Determinación de anticuerpos al virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) en muestras de sangre seca en papel de filtro

Se estudia la posibilidad de detectar anticuerpos al VIH-1 mediante un estuche de Immunoblotting, en un papel de 125 muestras conocidas de sangre seca colectadas en papel de filtro y su correspondiente muestra de suero. No se apreciaron diferencias en los patrones de bandas con ambos tipos de muestras, así como en la sensibilidad y especificidad, donde se alcanzaron cifras del 100 %, lo que permitió concluir que la muestra de sangre tomada en papel de filtro puede ser empleada para la detección de anticuerpos al VIH-1 por el sistema DAVIH-BLOT y puede ser conservada a 4 ºC por 30 semanas.

The possibility of detecting HIV-1 antibodies by an inmunoblotting kit is studied in a panel of 125 known specimens of dried blood spotted on filter paper and their corresponding serum samples. No differences were observed in the patterns of bands with both types of samples or in the sensitivity and specificity, where 100 % figures were attained, allowing to conclude that the blood specimen taken on filter paper may be used for the detection of HIV-1 antibodies by the DAVIH-BLOT system and may be kept at 4 ºC during 30 weeks.

Técnica de inmunofluorescencia para HIV-1 en un Centro de Referencia de la provincia de Buenos Aires / Immunofluorencence technique for HIV-1 at a Reference Center of Buenos Aires province (Argentina)

Se comprobó que la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con células H9, puede usarse como método confirmatorio para muestras repetidamente reactivas por pruebas de screening (enzimoinmunoensayo). Se evaluaron 99 sueros por IFI según la técnica del Centro Nacional de Referencia para Diagnóstico e Investigación del SIDA, que previamente habían sido seleccionados contra el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) y confirmados por la técnica de Western Blot (WB). Se incluyeron 4 sueros con screening discordante, 2 con valor de corte bajo respecto del cutoff y 1 con screening negativo. Los sueros eran de pacientes de alto riesgo: drogadictos endovenosos 60; homosexuales 5; bisexuales 5; promiscuos 1; heterosexuales en contacto con HIV positivos 7; niños hijos de HIV positivos 6; transfundidos 2 y no refieren datos 13. Por técnica de WB resultaron positivos 89 sueros (89.9%), indeterminados 7 (7.1%) y negativos 3 (3.0%). Por IFI resultaron positivos 79 sueros (79.8%),inespecíficos 2 (2.9%), indeterminados 4 (4.0%) y negativos 14 (14.1%). Un suero positivo por IFI resultó indeterminado por WB. Se hicieron controles positivos y negativos no presentando falsa reactividad. La coincidencia entre ambos métodos fue del 86%. El objetivo fue dar una medida del poder predictivo de IFI como predictor de WB. Se utilizó el criterio Lambda de Goodman-Kruskal, que mide cuánto disminuye el porcentaje de error cuando se usa IFI como predictor de WB, comparado con el predictor consistente en asignar a todos los casos el resultado positivo. Para los datos disponibles se obtiene Lambda = 0.69

Utilización de pools de suero o de saliva, en la determinación de anticuerpos al VIH-1/2 por técnicas rápidas y convencionales de E.L.I.S.A / Utilization of serum or saliva pools in determination of VIH-1/2 amtibodies for rapid and conventional technic of E.L.I.S.A.

Con objeto de evaluar la utilidad del empleo de muestas combinadas (pools) de suero 'o de saliva en el diagnóstico de la infección con los virus de la Inmunodeficiencia Humana, se estudiaron 500 personas, 100 infectadas con el V.I.H.-1 y 400 clínicamente sanas. A todas ellas se les tomaron simultáneamente muestras de sangre y de saliva. Se formaron 100 pools de muestras de sangre, y 100 pools de saliva, mezclando 200 microlitros ya fuera de suero o de saliva de una persona seropositiva y 4 seronegativas. Cada muestra individual y cada pool se analizaron con las técnicas de E.L.I.S.A. convencional y rápida (Abbott HIV-1/HIV-2 EIA y TEST PACK). Todas las muestras repetidamente positivas se confirmaron con la técnica de Western Blot (Cambridge Biotech HIV). Cada pool tanto de suero como de saliva fue estudiado de la misma manera. Los resultados obtenidos mostraron un 100 por ciento de correlación tanto en las muestras consideradas inidividualmente como en las combinadas; la especificidad, sensibilidad y valor predictivo no se vieron afectadas con el empleo de muestas combinadas (pools) ya fueran de suero o de saliva.

Evaluation of different commercial kits for HIV/HTLV-III EIA.

Choice of an ideal, cost-effective and rapid diagnostic test for HIV infection is of immense value in developing countries like India where resources are limited. A number of commercial HIV antibody testing kits are now available with varying sensitivities and specificities. Six different commercial HIV kits namely, Wellcozyme, Flow HIV-TEKG, Abbott HIV EIA, Abbott VIA, Dip-stick EIA and Abbott env/core recombinant EIA were evaluated. Du-Pont Western blot (W.B.) kit was used as gold standard to compare the results. Of the 376 sera from various high-risk individuals screened, Wellcozyme kit yielded 100 per cent concordant results with W.B. Abbott VIA and Abbott env/core also yielded results in confirmation with W.B., excepting the fact that both detected one extra sample positive, which was negative in W.B. Abbott EIA yielded 4 false positive results. Dip-stick kit yielded the maximum number of false positives. The study indicated that 3 kits, namely Wellcozyme, Abbott VIA and Abbott EIA could be used to achieve optimum and acceptable results.