Functional and biochemical characteristics of urinary bladder muscarinic receptors in long-term alloxan diabetic rats / Características funcionais e bioquímicas dos receptores muscarínicos da bexiga de ratos com diabetes crônico induzido por aloxana

Objective To re-examine the function of the urinary bladder in vivoas well as to determine the functional and biochemical characteristics of bladder muscarinic receptors in long-term alloxan-induced diabetes rats.Methods Two-month-old male Wistar rats were injected with alloxan and the animals showing blood glucose levels >300mg/dL together with age-paired untreated animals were kept for 11 months. Body weight, bladder weight, blood glucose, and urinary volume over a period of 24 hours were determined in both groups of animals. A voiding cystometry in conscious control and diabetic rats was performed to determine maximal micturition pressure, micturition contraction interval and duration as well as voided and post-voiding residual volume. In addition, concentration-response curves for bethanechol in isolated bladder strips, as well as [3H]-N methyl-scopolamine binding site characteristics in bladder homogenates were determined.Results Mean bladder weight was 162.5±21.2mg versus 290±37.9mg in control and treated animals, respectively (p<0.05). Micturition contraction amplitude (34.6±4.7mmHg versus 49.6±2.5mmHg), duration (14.5±1.7 seconds versus 23.33±4.6 seconds) and interval (87.5±17.02 seconds versus 281.11±20.24 seconds) were significantly greater in alloxan diabetic rats. Voided urine volume per micturition contraction was also significantly higher in diabetic animals. However the post-voiding residual volume was not statistically different. Bethanechol potency (EC50 3µM versus 5µM) and maximal effect (31.2±5.9g/g versus 36.1±6.8g/g) in isolated bladder strips as well as number (169±4fmol/mg versus 176±3fmol/mg protein) and affinity (0.69±0.1nM versus 0.57±0.1nM) of bladder muscarinic receptors were also not statistically different.Conclusion Bladder function in vivo is altered in chronic alloxan-induced diabetes rats without changes in functional and biochemical characteristics of bladder muscarinic receptors.

Objetivo Reestudar o funcionamento da bexiga in vivo e determinar as características funcionais e bioquímicas dos receptores muscarínicos vesicais de ratos com diabetes crônico induzido por aloxana.Métodos Ratos Wistar de dois meses de idade receberam injeção de aloxana, e os animais que apresentaram glicemia >300mg/dL foram mantidos por 11 meses junto de outros não tratados e pareados por idade. Nos dois grupos de animais, peso corpóreo, peso da bexiga, glicemia e volume urinário de 24 horas foram medidos. Em ambos os grupos, realizou-se a cistometria miccional em animais não anestesiados. Foram determinados os seguintes parâmetros: pressão máxima de micção, intervalo e contração de micção, bem como o volume de esvaziamento e o volume residual pós-miccional. Além disso, foram determinadas as curvas de concentração-resposta a betanecol em preparações isoladas de bexiga e também as características dos sítios de ligação da [3H]-N-metil-escopolamina em homogenatos de bexiga.Resultados O peso médio da bexiga foi de 162,5±21,2mg versus290±37,9mg nos animais controles e tratados, respectivamente (p<0,05). A amplitude de contração (34,6±4,7mmHg versus 49,6±2,5mmHg), a duração (14,5±1,7 segundos versus 23,33±4,6 segundos) e o intervalo (87,5±17,02 segundos versus 281,11±20,24 segundos) de micção foram significantemente maiores nos ratos tratados com aloxana. O volume de urina eliminada durante a contração miccional também foi maior nos animais diabéticos. Contudo, o volume residual pós-miccional não foi estatisticamente diferente. Não foram observadas diferenças na resposta ao betanecol (EC50 3µM versus 5µM) e no seu efeito máximo (31,2±5,9g/g versus 36,1±6,8g/g) em preparações isoladas de bexiga, bem como no número total (169±43fmol/mgversus 176±3fmol/mg) e na afinidade (0,69±0,1nMversus 0,57±0,1nM) dos receptores muscarínicos da bexiga.Conclusão O funcionamento da bexiga in vivo está alterado no diabetes crônico induzido por aloxana, porém sem alterações funcionais e bioquímicas nos receptores muscarínicos da bexiga.

Influência da condição de hipoinsulinemia-hiperglicemia na candidíase experimental sistêmica: avalição da atividade macrofágica e da distribuição das subpopulações de monócitos sanguíneos / Influence the condition of hypoinsulinemia - hyperglycemic in experimental systemic candidiasis: evalution of macrophage activity and distribution of subpopulations of monocytes blood

Diabetes mellitus (DM) é um importante fator de predisposição para o desenvolvimento de infecções, incluindo a candidíase. Embora a incidência e a gravidade das doenças infecciosas em pacientes diabéticos estejam com frequência relacionadas a disfunções da resposta imune, seus mecanismos ainda não foram bem esclarecidos. No presente estudo avaliou-se a influência da condição de hipoinsulinemia-hiperglicemia (HH) na evolução da candidíase experimental sistêmica. Parâmetros histológicos, microbiológicos e imunológicos envolvendo medula óssea, cérebro, baço e fígado, níveis plasmáticos de quimiocina e de citocinas, atividade macrofágica e distribuição de granulócitos e subpopulações de monócitos do sangue periférico foram avaliados. Para tanto, camundongos suiços, HH-induzidos ou não pela aloxana, foram inoculados com Candida albicans pela veia da cauda e avaliados 12, 24 e 96 horas e 7 dias após infecção. A presença de fungos foi avaliada em: sangue, medula óssea, rins, fígado, cérebro e baço. A atividade macrofágica foi estudada pela resposta de fagócitos peritoneais cultivados ou não com C. albicans mortas pelo calor, avaliando-se a produção de peróxido de hidrogénio e de óxido nítrico e os níveis de TNF-α, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-12p70 e CCL2 em sobrenadande de cultura. Os níveis plasmáticos destas citocinas também foram determinados. A distribuição de granulócitos e das subpopulações de monócitos circulantes foi determinada por citometria de fluxo. Os resultados mostraram aumento da mortalidade em camundongos HH; apesar da ausência de diferenças de resposta tecidual entre os grupos infectados; notamos diferenças importantes na carga fúngica presente nos diversos tecidos examinados...

Diabetis mellitus (DM) is an important predisposing factor for the development of infections, including candidiasis. Although the incidence and severity of infectious diseases in diabetic patients are related to dysfunction in the immune function, the mechanisms involved in the high susceptibility to this fungal infection are not clear. In the present study, we evaluated the influence of hypoinsulinemia-hyperglycemia (HH) on plasma levels of chemokine/cytokines, macrophage activity and distribution of peripheral blood granulocytes and monocytes subsets in a murine model of systemic candidiasis. C. albicans was intravenously inoculated in alloxan-induced HH mice, which were evaluated 12, 24 and 96 hours, and 7 days after infection. Colony-forming unit analysis and/or histopathological examination were performed on blood, bone-marrow, kidney, brain, liver and spleen. Peritoneal phagocytes were cultured with or without heat-killed C. albicans, and the production of hydrogen peroxide and nitric oxide were determined. The levels of TNF-α, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-12p70 and CCL2 were measured in the culture supernatants and also in the plasma of the mice. The distribution of peripheral blood granulocytes and monocytes subsets were performed by flow cytometry. Our findings showed an increased mortality in the infected HH mice, but they showed no significant differences in fungal recovery. Upon histopathological examination, no differences were observed between both infected groups, but strong discrepancies in fungal load were found among the tissues examined. High plasma levels of IL-6 and TNF-α as well as an excessive TNF-α-mediated macrophage response were also observed in the infected HH-induced mice. Soon after the fungal challenge, increased percentage of granulocytes and inflammatory monocytes was observed...

Polyherbal preparation for anti-diabetic activity: A screening study.

Objective: To screen the Polyherbal preparation for anti-diabetic activity in rats. Materials and Methods: The blood glucose lowering activity of the Polyherbal preparation-I (1:1:1 of Wheat germ oil, Coriandrum sativum and Aloe vera) was studied in normal rats after oral administration at doses of 1.0 and 2.0 ml/kg and Polyherbal preparation-I, II (Wheat germ oil, fresh juice of C. sativum and Aloe vera in the ratio of 2:2:1), and III (Wheat germ oil, fresh juice of C. sativum and Aloe vera in the ratio of 1:2:2) on alloxan-induced diabetic rats, after oral administration at doses of 1.0 and 2.0 ml/kg. Blood samples were collected from the tail vein method at 0, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, and 24 h in normal rats and in diabetic rats at 0, 1, 3, 7, 15, and 30 days. Blood plasma glucose was estimated by the GOD/POD (glucose oxidase and peroxidase) method. The data was compared statistically using the one-way ANOVA method followed by the Dunnett multiple component test. Statistical significance was set at P<0.05. Results: The Polyherbal preparation-I produced significant (P<0.05) reduction in the blood glucose level of normal rats and Polyherbal preparation-I, II, and III produced significant (P<0.01) reduction in the blood glucose level of diabetic rats during 30 days study and compared with that of control and Glibenclamide. Conclusion: The Polyherbal preparation-I showed a significant glucose lowering effect in normal rats and Polyherbal preparation-I, II, and III in diabetic rats. This preparation is going to be promising anti-diabetic preparation for masses; however, it requires further extensive studies in human beings.

Effect of alloxan-induced diabetes mellitus and ethanol on pregnancy outcome in mice / Efeito do diabetes mellitus induzido por aloxana e etanol na gestação de camundongos

INTRODUCTION AND OBJECTIVES: To investigate the effects of ethanol, diabetes mellitus and the combination of both on mouse fetuses. METHODS: We used 24 female Swiss mice, dividing them into four groups of 6 each: control (C), ethanol (E), diabetes (D) (blood glucose > 200 mg/dL) and diabetes + ethanol (DE). Diabetes was induced by alloxan (40 mg/kg) on day 7 of pregnancy. Groups E and DE received 4 g/kg of 25 percent v/v ethanol intraperitoneally, whereas groups C and D received saline. On day 18, all fetuses were harvested. RESULTS: In group DE the following anomalies were found: exencephaly, situs inversus totalis, situs inversus partialis, eyelid skin tag and one animal from group E had pulmonary artery hypoplasia. Ethanol administration partially reverted diabetes-fetal resorption caused by diabetes, yet it induced late fetal death. Both diabetes and ethanol reduced placental diameter and increased its weight. Ethanol had more effect on fetal length in males than in females, however, such bias was not found for diabetes. Ethanol prevented diabetes-induced tail shortening in both genders. CONCLUSIONS: These results show that, although ethanol might improve energy metabolism in early gestation, it causes cell damage that leads to cardiovascular, limb and neural tube defects, late fetal death and reduced placental size.

INTRODUÇÃO E OBJETIVOS: Investigar o efeito do etanol, do diabetes mellitus (DM) e da associação de ambos sobre os fetos de camundongo. MÉTODOS: Foram utilizadas 24 fêmeas de camundongos Swiss divididas em quatro grupos de seis animais cada: controle (C); etanol (E); diabetes (D) (glicemia > 200 mg/dl), e diabetes + etanol (DE). O diabetes foi induzido pela aloxana (40 mg/kg) no dia 7 da gestação. Os animais dos grupos E e DE receberam 4 g/kg de solução a 25 por cento v/v de etanol intraperitoneal (IP), enquanto os animais dos grupos C e D receberam salina. No dia 18, todos os fetos foram coletados. RESULTADOS: Foram encontradas as seguintes anomalias no grupo DE: exencefalia, situs inversus totalis, situs inversus partialis e apêndice cutâneo palpebral. Um animal do grupo E apresentou hipoplasia da artéria pulmonar. A administração de etanol reverteu parcialmente a reabsorção fetal induzida pelo diabetes, porém aumentou a morte fetal tardia. Ambos, diabetes e etanol, reduziram o diâmetro placentário e aumentaram o seu peso. O etanol teve mais efeito no comprimento de fetos machos, contudo isso não ocorreu com o diabetes. O etanol preveniu a redução da cauda induzida pelo diabetes em ambos os sexos. CONCLUSÃO: Esses resultados indicam que, embora o etanol possa melhorar o metabolismo energético no início da gestação, ele causa lesão celular que leva a defeitos cardiovasculares, dos membros e do tubo neural, além de morte fetal tardia e redução do tamanho da placenta.

Utilização do AutoCAD 2004 para quantificação de pesquisas usando fotomicrografias eletrônicas / AutoCAD 2004 to quantify electron-photomicrography

OBJETIVO: Avaliar o uso do programa AutoCAD 2004 para estudos quantitativos em microscopia eletrônica. MÉTODOS: A demonstração da utilização do AutoCAD 2004 foi feita em um modelo experimental de diabetes induzido em ratos, divididos em Grupo Controle (GC-10 animais) e Grupo Diabético (GD - 10 animais), avaliados 1 mês depois da indução do diabetes. Os olhos foram removidos após o sacrifício dos animais e preparados para exame em microscópio eletrônico, tendo sido feitas fotografias dos vasos retinianos. Foi utilizado o programa AutoCAD2004 para avaliar a espessura da membrana basal dos vasos. Os resultados foram avaliados estatisticamente. RESULTADOS: Usando o método proposto foi possível realizar medidas quantitativas na membrana basal de vasos retinianos de ratos diabéticos. CONCLUSÃO: O AutoCAD 2004 se mostrou efetivo, seguro e de fácil utilização para a quantificação de fenômenos biológicos, sendo possível sugerir este meio para a realização de avaliações quantitativas em experimentos biológicos.

OBJECTIVE: To determine if the AutoCAD 2004 program is available to be used in quantitative research on electron microscopy. METHODS: A demonstrative of the AutoCAD2004 was done in an experimental model of diabetes induced in rats. The animals were divided by lot in control group animals (GC-10 animals) and diabetic group (GD - 10 animals), evaluated 1 month after the diabetes induction. The eyes were removed after sacrifice and prepared to electron microscopy. The retina was photographed and the AutoCAD2004 program was used to measure the basal membrane of retina vessels. The results were submitted to statistical analysis. RESULTS: The AutoCAD2004 was effective to obtain quantitative measures from the basal membrane of retina vessels and there were no difference between the studied groups. CONCLUSION: The AutoCAD2004 was effective, safe and easy to apply to quantify biological parameters, which allowed suggest it to quantitative research.

Atividade física e metabolismo de proteínas em músculo de ratos diabéticos experimentais / Physical activity and protein metabolism in muscle from experimental diabetic rats

O objetivo deste trabalho foi investigar a influência do exercício físico crônico sobre o metabolismo das proteínas em organismos com deficiência de insulina, utilizando o modelo do "Diabetes Mellitus" experimental em ratos. Foram utilizados ratos machos adultos Wistar, distribuídos em Controle Sedentário (CS), Controle Treinado (CT), Diabético Sedentário (DS) e Diabético Treinado (DT). O diabetes foi induzido por aloxana (30 mg/kg p.c.-i.v.). O treinamento consistiu de nataçäo com sobrecarga equivalente a 2 porcento do peso corporal, a 32 mais ou menos 1 §C, 1h/dia, cinco dias/semana, durante quatro semanas. Ao final do experimento os ratos foram sacrificados por decapitaçäo com coleta de sangue para dosagem de glicose, insulina e hormônio de crescimento (GH) e tecidos para análise de glicogênio, proteínas totais e DNA. O diabetes induziu diminuiçäo nos níveis circulantes de GH (CS = 2,5 mais ou menos 0,3; DS = 1,2 mais ou menos 0,1 ng/ml), nas reservas de glicogênio hepático (CS = 7,4 mais ou menos 0,4; DS = 4,4 mais ou menos 2,6 mg porcento) e muscular (CS = 0,57 mais ou menos 0,03; DS = 0,63 mais ou menos 0,01 mg porcento) no teor de proteínas (CS = 7,16 mais ou menos 1,23; DS = 6,65 mais ou menos 1,0 mg porcento)...

Efecto de la helonías dioica en la glicemia, consumo de alimentos y H2O y peso en ratas diabéticas y sanas / Effects of helonias dioica on serum glucose levels, weight, water and food ingestion in normal and diabetic rats

Se estudió en forma experimental el efecto de la helonías dioica como fármaco hipoglicemiante en 20 ratas de la cepa Wister con diabetes inducida. La diabetes se indujo con aloxano administrado por vía endovenosa femoral y en dosis de 40 mgr por kilogramo. Estos animales se compararon con un grupo control de 20 ratas. El estudio duró 28 días, controlándose diariamente glicemia y consumo de alimento y de agua. El control de peso lo realizó día de por medio, siempre la misma persona. Las ratas diabéticas tuvieron un mayor consumo de agua al compararlas con las ratas sanas. Las ratas diabéticas tuvieron un mayor consumo de agua al compararlas con las ratas sanas. Se demostró un nivel menor de glicemia en las ratas diabéticas en tratamiento con helonías que en las diabéticas, que sólo recibieron solución fisiológica. La helonías dioica podría tener un efecto en los niveles plasmáticos de glucosa, pero se requiere mayor investigación al respecto

Avaliaçäo funcional do transplante pancreato-duodenal no rato diabético: estudo clínico, laboratorial, anatomopatológico e imunohistoquímico / Functional evaluation of pancreato-duodenal transplantation: clinic, laboratorial, anatomopathologic and imunohistochemical study

Com o objetivo de efetuar uma avaliaçäo funcional do transplante Pancreato-Duodenal no rato com Diabetes, induzido pela administraçäo endovenosa de Aloxana a 2 por cento, realizamos estudo clínico, laboratorial, anatomopatológico e imunohistoquímico, empregando animais alogênicos distribuídos por sorteio nos seguintes grupos experimentais: G1 - Grupo Controle Normal: constituído de 10 animais sadios, näo diabéticos; G2 - Grupo Controle Diabético: formado por 10 animais diabéticos, sem qualquer tipo de tratamento; G3: Grupo Transplante Pancreato-Duodenal: formado por 25 animais diabéticos, submetidos ao Transplante Pancreato-Duodenal Heterotópico e imunossuprimidos com Ciclosporina A, na dose de 10 mg/kg de peso corporal, administrada por via intraperitoneal. No período de seguimento de 30 dias, foram realizados 6 momentos de avaliaçäo, onde estudou-se os seguintes parâmetros: Evoluçäo Clínica (peso, ingestäo hídrica, ingestäo alimentar e diurese); Exames Bioquímicos (glicemia de jejum, glicose urinária, glicosúria e cetonúria); Avaliaçäo Funcional do Pâncreas pela Dosagem Hormonal (dosagens de insulina e glucagon); Exame Anatomopatológico (necrópsia e histopatologia) e Avaliaçäo Funcional do Pâncreas pela Imunohistoquímica (detecçäo de insulina, glucagon e somatostatina no tecido pancreático). A injeçäo de Aloxana a 2 por cento na via endovenosa do rato acompanhou-se de um índice de mortalidade de 38,8 por cento, tendo produzido Diabetes grave em 41,2 por cento dos animais. O Diabetes foi caracterizado por queda progressiva do peso corporal, elevaçäo substancial da ingestäo hídrica, ingestäo alimentar e da diurese, acompanhada de valores glicêmicos acima de 200 mg por cento, glicose urinária igual ou superior a 3000 mg por cento, glicosúria (+++), cetonúria eventual, queda significativa dos níveis plasmáticos da insulina e elevaçäo do glucagon plasmático. Do ponto de vista anatomopatológico, a droga determinou lesäo ocular, predominantemente das células beta do pâncreas, evidenciada por reduçäo drástica em sua massa celular, atrofia e/ou vacuolizaçäo. Ao estudo imunohistoquímico, a insulina näo foi detectada no tecido pancreático, ou esteve focalmente positiva no interior de algumas células beta. As células alfa (glucagon positivas) e as delta (somatostatina positivas) mantiveram-se preservadas. Nos animais transplantados observamos, após Transplante Pancreato-Duodenal Vascularizado, reversäo completa do quadro metabólico apresentado pelo rato...