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1.
Invest. clín ; 54(3): 257-269, sep. 2013. ilus
Article in English | LILACS | ID: lil-740324

ABSTRACT

Neuregulins (NRG) are proteins that belong to the family of epidermal growth factors. It is well established that these factors are essential for the development and maintenance of the nervous system. Due to the difficulty of purifying enough quantities of these factors and the lack of specificity from commercially available antibodies, the aim of this work was to produce antibodies against a synthetic peptide capable to detect and identify neuregulin GGFb isoforms. To accomplish this goal, polyclonal antibodies were raised in hens against a synthetic peptide designed from the GGFb1 extracellular sequence. The sequence analysis was made using different epitope-predicting programs. Our results showed that the peptide sequence selected was immunogenic because it was capable of inducing a specific type B immune response in the experimental animal model. These antibodies were also capable of recognizing a recombinant GGF protein and GGF isoforms present in different samples. Our results suggest that the development of immunoglobulin Y (IgY) using synthetic peptides represents, a valuable tool for neuroscience research.


Las Neuregulinas (NRG) son proteínas que pertenecen a la familia de los factores de crecimiento epidermal. Se ha demostrado que estos factores son esenciales para el desarrollo y mantenimiento de la funcionalidad del sistema nervioso. Debido a la dificultad para purificar estas proteínas y la falta de especificidad de los anticuerpos disponibles comercialmente, el objetivo de este trabajo fue producir anticuerpos contra un péptido sintético capaz de detectar e identificar una isoforma de la Neuregulina (GGFb). Para lograr este objetivo, se desarrollaron anticuerpos en gallinas (IgY) contra un péptido sintético diseñado a partir de la secuencia aminoacídica de la región extracelular de GGFb, utilizando programas de predicción de epítopes. Los resultados demuestran que el péptido seleccionado fue immunogénico debido a que estimuló una respuesta inmune específica tipo B en el modelo utilizado. Estos anticuerpos fueron también capaces de reconocer una proteína recombinante e isoformas de GGF presentes en diferentes muestras biológicas. Nuestros resultados demuestran el potencial valor de las inmunoglobulinas Y (IgY) contra péptidos sintéticos como una herramienta de aplicación para la investigación en neurociencia.


Subject(s)
Animals , Female , Rats , Antibodies, Heterophile/immunology , Chickens/immunology , Immunoglobulins/immunology , Neuregulin-1/immunology , Peptide Fragments/immunology , Antibody Specificity , Antibodies, Heterophile/biosynthesis , Antibodies, Heterophile/isolation & purification , Cells, Cultured , Culture Media, Conditioned , Electrophoresis, Polyacrylamide Gel , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Epitopes/immunology , Immunoblotting , Immunoglobulins/biosynthesis , Immunoglobulins/isolation & purification , Neuregulin-1/analysis , Peptide Fragments/chemical synthesis , Protein Isoforms/analysis , Protein Isoforms/immunology , Rats, Sprague-Dawley , Recombinant Proteins/immunology , Schwann Cells/immunology , Schwann Cells/metabolism , Sciatic Nerve/cytology
3.
Vet. Méx ; 26(3): 215-8, jul.-sept. 1995. tab
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-173894

ABSTRACT

Se realizó la adecuación de la técnica de gradientes discontinuos de Ficoll-Hypaque, para la obtención de monocitos y heterófilos aviares puros y viables a partir sangre completa de pollos sanos de entre 8 y 9 semanas de edad. Al final de 10 repeticiones la cuenta total de monocitos obtenida fue de 0.25 X 10 6 a 0.46 X 10 6 por ml, con un porcentaje promedio de viabilidad y pureza de 97.65 ñ 1 para la primera y 95.17 ñ 0.97 para la segunda. La cuenta total de heterófilos fue de 0.41 X 10 6 a 1.15 X 10 6 por ml, con un porcentaje promedio de viabilidad y pureza de 99.4 ñ 0.4 para la primera y 96.77 ñ 1.88 para la segunda. Mediante esta técnica se pueden obtener monocitos y heterófilos viables, puros y cultivos in vitro para determinar mecanismos de quimiotaxis, fagocitosis y lisis contra bacterias


Subject(s)
Animals , Phagocytes/cytology , Phagocytosis/physiology , Bird Diseases/prevention & control , Birds/immunology , Chickens/blood , Blood Chemical Analysis/veterinary , Antibodies, Heterophile/isolation & purification , Centrifugation, Density Gradient/veterinary
4.
Rev. chil. infectol ; 11(3): 156-62, 1994. tab
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-207318

ABSTRACT

Se realizó un estudio comparativo, retrospectivo entre las técnicas de Paul Bunnel Davidsohn y la de inmunofluorescencia para la pesquisa de anticuerpos específicos contra el virus de Epstein-Barr. Se analizaron 44 sueros de pacientes (18 hombres y 26 mujeres) menores de 30 años, enviados al Instituto de Salud Pública con el diagnóstico de mononucleosis infecciosa. Se detectaron 11 casos (+) para MNI, 9 de los cuales coincidieron por ambas técnicas. Un caso fue (+) solo por IFI y otro solo por PBD. Los (+) por IFI presentaron: IgG VCA (+), IgM VCA (+) y EBNA (-), los Ac anti early demostraron ser inespecíficos en el diagnóstico de esta enfermedad. Este trabajo demuestra que el PBD sigue siendo una buena alternativa para el diagnóstico de MNI y que bastaría realizar IgM VCA y EBNA para efectuar este mismo diagnóstico por la técnica de IFI. La detección de Ac específicos debiera realizarse de rutina en niños menores y cuando se desee conocer el estado inmune de un individuo al VEB


Subject(s)
Humans , Male , Female , Infant , Child, Preschool , Adolescent , Adult , Antibodies, Heterophile/isolation & purification , Infectious Mononucleosis/immunology , Fatigue Syndrome, Chronic/epidemiology , Antibodies, Bispecific/analysis , Herpesvirus 4, Human/isolation & purification
5.
Indian J Pathol Microbiol ; 1992 Apr; 35(2): 103-7
Article in English | IMSEAR | ID: sea-74026

ABSTRACT

Serological findings in five cases where Paul-Bunnel Davidsohn (PBD) test results were misleading, are presented. Three patients' with Chronic renal disorder and positive PBD test had specific serology results, signifying Cyto Megalo Virus infection. A fourth patient with Hepatitis B Virus infection also had positive PBD test. Forssman type of antibody response was demonstrable in a boy with recent Epstein-Barr virus infection and high Cyto Megalo Virus antibody titres.


Subject(s)
Adult , Antibodies, Heterophile/isolation & purification , Child , Cytomegalovirus Infections/diagnosis , Diagnostic Errors , Female , Humans , Male
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