaboratory concordance

El dato fundamental en el diagnóstico de la tripanosomiasis americana (enfermedad de Chagas), en su fase crónica, es el estudio serológico, ya que es difícil la demostración del parásito en circulación o en los tejidos. Una seria limitación en el diagnóstico serológico se relaciona con la estandarización de las diferentes técnicas accesibles, y esto depende considerablemente de la calidad de los antígenos usados para el inmunodiagnóstico. En México no se ha abordado este problema. Los laboratorios del Instituto Nacional de Cardiología y del Instituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos, compararon sus técnicas de inmunodiagnóstico: inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación y ensayo inmunoenzimático en fase sólida (ELISA), con cepas de T. cruzi aisladas en México. La concordancia interlaboratorios fue de 0.8 (Indice Kappa) y la sensibilidad, especificidad y valor predictivo positivo y negativo de las pruebas, aseguran resultados confiables en el inmunodiagnóstico de la enfermedad de Chagas

American trypanosomiasis (Chagas'disease) is becoming a relatively common condition in North America. Diagnosis at the chronic stage depends on demonstration of specific antibodies in body fluids, since parasitologic or pathologic diagnosis is uncertain at this stage. Therefore, standardization of immunodiagnostic techniques is mandatory, and it depends on antigen quality. Locally prepared antigens and crude extracts obtained from Mexican isolates, -both from infected vector and human cases- were compared using three different immunodiagnostic assays -indirect immunofluorescence, hemagglutination and enzyme linked immunosorbant assay (ELISA)- at two different laboratories from the Instituto Nacional de Cardiología and the Instituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos. Concordance between laboratories reached a significant Kappa value (0.8) and sensitivity, specificity and predictive values of individual diagnostic assays were adequate to use these tests in clinical diagnoses. This is the first attempt to standardize immunodiagnostic techniques in Mexico.