ABSTRACT
O receptor de hormônio tireoidiano (TR) e o receptor do retinóide X (RXR) fazem parte de uma superfamília de receptores nucleares, que em resposta aos seus respectivos ligantes, atuam como fatores de transcriçäo no DNA. Os receptores nucleares possuem uma estrutura modular e a ligaçäo dos mesmos ao DNA se faz como monômeros ou dímeros através do módulo ligador ao DNA (DBD) que se liga a sequências nucleotídicas específicas do DNA, conhecidas como elementos responsivos hormonais (HRE). TR e RXR se ligam a HREs conhecidos como repetiçöes diretas (DRs) do hexâmero AGGTCA (AGGTCAnAGGTCA). t3 e o ácido 9cis-retinóico se ligam a porçäo carboxi-terminal do TR e RXR respectivamente, ativando a transcriçäo gênica. O TR atua principalmente como homodímero ou heterodímero, ligando-se no último caso ao RXR. Nosso estudo analisou a ligaçäo do TR e do RXR a im grupo de DRs separadas por um número variável de nucleotídeos, de 0 a 6, com o objetivo de estabelecer a importância desses HREs na transcriçäo gênica destes receptores nucleares. Confirmamos através de cultura de células e eletroforese em gel de poliacrilamida que o espaçamento ideal para a resposta do T3 medida pelo TR é de 4 nucleotídeos (DR4). A forscolina, um potencializador da proteína cinase A (PKA), foi capaz de potencializar a resposta transcricional do TR ao T3. O RXR pode atuar como parceiro silencioso de outros receptores nucleares, ou como homodímero em resposta ao ácido 9cis-retinóico. Nossos ensaios de eletroforese demonstraram que o RXR pode se ligar como homodímero näo só ao conhecido elemento responsivo DR1, mas também a DR2, DR3, DR4, DR5 e DR6, numa forma dependente de 9cisRA. Em cultura de células a forscolina demonstrou uma evidente açäo sinérgica do RXR nos elementos DR1 a DR5. Desta forma, demonstramos que homodímeros de RXR podem possuir uma atividade transcricional mais ampla do que se acreditava e verificamos a importância de mecanismos de conversa cruzada entre os receptores nucleares TR eRXR com o sistema de sinalizaçäo via AMP cíclico