Validação de conjuntos diagnósticos comerciais para dosagem sérica de progesterona e estradiol em jaguatirica (Leopardus pardalis) e gato-do-matopequeno (Leopardus tigrinus / Progesterone and estradiol commercial kits validation in serum of ocelots (Leopardus pardalis) and tigrina (Leopardus tigrinus)

Este estudo teve como objetivo validar os conjuntos diagnósticos m comerciais DPC (Coat-A-Count - Diagnostic Products Corporation/USA), em fase sólida, para dosagem de progesterona e DSL (Diagnostic System Laboratories INC/USA), em fase líquida, para dosagem de estradiol, por radioimunoensaio, em soro de Leopardus pardalis (n=5)e Leopardus tigrinus (n=4), antes (15-30 dias) e após (24-28 horas) tratamento com gonadotropinas exógenas (hCG/ Novormon® eeCG/ Vetecor®; pFSH/Folltropin-V® e pLH/Lutropin-V®). A concentração sérica para Leopardus pardalis variou 0,005 a 0,151ng/ml para estradiol e 0,15-37,22ng/ml para progesterona. A concentração sérica para Leopardus tigrinus variou 0,012-0,147ng/ml para estradiol e 0,06-34,09ng/ml para progesterona. A sensibilidade mínima detectada foi 0,004 ng/ml para progesterona e 0,00014ng/ml para estradiol. Para progesterona o coeficiente intra-ensaio baixo foi 2,58% e alto6,36%, já o coeficiente inter-ensaio baixo foi 0,67% e alto 5,55%. Para o estradiol o coeficiente intra-ensaio baixo foi 0,69% e alto 4,15%,sendo o coeficiente inter-ensaio baixo 1,40% e alto 3,00%. Paralelismo foi encontrado para progesterona e conjunto comercial DPC com r = 0,96 para Leopardus pardalis e r = 0,99 para Leopardus tigrinus. Para estradiol em conjunto comercial DSL paralelismo foi encontrado com r = 0,98 para Leopardus pardalis e com r = 0,99 para Leopardus tigrinus. Com estes resultados podemos concluir que o conjunto diagnóstico comercial DPC para dosagem de progesterona e DSL para dosagem de estradiol foram validados para utilização em soro de Leopardus pardalis e Leopardus tigrinus, podendo ser utilizado como ferramenta no manejo reprodutivo destas espécies visando à conservação.

DPC commercial kit (Coat-A-Count - Diagnostic Products Corporation/USA) and DSL commercial kit (Diagnostic System Laboratories INC/USA) were used for progesterone and estradiol radioimmunoassay validation in serum of two endangered Brazilian felids: Leopardus pardalis (n=5) and Leopardus tigrinus (n=4) before (15-30 days) and after (24-28 hours) exogenous gonadotrophins treatment(hCG/ Novormon® and eCG/ Vetecor®; pFSH/Folltropin-V® andpLH/Lutropin-V®). Variation of estradiol concentration was 0.005 -0.151 ng/ml and progesterone concentration was 0.15 - 37.22 ng/ml for Leopardus pardalis. Variation of estradiol concentration was 0.012 -0.147 ng/ml and progesterone concentration was 0.15 - 37.22 ng/ml for Leopardus tigrinus. Minimum sensibility detected for progesterone was 0.004 ng/ml and for estradiol was 0.00014 ng/ml. Progesterone intra-assay coefficient was 2.58% and 6.36% and inter-assay was 0.67% and 5.55%. Estradiol intra-assay coefficient was 0.69% and 4.15%,and inter-assay was 1.40% and 3.00%. Parallelism was used for kits validation. Progesterone and DPC commercial kit Parallelism wasr = 0.96 for Leopardus pardalis and r = 0.99 for Leopardus tigrinus. Estradiol and DSL commercial kit Parallelism was r = 0.98 for Leopardus pardalis and r = 0.99 for Leopardus tigrinus. In conclusion, these results showed that DPC commercial kit for serum progesterone dosages and DSL commercial kit for serum estradiol dosages can be used for Leopardus pardalis e Leopardus tigrinus. These findings are potentially valuable for the reproductive management and conservation of endangered felid populations.

Avaliação de bioensaios para a determinação da atividade biológica da gonadotrofina coriônica humana (hCG) / Evaluation of bioassays for measuring the of biological activity of Human Chorionic Gonadotropin (hCG)

A atividade biológica de um hormônio é mensurada pela sua capacidade em exercer um determinado efeito biológico que possa ser quantificado. Os ensaios biológicos in vivo que avaliam a atividade do hCG baseiam-se na sua capacidade de promover um aumento de peso do sistema genital, vesículas seminais e próstata em ratos impúberes e útero e ovários em camundongas impúberes. A partir destes efeitos, determinam-se equações relacionando as doses de hCG administradas com o aumento de peso do sistema genital. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência de bioensaios em mensurarem a atividade biológica do hCG utilizando ratos, ratas e camundongas impúberes. No experimento 1, ratos receberam 0, 4, 8 ou 16UI de hCG, a cada 24 horas, durante 4 dias. A próstata e/ou as vesículas seminais foram pesadas 24 horas após a última injeção. No experimento 2, camundongas receberam 0, 3,33, 10, 33,3 ou 100UI de hCG, em um único dia. Os ovários e/ou útero foram pesados 24horas após a última injeção. O hCG promoveu aumento de peso do sistema genital de camundongas, entretanto, não houve associação linear ou quadrática significativa entre as doses de hCG utilizadas e os pesos das variáveis medidas, impossibilitando a determinação de equações confiáveis. Os protocolos testados, com as doses de hCG utilizadas demonstraram eficiência e sensibilidade limitadas para a quantificação da atividade biológica do hCG.

Biological activity of a given hormone is measured by its capacity to exert a specific, quantifiable biological effect. Aim of biological assays that measure activity of hCG is to construct prediction equations that associate increasing doses of hCG with changes in weights of genitalia, seminal vesicles and prostate gland in pre-pubertal male rats and weights of uterus and ovaries in pre-pubertal female mice. Objective of the present study was to evaluate efficiency of bioassays which used pre-pubertal male rats and female rats and mice to measure hCG activity. In experiment 1, male rats received 0, 4, 8 or 16IU of hCG daily, for 4 days. Prostate and seminal vesicles were weighed 24 hours after last injection. In experiment 2, female mice received 0, 3.33, 10,33.33 or 100IU of hCG in one day. Ovaries and uteri were weighed24 hours after the last injection. The hCG increased weights of genitaliain female mice. However, there were no satisfactory linear or quadratic associations between doses of hCG used and variables measured. Itwas concluded that assays tested showed only limited efficiency and sensibility to quantify hCG biological activity.

Efeito da gonadotrofina coriônica humana sobre o epitélio seminífero de ratos pré-púberes com criptorquia experimental / The effect of human chorionic gonadotrophin (HCG) on the seminiferous epithelium of the prepubertal rat with experimental cryptorchidism

Objetivo: Determinar se a gonadotrofina coriônica humana (GCH) em ratos pré-púberes com criptorquia é capaz de induzir a maturaçäo precoce da espermatogênese e tornar o epitélio seminífero mais suscetível à açäo do calor. Material e métodos: Foram utilizados 40 ratos machos (Rattus norvegicus albinus), 8 animais por grupo, assim distribuídos: Grupo 1 - os animais foram submetidos no 1 dia de vida à criptorquia experimental bilateral e entre o 10 e o 14 dia de vida, receberam a dose diária de 25 UI de GCH por via subcutânea; Grupo 2 - no 1 dia de vida, todos foram submetidos à criptorquia experimental bilateral, de forma semelhante ao grupo 1, porém näo receberam medicaçäo; Grupo 3 - os animais deste grupo foram submetidos ao trauma cirurgico semelhante aos grupos 1 e 2, porém, os testículos näo foram fixados (operaçäo simulada); Grupo 4 - os animais deste grupo näo foram operados e receberam GCH da mesma forma que o grupo 1; Grupo 5 - sem cirurgia ou qualquer medicaçäo. Os animais foram sacrificados aos 20 dias de vida para colheita de sangue para dosagem de teosterona sérica e os testículos foram removidos para exame morfométrico. Resultados: A análise do epitélio seminífero näo revelou semelhança relevante entre os diversos grupos e o estádio de maturaçäo mais avançado da linhagem espermatogênica foi de paquíteno. Conclusöes: A gonadotrofina coriônica humana em ratos pré-púberes com criptorquia experimental näo induziu maturaçäo precoce da espermatogênese e näo tornou o epitélio seminífero mais suscetível à açäo do calor

Bioquímica del líquido quístico mamario, III: niveles del factor de crecimiento epidérmico, gonadotrofina coriónica y andrógenos conjugados / Biochemistry of breast cyst fluids, III: levels of NA, K, androgens, epidermal growth factor and human chorionic gonadotropin

En la última década se ha implementado una serie de análisis bioquímicos que permiten identificar varios tipos de líquidos quísticos (LQs). En el presente trabajo se confirma la presencia de polipéptidos y esteroides conjugados -como el factor de crecimiento epidérmico (FCE), el sulfato de dehidroepiandrosterona (S-DHEA) y el androstano-3Ó, 17ß-diol glucurónido (3Ó-Adiol G)- a veces en concentraciones muy elevadas con respecto a los niveles encontrados simultáneamente en el plasma circulante. Como contraste, la concentración del cortisol apenas alcanza a un 20 por ciento del normalmente hallado en el plasma. Se demuestra además que la concentración intraquística del 3Ó-Adiol G se correlaciona positiva y significativamente con la del S-DHEA (r = 0,8744, p < 0,0001) y con el FCE (r = 0,8949, p < 0,0001), con amplia variabilidad en los resultados. Se establece también una correlación negativa entre el 3Ó-Adiol G y el cociente Na/K (r = - 0,6592, p = 0,0001). Por último, se determinan los niveles de la gonadotrofina coriónica (hCG), utilizando un sistema automatizado de quimioluminiscencia, demostrándose que esta glicoproteína se encuentra en cantidades determinables (> 1,1 mUI/ml) en el 73,8 por ciento de los LQs analizados. En el 57,4 por ciento los niveles superan a los encontrados normalmente en el plasma que oscilan entre < 1,1 mUl/ml y 5,5 mUl/ml. En un 4,9 por ciento las concentraciones resultan significativamente elevadas, alcanzando hasta las 1.000 mUl/ml. Se demuestra una correlación negativa con alta significación estadística entre los valores normalizados de la hCG con los niveles del S-DHEA, del 3Ó-Adiol G y del FCE y una correlación positiva con el cociente NA/K. Se discute la posibilidad de que el FCE, los esteroides conjugados y la hCG puedan ser sintetizados de novo en el tejido epitelial que recubre las paredes del quiste

Resultados en el tratamiento de la endometrosis con cirugía y análogos del GnRh de depósito / Surgical treatment of the endometrosis compared to the treatment whith GnRh analogues

Muestra nuestra experiencia en el tratamiento secuencial y combinado, quirúrgico y médico con análogos del GnRh de depósito (Lupron 3,75), hiperestimulación ovárica controlada con gonadotrofinas HMG-HCG y posterior Second Look laparoscópico con técnica de transferencia intratubaria de gametos. Se evaluó 61 pacientes que consultaron por infertilidad en el Instituto de Ginecología y Fertilidad de Bs. As., entre el 1º de octubre de 1992 y el 30 de diciembre de 1994. En todas ellas se realizó una laparoscopia para el diagnóstico y estadificación de la endometrosis según la clasificación revisada de la Sociedad Americana de Fertilidad, realizándose en el mismo acto los procedimientos quirúrgicos de coagulación, lisis o quistectomía según fuera necesario. Todas las pacientes fueron medicadas con Lupron 3,75 de aplicación mensual durante un período de 6 meses posteriores a la cirugía. Del total de 61 pacientes, 29 (47,5 por ciento) se embarazaron con tratamiento quirúrgico, médico e hiperestimulación ovárica, de las cuales 17 (59 por ciento) lo logró en forma espontánea, 13 (44,8 por ciento) en el primer semestre y 4 (13,7 por ciento) en el segundo semestre postratamiento. Sobre 35 pacientes estimuladas, a partir de los 6 meses de finalizado el Lupron por un período de 3,2 ciclos se embarazaron 12 (41 por ciento). A 10 pacientes se les realizó al cabo de un año de finalizado el tratamiento con análogos un second look laparoscópico con técnica de transferencia intratubaria de gametos, logrando el embarazo en 5 pacientes (50 por ciento). Los resultados obtenidos sugieren que el tratamiento propuesto ha sido útil en este grupo de pacientes, logrando además una adecuada tolerancia y aceptación por parte de las mismas