A rapid, reliable method of evaluating growth and viability of intraerythrocytic protozoan hemoparasites using fluorescence flow cytometry

Fluorescence flow cytometry was employed to assess the potential of a vital dye, hydroethiedine, for use in the detection and monitoring of the viability of hemoparasites in infected erythrocytes, using Babesia bovis as a model parasite. The studies demonstrated that hydroethidine is taken up by B. bovis and metabolically converted to the DNA binding fluorochrone, ethidium. Following uptake of the dye, erythrocytes contamine viable parasites were readily distinguished and quantitated. Timed studies with the parasiticidal drug, Ganaseg, showed that it is possible to use the fluorochrome assay to monitor the effects of the drug on the rate of replication and viability of B. bovis in culture. The assay provides a rapid method for evaluation of the in vitro effect of drugs on hemoparasites and for analysis of the effect of various components of the immune response, such as lymphokines, monocyte products, antibodies, and effector cells (T, NK, LAK, ADCC) on the growth and viability of intraerythrocytic parasites

Infección natural por Babesia bovis y Babesia bigemina en dos rodeos bovinos con diferentes niveles de infectación por Boophilus microplus / Natural infection with babesia bovis and babesia bigemia in two herds different levels of infectation by boophylus microplus

Se realizó un estudio longitudinal de la evolución de la tasa de infección por Babesia bovis y Babesia bigemina y de la infestación por Boophilus microplus en terneros pertenecientes a dos establecimientos lecheros (A y B), situados en un área enzoótica de babesiosis. El estudio se inició desde el nacimiento de los animales, marzo-agosto 1985, hasta marzo de 1986. La tasa de infección se estimó por: a) tasa de parasitemia en extendidos de sangre teñidos con Giemsa y b) tasa de reactores serológicos, mediante la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Para cuantificar la infestación por Boophilus microplus se determinó la presencia de los diversos estados de la garrapata y se efectuaron cuentas de hembras de 4.5 a 8.0mm de longitud. Se observaron infecciones por Babesia bovis y Babesia bigemina en el establecimiento A pero no en el B; la primera detección de ambos protozoarios se verificó a los 31 días de vida, aunque más de la mitad de los terneros se infectó después de los 200 días. La máxima tasa de parasitemia, 75% para Babesia bovis y 50% para Babesia bigemina, se comprobó en el mes de enero. Se destactaron anticuerpos colastrales contra Babesia bovisy Babesia bigemina en el 95% y 100% de los terneros del establecimiento A y 56% y 69% de los dle B, respectivamente, durante la primera semana de vida. La persistencia de los anticuerpos calostrales Babesia bovis y Babesia bigemina calculada en el establecimiento B, fue término medio de 67 días entre 26-101) y 70 días (entre 21-121), respetivamente. En el establecimiento A se constató seroconversión positiva postinfección por ambas Babesia en el 100% de los terneros al culminar el estudio. En el establecimiento B no se registró sero-conversión en concordancia con la ausencia de parasitemia. Boophilus microplus estuvo presente durante todo el año en el establecimiento A, con picos de infestación de 100% y 95% de terneros parasitados en octubre y enero, respectivamente. En el establecimiento B se observó sólo en diciembre y enero con un máximo de 50% de terneros parasitados. Las infestaciones más altas por Boophilus microplus fueron de 18 y 0.3 garrapatas por vacuno/2 en los establecimientos A y B, respectivamente. Se discuten las causas de las diferentes tasas de infección en relación a la carga de garrapatas y al manejo de los bovinos