Primary embryonic cells of Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense ticks as a substrate for the development of Borrelia burgdorferi (strain G39/40) / Células primárias embrionárias do carrapato Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense como substrato para desenvolvimento de Borrelia burgdorferi (Cepa G39/40)

Borrelia burgdorferi, the agent of Lyme borreliosis, is a spirochetes transmitted by ticks to humans and animals. Its cultivation in vitro in tick cells allows studies of its biology and provides methodology for future research in Brazil, and for the isolation of Borrelia spp. We examined in vitro the characteristics of embryonic cells of Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense in cell culture and investigated the suitability of embryonic cells as a substrate for cultivation of B. burgdorferi. Subcultures were prepared from primary cultures of embrionary cells of R. microplus and A. cajennense maintained in Leibovitz's (L-15) complete medium at 28 ºC and 31 ºC, respectively. When a monolayer had formed, the L-15 was replaced with Barbour-Stoener-Kelly medium for experiments to infect cell cultures with B. burgdorferi. After 72 hours of cultivation, the spirochetes were counted using an inverted phase contrast microscope and dark-field illumination (400×). Survival, multiplication and the adherence of B. burgdorferi for embryonic cells of R. microplus and A. cajennense were observed. B. burgdorferi cultured with embryonic cells of R. microplus grew on average to a density (final count) of 2.4 × 10(7) spirochetes/mL, whereas in cell-free culture, an average of 2.5 × 10(7) spirochetes/mL were counted. When cultivated with A. cajennense cells, the final count of spirochetes was on average 1.7 × 10(7) spirochetes/mL, while spirochetes cultured under cell-free conditions replicated on average of 2.2 × 10(7) spirochetes/mL. Similar results were observed in the final count of Spirochetes cultivated in cells of R. microplus and A. cajennense, when compared with cell-free control. These results demonstrated that cells of R. microplus and A. cajennense have the potential to be used as growth substrate for B. burgdorferi in the study of its interaction with host cells.

Borrelia burgodorferi, o agente da borreliose de Lyme, é uma espiroqueta transmitida por carrapatos aos seres humanos e animais. Seu cultivo in vitro em células de carrapato permite estudos de sua biologia e propicia metodologia para futuras pesquisas no Brasil, para o isolamento de Borrelia spp. Nós examinamos in vitro as características de células embrionárias de Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense, e a viabilidade de utilização dessas células embrionárias como um substrato para cultivo de B.burgdorferi. Subculturas foram preparadas a partir de culturas primárias de células embrionárias de R. microplus e A. cajennense mantidas em meio Leibovitz's (L-15) completo, a 28 ºC e 31 ºC, respectivamente. Com a formação da monocamada, o L-15 foi substituído pelo meio Barbour-Stoener-Kelly, para o experimento de infecção com B. burgdorferi nas culturas de células. Após 72 horas de cultivo, realizou-se a contagem das espiroquetas, as quais foram avaliadas sob microscópio invertido de contraste de fase e campo escuro (400×). Verificou-se a sobrevivência, a multiplicação e a aderência de B. burgdorferi em células embrionárias de R. microplus e A. cajennense. No estudo da cultura de B. burgdorferi com células embrionárias de R. microplus, observou-se, na contagem final, média de 2,4 × 10(7) espiroquetas/mL; no cultivo livre de células, verificou-se média de 2,5 × 10(7) espiroquetas/mL. No cultivo de A. cajennense, a contagem final de espiroquetas foi, em média, 1,7 × 10(7) espiroquetas/mL, enquanto que, para as cultivadas livres de células, se verificou média de 2,2 × 10(7) espiroquetas/mL. Resultado semelhante foi observado na contagem final de espiroquetas cultivadas em células de R. microplus e A. cajennense, quando comparado com o controle livre de células. Estes resultados demonstraram que células de R. microplus e A. cajennense têm o potencial para serem utilizadas como substrato para o crescimento de B. burgdorferi no estudo da interação com as células do hospedeiro.

Enfermedad de lyme y su espectro expandido

La enfermedad de Lyme se puede manifestar por compromiso de diferentes órganos incluyendo la piel, el sistema nervioso central y el sistema musculoesquelético. Reportamos los casos de seis niños entre los seis y los 15 años de edad, vistos en una única institución,quienes ilustran las variadas manifestaciones de la enfermedad en sus fases aguda y crónica y las dificultades en su diagnóstico diferencial. En cuatro casos, la entidad fue adquirida en el Reino Unido, y en dos en países diferentes el diagnóstico y tratamiento de los pacientes con una forma de presentación aguda y sintomatología típica es relativamente fácil, pero la presencia de manifestaciones atípicas y curso crónico de la enfermedad en niños puede presentar retos considerables al clínico

La enfermedad de lyme

La enfermedad de Lyme es una borreliosis transmitida por garrapatas del género ixodes que parece estar limitada a las zonas templadas, especialmente del hemisferio norte. En Norteamérica y Europa ha adquirido gran importancia clínica y epidemiológica desde 1975. Se caracteriza clínicamente por tres etapas sucesivas. En la temprana localización,se presenta eritema alrededor del sitio de picadura de la garrapata y puede haber síntomas constitucionales. En la temprana diseminada hay lesiones dermatológicas, síntomas constitucionales severos y manifestaciones neurológicas,articulares o cardíacas. En la etapa tardía hay alteraciones crónicas en articulaciones, piel o sistema nervioso. Usualmente los pacientes no presentan ni todas las etapas ni todos los síntomas. El diagnóstico se base más a menudo en hallazgos clínicos que en métodos de laboratorio, debido a la falta de reproducibilidad de estos últimos. En las etapas iniciales la enfermedad de Lyme responde bien a antibióticos: tetraciclinas (especialmente doxiciclina) y penicilinas. Puesto que actualmente no hay vacuna, la prevención consiste en evitar contacto con plantas que tengan ixodes, y en remover tales artrópodos de la ropa o la piel, lo más pronto posible

Alternative culture medium for isolation and growth of Borrelia burgdorferi

Borrelia burgdofer é uma spirochete que é agente causador de doenças infecciosas: Doença Lyme (LD). Muitos meios de cultura säo descritos para isolamento e crescimento desse agente. O autor descreve um meio alternativo de cultivar em laboratório o vírus do Lyme spirochetes