ABSTRACT
To analyze a suspected case of Clostridium botulinum food poisoning in Bayingolin Mongolian Autonomous Prefecture, Xinjiang and to help validating the diagnosis and providing technical support for clinical treatment. The basic information and clinical manifestations of food poisoning cases were investigated by using the epidemiological method of food safety accidents. The botulinum toxin genes in the samples were detected by real-time PCR and inoculation of KM mouse. The enriched bacteria were further purified and validated. PFGE and cluster analysis were performed on five isolates. Clostridium botulinum type A was detected in two homemade fermented bean samples and stool lavage fluid samples of three patients from enriched samples by toxin test and real-time PCR, and were further validated after isolation of Clostridium botulinum. PFGE showed 100% homology among five isolates. Five isolates of bacteria isolated from the stool lavage fluid of three patients and two homemade fermented bean curd were identified as the same source through PFGE. The cause of this food poisoning cases is food pollution of Clostridium botulinum type A.
Subject(s)
Animals , Humans , Mice , Clostridium botulinum/genetics , Feces , Foodborne Diseases/epidemiology , GerbillinaeABSTRACT
Honey can be used for the treatment of wounds, sores and skin burns, but it might be contaminated with Clostridium botulinum spores. In order to evaluate Costa Rican raw honey samples, the detection of neurotoxin gene sequences (corresponding to the bacterium) C. botulinum A, B, E and F was done with the polymerase chain reaction. A total of 64 raw honey samples, coming from different Costa Rican sites were analyzed. Reference C. botulinum strains type A (ATCC 19397), type B (ATCC 7949), type E (ATCC 17786) and type F (ATCC 25764) were used as templates for testing the effectivity of the method. The process consisted in culturing the honey samples in prereduced triptose-peptone-glucose-yeast extract media (TGPY)for 5 days. After this, the bacteria lysate obtained was used for PCR. The amplicons, product of the reaction, were visualized using agarose gel 2%. From the 64 honey samples analyzed, none produced positive results in the PCR, since no amplicons were obtained. Even though, all the reference C. botulinum strains used as controls were visualized and showed the effectivity of the extraction method and of the PCR used. The results obtained show promising therapeutic uses for honey from Costa Rica, but further evaluations shall be done in order to be sure of the safety of the product.
La miel de abeja es un producto que podría ser utilizado en el tratamiento de heridas, abrasiones y quemaduras de piel; no obstante, podría estar contaminada con esporas de C. botulinum. Con el fin de evaluar muestras de miel de origen costarricense, se detectó las secuencias de genes productores de neurotoxina correspondientes a C. botulinum tipos A, B, E y F utilizando la técnica de PCR (reacción de polimerasa en cadena). 64 diferentes muestras de miel, provenientes de diversos sitios costarricenses, fueron analizadas. Con el fin de evaluar la efectividad del método, se utilizó cepas de referencia tipos A (ATCC 19397), B (ATCC 7949),E (ATCC 17786)y F (ATCC 25764). El procedimiento consistió en cultivar las muestras de miel en caldo triptona peptona glucosa levadura prerreducido, por cinco días. Luego de esto, se obtuvo un lisado bacteriano, el cual fue utilizado para la técnica de PCR. Los amplicones producto de la reacción fueron visualizados utilizando geles de azarosa al 2%.De las 64 muestras de miel analizadas, ninguna produjo resultados positivos en el PCR. No obstante, todas las cepas de referencia usadas como controles produjeron bandas, que demuestran la efectividad del método de extracción utilizado y de la técnica en sí. Los resultados obtenidos demuestran la ausencia de contaminación por C.botulinum de la miel de abeja de origen costarricense, no obstante,deben realizarse evaluaciones adicionales para garantizar la seguridad del producto.
Subject(s)
Clostridium botulinum/genetics , Honey/microbiology , Costa Rica , Polymerase Chain ReactionABSTRACT
El efecto del ajo sobre el crecimiento y toxinogénesis de Clostridium botilinum fue estudiado utilizando como sustrato el jugo obtenido por previsión y filtración de dientes de las variedades "blanco" y "colorado", y dientes cortados en trozos. El pH de ambos varió, según los lotes, entre 5,7 y 6,0. Los diluyentes de los medios con ajo fueron caldo peptona-glucosa-extracto de levadura, o agua destilada. C. botulinum a 110 fue sembrado en diluciones del jugo y en los medios con trozos e incubado en atmósferas aireada y anaeróbica, 15 d a 37-C. botulinum creció y produjo toxina en los diferents sustratos, en concentraciones variables (desde vestigios hasta 5.000 DL50/ml) pero menores que el control (10.000 DL50/ml). Mientras no se amplíen los resultados preliminares obtenido en este trabajo, la industria conservera deberá tener en cuenta que para su preparación como conserva acuosa en envase hermético o aireado, el ajo deberá ser considerado un producto de acidez baja apto para el crecimiento y producción de toxina de C. botulinum, no esterilizable por el calor, por lo que el contenido deberá ser acidificado hasta un pH equilibrado de 4,5 o ,menos, de acuerdo a las regulamentaciones generales vigentes para el tratamiento de alimentos conservados de acidez baja