Treatment with some anti-inflammatory drugs reduces germ tube formation in Candida albicans strains

Candida albicans is an opportunistic dimorphic fungus that inhabits various host mucosal sites. It can cause both superficial and serious systemic disease. Conversion from the yeast to the hyphal form has been associated with increased virulence and mucosal invasiveness. The aim of this study was to investigate the effect of sodium diclofenac and aspirin on germs tube formation of different Candida albicans strains. Prostaglandins may play an important role in fungal colonization. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs are inhibitors of the cyclooxygenase isoenzymes. These drugs specifically block the biosynthesis of mammalian prostaglandins by inhibiting one or both of cyclooxygenase isoenzymes. In tests for germ tube formation sodium diclofenac reduced the filamentation to the 12.5%- 5.1%. In the presence of aspirin the filamentation was reduced up to 85-45% depending on the tested strain. Our results suggest that cyclooxygenase-depending synthesis of fungal prostaglandins is important for morphogenesis and fungal virulence. Inhibitors of cyclooxygenase isoensymes (aspirin and diclofenac) are effective in decreasing germ tube formation of Candida albicans.

Cell Viability of Candida albicans Against the Antifungal Activity of Thymol

Candida albicans is a commensal fungus, but circumstantially it may cause superficial infections of the mucous membranes, such as denture stomatitis, when a biofilm is formed on the surface of dental prostheses. This study evaluated the cell viability of C. albicans biofilms against the antifungal activity of thymol when compared with miconazole, by the fluorescence imaging using SYTO 9 and propidium iodide dyes, and counting of colony forming units. C. albicans standard strains (ATCC 11006) were used. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) of drugs were determined by broth microdilution tests and the inoculum was standardized to match 0.5 on the McFarland scale (106 cfu/mL). Biofilms were grown on the surface of acrylic resin disks in parallel flow chambers from Sabouraud broth supplemented with 10% dextrose. For counting of colony forming units, the fungal solution was sequentially diluted and plated in Sabouraud dextrose agar. Data were analyzed using two-way ANOVA and Tukey's test (a=5%). Biofilms treated with thymol and miconazole presented low numbers of viable cells at the evaluated exposure times. There was statistically significant difference (p<0.05) when compared with control, and the mean value of the exposure times between miconazole and thymol did not differ significantly (p>0.05). In conclusion, both drugs have similar efficiency as antifungal agents against biofilms of C. albicans formed on acrylic surfaces.

Candida albicans é um fungo comensal que circunstancialmente pode causar infecções superficiais das mucosas, como a estomatite protética, na qual o biofilme se forma sobre a superfície das próteses dentárias. Este estudo avaliou a viabilidade celular de biofilmes de C. albicans frente à ação antifúngica do timol em comparação com o miconazol por meio da técnica de fluorescência, empregando os corantes SYTO 9 e iodeto de propídio, e contagem das unidades formadoras de colônia. Utilizaram-se cepas de C. albicans (ATCC 11006). As concentrações inibitórias mínimas (CIM) e fungicidas mínimas (CFM) das drogas foram determinadas com testes de microdiluição em caldo, sendo o inóculo padronizado para corresponder a 0,5 da escala de McFarland (106 UFC/mL). Os biofilmes foram cultivados sobre a superfície de discos de resina acrílica, em células paralelas de fluxo, a partir de caldo Sabouraud suplementado com dextrose 10%. Para a contagem das unidades formadoras de colônia, as soluções fúngicas foram sequencialmente diluídas e semeadas em agar Sabouraud dextrose Os dados foram analisados por meio de estatística ANOVA A dois fatores e teste de Tukey (α = 5%). Biofilmes tratados com o timol e miconazol apresentaram baixos números percentuais de células viáveis nos tempos de exposição avaliados. Houve diferença estatística significante (p<0.05) em comparação com o controle, e o valor médio dos tempos de exposição entre miconazol e timol não diferiu estatisticamente (p>0.05). Concluindo, ambas as drogas possuem similar eficiência como agentes antifúngicos contra a viabilidade de biofilmes de C. albicans formados em superfícies de resinas acrílicas.

Interacción Candida albicans-Hospedero: un proceso complejo en el que la inmunidad innata juega un importante papel / Candida albicans-host interaction: a complex process in which the innate immunity play an important role

Candida albicans es una levadura comensal, que bajo ciertas circunstancia puede convertirse en patógeno. La capacidad de cambiar se forma constituye un factor de virulencia, permitiéndole a la levadura invadir y diseminarse. El sistema inmune innato es capaz de reconocer las diferentes morfologías de C. albicans activando receptores (PRRs) que reconocen PAMPs o patrones moleculares conservados. Las células inmunes más importantes son los macrófagos y los neutrófilos que desencadenan una respuesta efectora a través de la fagocitosis y la activación de estrés oxidativo contra C. albicans. Las células dendríticas, por su parte expresan la mayoría de los PRRs involucrados en el reconocimiento de C. albicans activando la secreción de citoquinas hacia una respuesta tipo TH1 (inducida por INF tipo1, IL-12, INFγ, ), Treg (inducida por TGFβ, IL-10) y TH17 (inducida por IL-23, IL6). Las células epiteliales no sólo constituyen una barrera física frente a la infección por C. albicans, sino son fundamentales en el reconocimiento primario de este microorganismo. Mediante una respuesta bifásica estas células activan diferencialmente, vías de transducción de señales que determinan que no se active una respuesta de citoquinas frente a la presencia de blastoconidios (forma comensal) y que se active frente a presencia de hifas (forma invasora). Por su parte, C. albicans es capaz de desarrollar mecanismos evasivos de la respuesta inmune. Esta compleja interacción y hongo-hospedero determina si el hospedero será capaz de eliminar a este microorganismo o si éste finalmente invadirá expresando su virulencia.

Candida albicans is a comensal microorganism that under certain circumstances is able to transform into a pathogen. This ability to switch constitute a virulence factor that C. albicans uses to invade and spread. The innate immune system recognize the different forms of C. albicans activating receptors (PRRs) that recognize PAMPs or conserved molecular patterns. The most important immune cells are macrophages and neutrophils that generate an effector response through phagocytosis and oxidative burst against C. albicans. Dendritic cells express the most of PRRs involved in the recognition of C. albicans activating the cytokines synthesis forward to a TH1 (induced by INF tipo1, IL-12, INFγ), Treg (induced by TGFβ, IL-10) y TH17 (induced by IL- 23, IL6) immune response. Epithelial cells not only constitute a physical barrier against C. albicans, but they are crucial in the first recognition of this microorganism. Through a biphasic response these cells differentially activate pathways that determine a no cytokine response when blastoconidia (commensal form) is present and an inflammatory response in presence of hyphae (pathogenic form). C. albicans develops immune evasive mechanism. This complex host-fungi interaction determines if the host will eradicate the infection or if this microorganism will invade the host, expressing it virulence.

Effect of alcohols on filamentation, growth, viability and biofilm development in Candida albicans

In this study we report the potential of alcohols as morphogenetic regulators in Candida albicans. All the alcohols tested influenced various modes of growth like planktonic as well as biofilm forms. Viability was affected at high concentrations. Among the alcohols, the response of C. albicans to amyl alcohol (pentanol) was noteworthy. Amyl alcohol at a concentration 0.5% which was not inhibitory to growth and viability specifically inhibited morphogenetic switching from yeast to hyphal forms. It also inhibited normal biofilm development favoring yeast dominated biofilms. Based on this study we hypothesize that alcohols produced under anaerobic conditions may not favor biofilm development and support dissemination of yeast cells. Since anaerobic conditions are not found to favor production of quorum sensing molecules like farnesol, the alcohols may play a role in morphogenetic regulation.

Cancer drugs inhibit morphogenesis in the human fungal pathogen, Candida albicans

Candida infections are very common in cancer patients and it is a common practice to prescribe antifungal antibiotics along with anticancer drugs. Yeast to hyphal form switching is considered to be important in invasive candidiasis. Targeting morphogenetic switching may be useful against invasive candidiasis. In this study, we report the antimorphogenetic properties of thirty cancer drugs.

Evaluación de diversos métodos fenotípicos para la diferenciación entre Candida dubliniensis y Candida albicans / Evaluation of diverse phenotypic methods for differenting between Candida dubliniensis and Candida albicans

Candida albicans y Candida dubliniensis presentan una estrecha relación filogenética. La similitud de estas especies puede hacer que en un laboratorio microbiológico se identifique en forma errónea C. dubliniensis como C. albicans. El objetivo de esta investigación fue evaluar diversos métodos fenotípicos para la diferenciación entre Candida dubliniensis y Candida albicans. Se utilizaron 6 cepas control de C. dubliniensis y una de C. albicans, provenientes de colecciones reconocidas y sometidas a genotipificación. También se utilizaron 70 aislados identificados como posibles C. albicans utilizando el medio CHROMagar Candida y el medio de bilis agar Feo. Los métodos evaluados fueron: agar Sabouraud dextrosa a 45°C, agar Sabouraud con NaCl al 6,5%, agar Tween 80, agar tabaco, agar Pal’s, agar tomate-zanahoria y aglutinación con partículas de látex (Bichro-Dubli Fumouze®). Encontramos que las técnicas más confiables para realizar la diferenciación fenotípica entre estas dos especies fueron: el agar tomate-zanahoria, el agar Pal’s, el agar tabaco y la aglutinación con partículas de látex (Bichro-Dubli Fumouze®). Además en este estudio, de los 70 aislados considerados como C. albicans, encontramos 1 (1.4%) posible Candida dubliniensis. Sin embargo, las pruebas de biología molecular son las más adecuadas para el diagnóstico certero de estas dos especies.

Candida albicans and Candida dubliniensis have a close phylogenetic relationship. The similarity between these species can cause a microbiology laboratory to identify C. dubliniensis erroneously as C. albicans. The objective of this research was to evaluate diverse phenotypic methods for differentiating between Candida dubliniensis and Candida albicans. Six control strains of C. dubliniensis and one of C. albicans from recognized collections were used and submitted to genotypification. Also, 70 isolates were used, identified as possible C. albicans utilizing CHROMagar Candida and bilis agar Feo mediums. The methods evaluated were: Sabouraud dextrosa agar at 45°C, Sabouraud agar with NaCl at 6.5%, Tween 80 agar, tobacco agar, Pal’s agar, tomato-carrot agar and agglutination with latex particles (Bichro-Dubli Fumouze®). It was found that the most reliable techniques for performing phenotype differentiation between these two species were tomato-carrot agar, Pal’s agar, tobacco agar and agglutination with latex particles (Bichro-Dubli Fumouze®). Of the 70 isolates considered to be C. albicans, one (1.4%) possible Candida dubliniensis was found. Nevertheless, molecular biology tests are the most appropriate means for achieving an accurate diagnosis of these two species.

Comparison of cell wall proteins in putative Candida albicans and Candida dubliniensis by using modified staining method and SDS PAGE

Candida species are among the most common causes of opportunistic fungal diseases. Among Candida species, Candida albicans is responsible for most infections. Having many strains, C. albicans is very polymorph. C. dubliniensis is very similar to albicans species both morphologically and physiologically. For an infection to occur, cell wall proteins play an important role as they enable yeast to adhere to host cells and begin pathogenesis. Therefore, we decided to extract these proteins and examine them through common molecular methods of protein analysis including SDS-PAGE. Initially cell wall proteins of two C. albicans strains [CBS 562 and PTCC6027] and one C. dubliniensis strain [CBS7987] were extracted by using a solution of beta-mercaptoethanol and ammonium carbonate. After dialysis against Tris-HCL buffer, SDS gel electrophoresis was performed on the proteins extract. Bands were then visualized by using three different staining methods among which one method provided improved detection. By using Coomassie Brilliant Blue staining method, proteins with molecular weight of 42, 66.2 and 200 kDa were detected. By using Silver staining method, proteins with molecular weight of 21.5, 28.5 and 37 kDa were detected. However, using combined Coomassie Brilliant Blue and Sliver staining method visualized more bands resulting in improved detection. To answer many existing questions about fungal diseases, fungi cell wall proteins are necessary to be examined. To commence such examinations, a simple step may be an SDS-PAGE performance on as many strains as possible. A combined staining method can enhance bands detection

Utiliad de la citología urinaria en el diagnóstico temprano de candidiasis urinaria en el recién nacido / Predictive value of urinary cytology in the diagnosis of urinary candidiasis in the newborn

Introducción. Objetivo: determinar la utilidad de la citología urinaria con tinción de Papanicolaou para el diagnóstico de candidiasis urinaria (CU) en un grupo de neonatos hospitalizados en una unidad de cuidados intensivos neonatales (UCIN). Material y métodos. Estudio abierto, prospectivo, longitudinal, comparativo y experimental. Se estudió un grupo de recién nacidos del Hospital General Dr. Manuel Gea González que fueron ingresados a la UCIN con factores de riesgo para candidiasis. Se analizaron las siguientes variables: edad gestacional, sexo, días de vida extrauterina al momento del diagnóstico y padecimientos concomitantes. A todos los pacientes se les realizó urocultivo, examen general de orina y citología urinaria con tinción de Papanicolaou buscando levaduras o Candida en orina al quinto, séptimo, noveno, décimo primero y décimo tercer día de vida. Se consideró el urocultivo positivo para Candida como estándar de oro y se determinó la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo del examen general de orina y la citología urinaria.Resultados. Se estudiaron 44 pacientes. Catorce de ellos (31.8 por ciento) tuvieron desarrollo de Candida albicans en el urocultivo, todos con datos clínicos sugestivos. En 20 pacientes (45.4 por ciento) se encontraron levaduras en el examen general de orina, pero sólo 8 coincidieron con urocultivo positivo, reportando una sensibilidad de 57.1 por ciento, y una especificidad de 60 por ciento, con valor predictivo positivo de 40 por ciento y valor predictivo negativo de 75 por ciento. En la citología urinaria 16 pacientes tuvieron hifas o esporas de Candida coincidiendo en 13 pacientes con urocultivo positivo, reportando una sensibilidad de 92.8 por ciento, una especificidad de 90 por ciento; con valor predictivo positivo de 81.25 por ciento y valor predictivo negativo de 96.42 por ciento. Conclusiones. En este estudio la citología urinaria con tinción de Papanicolaou tuvo una buena sensibilidad y especificidad para el diagnóstico temprano de CU en comparación con el examen general de orina. Candida albicans; candidiasis urinaria; citología urinaria; tinción de Papanicolaou.

Candida en muestras biológicas corporales / Candida in biological human samples

Las acciones por candida se han incrementado en las últimas décadas y los factores de riesgo, principalmente la inmunosupresión y los reportes de la candida no albicans, son determinantes el pronóstico de esta micosis. El propósito de este trabajo es la evaluación de las diferentes muestras biológicas positivas a levaduras, remitidas al servicio para identificar. Mediante un reporte preliminar, pretendemos establecer la prevalencia de C.albicans y Candida spp. en nuestros pacientes. El procesamiento de las diferentes muestras consistió en estudios micológicos directo, cultivos y coloraciones especiales, necesarias para la identificación. El aislamiento y la identificación de levaduras de género candida se realizó en 177 muestras biológicas corporales, remitidas al Laboratorio Clínico del Hospital Universitario de Maracaibo, entre octubre 1996 y octubre de 1998. Las 177 muestras estudiadas fueron positivas al directo en su totalidad y se correspondieron: 73 (41,24 por ciento) a C.albicans y 104 (58,75 por ciento) a Candida spp. De las muestras estudiadas, en 34 (19,21 por ciento) se observó la presencia de blastoconidias y pseudomicelios, correspondiendo 24 (70,5 por ciento) de ellas a C.albicans y 10 (29,5 por ciento) a Candida spp. Cuando se observaron al directo solamente blastoconidias, se identificaron 49 (34,2 por ciento) C.albicans y 94 (65,7 por ciento) Candida spp. C.albicans fue más frecuente en las zonas intertriginosas y en las muestras de esputo y lavado bronquial. Candida spp. por el contrario se aislaron con más frecuencia en uñas. La candidiasis es una de las infecciones más frecuentes diagnosticadas en el ambiente hospitalario, principalmente en pacientes inmunosuprimidos. Queda establecida la importancia del estudio micológico directo y determinación de pseudomicelio y/o blastoconidias como forma de establecer el diagnóstico y la prevalencia de candidiasis por las diferentes especies

Estudo clínico, laboratorial e terapêutico da candisose oral em pacientes com sistema imunológico deprimido pelo HIV / Clinical, laboratorial and therapeutical study of oral candidosis in HIV compromised patients

A Candidose oral é uma das infecçöes fúngicas mais freqüentes em pacientes HIV positivos e portadores da AIDS. Durante a infecçäo pelo HIV, o paciente apresenta inúmeros episódios de Candidose oral. Inicialmente, essa infecçäo apresenta-se localizada na mucosa oral, de forma assintomática e de pequena dimensäo, por fim torna-se invasiva, atingindo a mucosa do palato e regiäo orofaríngea e esofágica, e resiste freqüentemente aos antifúngicos usuais. Avaliou-se neste trabalho, a freqüência do aspecto clínico da Candidose oral, e concluíu-se que a forma pseudomembranosa é mais freqüente. Avaliou-se também, através de estudo microbiológico, o material removido da lesäo, para identificaçäo das espécies do fungo. Concluíu-se que a espécie mais freqüente é a C. albicans. Pediu-se exames complementares, para avaliar o perfil imunológico dos pacientes. Constatou-se que os pacientes apresentavam-se com o sistema imunológico deprimido pelo HIV. Avaliou-se ainda a eficácia do medicamento itraconazol. Constatou-se que foi de grande valia, na terapêutica das lesöes resistentes aos antifúngicos usuais

Recuperaçäo de Candida Albicans, C. Tropicalis, C. Guilliermondii e C. Krusei na cavidade bucal de ratos normais e sialodenectomizados / Candida albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii and C. krusei recovery in control and sialoadenectomized rats oral cavity

A permanência de Candida albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii e C. Krusei na cavidade bucal de ratos foi estudada em animais normais e sialoadenectomizados. Os ratos foram inoculados por 4 dias consecutivos com 10 leveduras, e após 1, 5, 15 e 30 dias da inoculaçäo foi feita a recuperaçäo das amostras da cavidade bucal dos animais. Em ambos os grupos, C. albicans foi isolada em maior quantidade em todos os períodos. C. guilliermondii, C. tropicalis e C. Krusei foram recuperadas em menor quantidade, näo sendo mais isoladas a partir do 5º dia após a inoculaçäo. A xerostomia facilitou a colonizaçäo de C. albicans, mas näo das outras espécies. Os dados obtidos no presente trabalho sugerem o envolvimento de fatores relacionados à C. albicans, que determinaram sua maior colonizaçäo na boca dos ratos, o que pode indicar seu maior grau de patogenicidade

Detección de Candida SP por medio de citologías vaginales / Detection of Candida SP by vaginal cytologies

En el período de 1989 a 1991, se efectuó una revisión sobre la presencia de Candida sp. en citologías vaginales, procesadas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital México de la CCSS, con la tinción de papanicolau. Se procesaron 76.794 citologías. De este total, 3.245 (4,22 por ciento ) presentaron infección por Candida sp. Se observó un importante incremento en el porcentaje de la infección: de un 2,8 por ciento en 1989, a un 6,8 por ciento en 1991. Este comportamiento se encuentra íntimamente asociado a la presencia de diversos factores predisponentes, los cuales favorecen que este hongo oportunista pase de un estado saprófito a un estado patógeno. Se hace énfasis en los diferentes estados morfológicos del hongo, los cuales permiten discernir entre su fase saprófita y su estado parasitario en el huésped afectado