Auxiliary tools in tuberculosis: The hemolysis in pleural fluids underestimate the values of adenosine deaminase activity determined by the method of Giusti / La hemólisis en los fluidos pleurales subestima los valores de actividad de adenosina desaminasa determinados por el método de Giusti

The increase of adenosine deaminase (ADA) activity in pleural fluids (PF) is considered a useful tool in the diagnosis of pleural tuberculosis. It is known that numerous photometric methods are interfered by the hemolysis, as a result, hemolyzed specimens -or with blood- received in the laboratory are frequently rejected. In order to establish if the values of ADA were affected by the hemolysis or blood, ADA was determined in individual and pooled PF samples with the aggregate of erythrocyte lysate (H) or hemolyzed whole blood (HWB) from 312 mg/l to 12 g/l (final concentrations of hemoglobin in the samples), and plasma in appropriate dilutions. Negative interferences were caused by the H and HWB, starting already of 500 mg/l with relative errors until 50% in some cases, depending on the ADA activity. Increments of hemoglobin increased the negative interference. The aggregate of plasma increased slightly the ADA activity although it was insufficient for neutralize the negative effect of hemolysis. The clinical significance of the negative interference is in relation to the amount of hemoglobin present in the sample and the ADA activity. Near the cutoff (40 U/l) this interference can lead to discard erroneously the diagnosis of pleural tuberculosis.

El aumento de la adenosina desaminasa (ADA) en los líquidos pleurales (LP) es considerado una herramienta útil para el diagnóstico de la tuberculosis pleural. Se sabe que numerosos métodos fotométricos son interferidos por la hemólisis, y que muestras hemolisadas o con sangre son frecuentemente rechazadas por el laboratorio. Procuramos establecer si la hemólisis o la presencia de sangre interfieren en la determinación de ADA. Se determinó la ADA en muestras individuales y en mezclas de muestras de LP luego del agregado de lisado eritrocitario o sangre hemolisada, desde 312 mg/l hasta 12 g/l (concentraciones finales de hemoglobina en las muestras), y de plasma en diluciones adecuadas. El lisado eritrocitario y la sangre hemolisada interfirieron negativamente a partir de los 500 mg/l de hemoglobina, con errores relativos de hasta un 50% en algunos casos. El incremento de hemoglobina aumentó la interferencia negativa. El agregado de plasma aumentó levemente los valores de ADA, aunque fue insuficiente para neutralizar el efecto negativo de la hemólisis. La significación clínica de la interferencia negativa está relacionada con la cantidad de hemoglobina presente en la muestra y su actividad de ADA. Cerca del punto de corte (40 U/l), la interferencia negativa de la hemólisis puede conducir a descartar erróneamente el diagnóstico de tuberculosis pleural.

Actividad sialidasa en mujeres con vaginosis bacteriana / Sialidase activity in women with bacterial vaginosis

La vaginosis bacteriana (VB) es un síndrome caracterizado por el sobrecrecimiento bacteriano deflora endógena Gram negativa, que desplaza a la flora lactobacilar normal. Dentro de las enzimasbacterianas, las sialidasas han sido consideradas factores de virulencia de muchos microorganismos patógenosque colonizan las distintas mucosas. Su presencia en fluidos vaginales puede estar correlacionada con VB. Elpropósito de este estudio fue comprobar la actividad de dicha enzima en mujeres con este síndrome y sin evidenciaclínica de infección genital. Se estudiaron 112 mujeres (51 fueron pacientes con VB y 61 mujeres conflora colonizante habitual). Para la cuantificación de la actividad sialidasa se empleó la técnica basada en lahidrólisis enzimática de un derivado ácido del ácido metoxifenil acetil murámico. En la población estudiada seencontró que ambos grupos mostraron valores comprendidos entre 0.5 a 5.1 nmoles de metoxifenol, mientrasque 11 de 52 pacientes con VB (21.17%), registraron valores superiores a 5.1 nmoles. La presencia de actividadsialidasa solamente no es índice de VB, excepto para valores mayores de 5.5 nmoles de metoxifenol, producidosen la reacción enzimática.

Bacterial vaginosis (VB) is a syndromecharacterized by overgrowth of endogenous Gram negative bacterial flora and the lack of the normalflora. Within bacterial enzymes, sialidases have been considered a virulence factor of many pathogenic microorganismscolonizing the different mucous membranes. Their presence in vaginal discharges can be correlatedwith VB. The aim of this study was to detect the activity of this enzyme in women with this syndrome andwithout clinical evidence of genital infection. Out of a total 112 women studied, 51 were patients with VB andthe other 61 women presented normal vaginal flora. For the quantification of enzyme activity, the technique basedon the enzymatic hydrolysis of a derivative acid of the acetyl metoxifenil muramic acid was used. In the studiedpopulation both groups shared values from 0.5 to 5.1 nmoles of metoxifenol, whereas only 11 out of 52 patientswith VB (21.17%), registered more than 5.1 nmoles. The presence of sialidase activity is not enough to confirmVB, except for values greater than 5.5 nmoles of the metoxifenol produced in the enzymatic reaction.