Determinación y caracterización de antígenos de cisticercus de T. solium, reconocidos por líquidos cefalorraquídeos de pacientes con neurocisticercosis / Determination and characterization of T. solium cysticercus antigens, recognized by cerebrospinal fluid from neurocysticercosis patients

La cisticercosis humana es una parasitosis causada por T. solium la cual posee una alta prevalencia en aíses en desarrollo constituyéndose en un problema de salud pública, y en donde la neurocisticosis (NCC) es su forma más grave ya que compromete el sistema nervioso central (SNC). Debido a que las técnicas desarrolladas para el inmunodiagnóstico de NCC presentan problemas de sensibilidad y especificidad, en éste estudio se desarrollo un método analítico sensible para la identificación de antígenos específicos de cisticerco de T. solium reconocidos por líquidos cefalorraquídeos (LCRs) de pacientes con (NCC). La identificación de un número definido de antígenos de T. solium potenciales para el inmunodiagnóstico permitiría posteriormente la purificación de proteínas para el desarrollo de técnicas inmunodiagnósticas. Los antígenos presentes en LIV de cisticerco, fueron modificados químicamente empleando Biotina-NHS (Biotin-Amido-Caproato-N-hidroxisuccinimida éster) seguido por una inmunoprecipitación utiliando LCR. Los complejos antígeno-anticuerpo fueron capturados empleando agarosa anti IgG humana y posteriormente, las proteínas resueltas por electroforesis, seguida de transferencia a papel de nitrocelulosa. Los antígenos biotinilados, fueron reconocidos utilizando estreptavidina conjugada a fosfatasa alcalina y la reacción se visualizó empleando el sustrato NBT (nitro blue tetrazolium) y BCIP (4-cloro-5-bromo-4cloro-3-indolyl phospahate) (Sigma). Se identificaron 5 polipeptidos principales de 100 kDa, 70 kDa, 50 kDa, 35 kDa y 24 kDa por el ensayo de inmunoprecipitación. Los polipéptidos de 100 kDa, 50 kDa y 24 kDa dueron reconocidos por LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC (94 por ciento, 94 por ciento y 78 por ciento respectivamente), además éstos antígenos fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías de SNC (94 por ciento, 76 por ciento y 47 por ciento respectivamente) e igualmente por LCRs de pacientes sospechosos clínicamente pero serológicamente negativos por ELISA para NCC (21 por ciento, 24 por ciento, y 13 por ciento respectivamente). Los antígenos de 70 kDa fueron reconocidos por el 86 por ciento y 90 por ciento respectivamente, de los LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC. Estos antígenos no fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías del SNC. Sin embargo,...

Efecto inmunomodulador del Aloe Barbadensis en el paciente quirúrgico grave / Immunodulating effect of Aloe Barbadensis in the critically ill surgical patient

Se estudiaron 32 pacientes quirúrgicos graves, internados en los servicios de urgencia del Instituto Superior de Medicina Militar "Dr. Luis Díaz Soto" clasificados por la escala de sepsis APACHE II. Se comprobó el grado de inmunosupresión mediante el test de rosetas activas y espontáneas, inmunocomplejos circulantes; cuantificación de inmunoglobulinas G, M y A y dosificación del tercer componente del complemento (C3). Se impuso el tratamiento con extracto inyectable de aloe barbadensis y se valoró su carácter inmunomodular con dosis de 3 mg, cada 8 horas durante 7 días y cada 12 horas hasta el día 14, por vía intramuscular. El test de rosetas activas y espontáneas y la cuantificación de la fracción (C3) del complemento, que inicialmente se encontraban por debajo de las cifras normales, mostraron un aumento de forma significativa a los 7 y 14 días. Los niveles de inmunocomplejos circulantes elevados disminuyeron a medida que trasncurrían los días. El ascenso de IgG fue estadísticamente significativo al comparar sus niveles al inicio del tratamiento y a los 14 días. El Aloe barbadensis parece ejercer efecto inmunoestimulante en el paciente quirúrgico grave

Role of immune complexes from patients with different clinical forms of Schistosomiasis in the modulation of in vitro granuloma reaction

Schistosomiasis is a disease whose pathology is strongly related to the granulomatous reaction formed around parasite eggs trapped in host tissues. Studies have shown that the chronic intestinal form (INT) of the infection is associated with a variety of immunoregulatory mechanisms which lead to a diminished granulomatous reaction. Using an in vitro model of granuloma reaction, we show that immune complexes (IC) isolated from sera of INT patients are able to reduce granulomatous reaction developed by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from acute (AC), INT and hepatosplenic (HE) patients to soluble egg antigen (SEA)-conjugated polyacrylamide beads (PB-SEA). This inhibitory activity is also observed in cell proliferation assay of PBMC from INT and HE patients stimulated with SEA and adult worm antigen (SWAP). Furthermore, IC isolated from sera of patients with different clinical forms of the disease are also able to suppress INT patients PBMC reactivity. Therefore, our results show that circulating IC present in sera of patients with different clinical forms of schistosomiasis may down-regulate PBMC reactivity to parasite antigens resulting in a diminished granuloma reaction to parasite eggs.

Aislamiento y caracterización de complejos inmunes asociados a tumores malignos y a lepra / Isolation and characterization of immune complexes associated with malignant tumors and leprosy

Hemos estudiado los complejos inmunes circulantes (CIC) asociados a diversas enfermedades tales como neoplasias malignas, lepra y artritis reumatoidea. Se realizó la detección de CIC empleando diferentes técnicas: test de combinación a 125I-Clq, a IgG radioactiva, a conglutinina bovina marcada, test de aglutinación de plaquetas y precipitado en polietilen glicol 3,5% y 2,5%. Posteriormente, se desarrollaron técnicas de asislamiento y separación de los CIC para la obtención de sus fracciones constituyentes en ciertos tumores malignos y en lepra, basadas en la afinidad de los CIC por proteína A y en la acción de diferentes buffers. Estos métodos se aplicaron previamente a complejos inmunes preparados in vitro (BSA-aBSA, OVA-aOVA, etc.). El análisis de las fracciones se realizó por SDS-PAGE, inmunoelectroforesis, inmunoblotting, etc. Los resultados fueron los siguientes: se observó una elevada incidencia de niveles de CIC positivos coincidentes con los estadios de actividad clínica, disminuyendo en la remisión. Así mismo en algunos grupos de pacientes los hallazgos de CIC permitieron evaluar la eficacia terapéutica. Con el desarrollo de técnicas de separación de CIC se obtuvieron fracciones inmunológicamente activas provenientes de los CIC aislados del suero de pacientes portadores de tumores malignos, especialmente del tubo digestivo y de mama y posteriormente en el suero de individuos con lepra. Los resultados obtenidos hasta la fecha han demostrado la utilidad clínica de los estudios...