Properties of catechol 1, 2 dioxygenase in the cell free extract and immobilized extract of Mycobacterium fortuitum

Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) are carcinogenic compounds which contaminate water and soil, and the enzymes can be used for bioremediation of these environments. This study aimed to evaluate some environmental conditions that affect the production and activity of the catechol 1,2-dioxygenase (C12O) by Mycobacterium fortuitum in the cell free and immobilized extract in sodium alginate. The bacterium was grown in mineral medium and LB broth containing 250 mg L-1 of anthracene (PAH). The optimum conditions of pH (4.0-9.0), temperature (5-70 ºC), reaction time (10-90 min) and the effect of ions in the enzyme activity were determined. The Mycobacterium cultivated in LB shown higher growth and the C12O activity was two-fold higher to that in the mineral medium. To both extracts the highest enzyme activity was at pH 8.0, however, the immobilized extract promoted the increase in the C12O activity in a pH range between 4.0 and 8.5. The immobilized extract increased the enzymatic activity time and showed the highest C12O activity at 45 ºC, 20 ºC higher than the greatest temperature in the cell free extract. The enzyme activity in both extracts was stimulated by Fe3+, Hg2+ and Mn2+ and inhibited by NH4+ and Cu2+, but the immobilization protected the enzyme against the deleterious effects of K+ and Mg2+ in tested concentrations. The catechol 1,2-dioxygenase of Mycobacterium fortuitum in the immobilized extract has greater stability to the variations of pH, temperature and reaction time, and show higher activity in presence of ions, comparing to the cell free extract

Bromato de potasio: un aditivo prohibido? / Potassium bromate: a banned additive?

El bromato de potasio es un aditivo que se agrega a la harina y actúa oxidando las proteínas del gluten, originando panes con mayor volúmen, mejor textura y estructura de la miga. Sin embargo, es altamente tóxico. En ratas y ratones produce tumores en riñón, tiroides y mesotelio peritoneal. Debido a ello la Unión Europea lo ha clasificado como tipo 2 (sospechoso cancerígeno para humanos). Durante el horneado de los panificados, el bromato se transforma en bromuro, inocuo. Pero ensayos realizados con métodos muy sensibles demuestran que, aún usado a niveles reconocidos como aceptables, queda siempre una parte sin modificar en el producto terminado. En éste país, la Resolución N§ 073/93 Mercosur-GMC incorporada al Código Alimentario Argentino estableció retirarlo de la Lista General Armonizada de Aditivos-Mercosur. Este trabajo se realizó con el objetivo de verificar el cumplimiento de la mencionada Resolución. Se analizaron 91 muestras de pan de 70 panaderías del Partido de General San Martín. La determinación cualitativa se realizó mediante el método colorimétrico de Ibáñez, con dicromato-fucsina, hallándose un 20 por ciento de muestras positivas. Evidentemente, a pesar de su prohibición , muchos panaderos siguen utilizándolo, dejando de lado los problemas de salud que puede ocasionar. Por ende, es necesario continuar con los programas de educación y control

Determinación de aflatoxina M1 en leche / Detection of aflatoxin M1 in milk samples

La presencia de micotoxinas en productos lácteos se debe, por lo general, a la ingesta por parte del ganado lechero de alimentos contaminados con aflatoxina B1 (AFB1). La AFM1 es el principal metabolito hepático 4-hidroxilado de la AFB1 que se excreta por la leche. Es tan tóxica como la AFB1, aunque algunos autores han demostrado que no es tan mutagénica. Recientemente se han clasificado a las AFB1 y AFM1 como carcinógenos humanos de la clase 1 y 2B respectivamente y también se ha observado que la AFM1 tiene una alta actividad genotóxica. El objetivo de este trabajo es determinar por TLC (cromatografía en capa delgada) la presencia de AFM1 en 50 muestras de leche, recolectadas en los meses de otoño, tanto de origen comercial como provenientes de pequeños tambos, donde se ordeñan artesanalmente, para estimar los niveles de exposición a la AFM1 en la población. No se detectó la presencia de AFM1 en ninguna de las muestras estudiadas hasta este momento. Esto muestra que en esta época del año, donde las vacas lecheras se alimentan de pasto natural, no existe contaminación. Seguiremos estudiando muestras recolectadas en los meses de invierno para controlar que sucede cuando además reciben suplemento alimentario. La leche es el alimento básico consumido sobre todo por niños en etapa de crecimiento; por lo tanto, debe ser monitoreada de contaminantes, incluyendo AFM1, más aún en países como el nuestro donde los factores climáticos pueden favorecer la incidencia de la misma. En nuestro país hay muy escasos datos de incidencia de AFM1 en la leche fluida, leche en polvo y en otros derivados lácteos. La dificultad para realizar estudios toxicológicos en humanos con la ingesta de AFM1 y la dificultad para la detoxificación de micotoxinas de las dietas hacen de los programas de monitoreo la principal estrategia para disminuir el riesgo de exposición a estas micotoxinas, por eso creemos que más estudios deberían efectuarse para intensificar los conocimientos acerca de toda nuestra producción lechera

A deteccao de substancias cancerígenas em bioensaios alternativos de média-duracao / The detection of chemical carcinogen in alternative medium-term biossays

Atualmente, o método standard para identificacao de substancias cancerígenas é teste de longa-duracao, con roedores. No Brasil nao há condicoes para a sua execucao, devido á inexistencia de especialistas e de infra-estructura adecuada. En consequencia, o país é dependente dos conhecimentos gerados no exterior sobre o risco que determinados compostos químicos impoem ás populacoes e ao meio ambiente. Além disto, as desvantagens operacionais de teste delonga-duiracao levaram ao desenvolvimento de bioensaios alternativos, mais convenientes. O Instituto Brasileiro de Meio Ambiente(IBAMA) adotou oficialmente o bioensaio de média-duracao para múltiplos orgaos, no rato, como fonte de evidencia do potencial cancerígeno de agentes químicos. Con isto, procura atender a demanda de substancias que precisam ser testadas no país, antes de colocadas no mercado e, ao mesmo tempo, aum,entar o know-how nacional em carcinogénese química e avaliacao de risco cancerígeno

Influencia de la contaminación atmosférica en la calidad de aire de interiores / Influence of outdoor pollution on indoor air quality

The influence of outdoor pollution on indoor air quality was studied in downtown Santiago (Bandera street). Carbon monoxide (CO), nicotine, particulate matter, respirable fraction (PM5) and total and carcinogenic polyaromatic hydrocarbons (PAHs) were simultaneously monitores indoors and outdoors and indoors in restaurants, offices and other places. The levels of CO changed simultaneously outdoors and indoors (r=0.89) specially during traffic rush hours, demonstrating the importance of outdoor infiltration into the indoor air quality and masking the contribution of other CO indoor sources. The maximun CO concentrations were over 800 percent and over 1000 percent higher indoors and outdoors respectively than the 9 ppm CO National Ambient Air Quality. The PM5 concentrations were very high and showed no significant differences (p>0.05) from indoor to outdoors, or between indoor levels in restaurants, offices and other places. Total ans carcinogenic PAHs levels were also very high, outdoors and indoors, outodoor levels being generally higher than those indoors and no significant; differences (p>0.05) were found for the indoor levels between restaurants, offices and other places. Nicotine levels showed significant differences (p<0.05) between indoor and outdoor levels. In addition, great differences (p<0.05) in indoor levels, were found between offices and restaurants, and offices and other places. Among indoor sources cigarrete smoke seems to be a minor source since nicotine concentrations, bieng 2.3 times higher in restaurants and other places than in offices, do not contribute to enhance significantly PM5 and total and carcinogenic HAPs in the first ones. These results suggest that in downtown Santiago, infiltration might be the main source of indoor pollution. This is supported by 2 evidences: a) coronene, a tracer of vehicle emissions was found in high concentraion indoors and b) in restaurants (in wich PAHs emissions might be higher indoor) a correlation coefficient of 0.987 for the indoor and outdoor concentrations of carcinogenic PAHs was found. Furthermore a survey asking for different symptoms and effects probably related to air pollution was made to people working in Bandera and in a rural area located 40 Km from Santiago. The results showed that excluding smoking as a confounded factor, people working in Bandera showed a significantly greater (p<0.05) risk of ill effects on their health than people working in the rural area