Inmunofluorescencia con Crithidia luciliae para la deteccion de anticuerpos anti-adn: imagenes atipicas y su relacion con enfermedad de chagas y leishmaniasis: imagenes atipicas y su relacion con enfermedad de chagas y leishmaniasis / Immunofluorescence assay with Crithidia luciliae for the detection of anti-DNA antibodies: atypical images and their relationship with Chagas' disease and leishmaniasis

Los anticuerpos anti-ADN nativo pueden detectarse por inmunofluorescencia indirecta con Crithidia luciliae, observándose tinción fluorescente anular del kinetoplasto que contiene ADN de doble cadena. En algunos casos pueden observarse imágenes fluorescentes en flagelo, membrana y corpúsculo basal, consideradas atípicas. Como C. luciliae pertenece a la familia Trypanosomatidae, que incluye patógenos para el hombre como Trypanosoma cruzi y Leishmania spp., se consideró que las imágenes atípicas pudieran deberse a reacciones cruzadas. Se realizaron estudios serológicos para Chagas a 105 muestras provenientes de zona endémica (Corrientes) y no endémica (Buenos Aires) para T. cruzi que presentaban imágenes atípicas con C. luciliae. La serología para Chagas resultó positiva en el 64.7% de las muestras de Buenos Aires y en el 78.3% de las de Corrientes que presentaban frente a C. luciliae imagen conjunta de membrana y flagelo. No presentaron la imagen conjunta ninguna de las muestras de dadores de sangre normales, ni de pacientes con enfermedades del tejido conectivo, excepto dos con lupus que también eran chagásicos. Todas las muestras de pacientes chagásicos analizadas frente a C. luciliae presentaron la imagen conjunta. Se estudiaron también 46 muestras de pacientes con leishmaniasis, 28 de ellos coinfectados con T. cruzi. La imagen conjunta se observó en el 88.0% de las muestras de leishmaniásicos y en el 78.5% de las de coinfectados. Los resultados sugieren que C. luciliae podría ser un sustrato alternativo, económico y de bajo riesgo para el diagnóstico serológico de enfermedad de Chagas, aunque no discrimina la infección por Leishmania. El hallazgo de la imagen conjunta en la detección de anti-ADN nativo señala la conveniencia de realizar en esos pacientes, estudios clínicos y de laboratorio para enfermedad de Chagas y leishmaniasis.

Indirect immunoperoxidase staining of Crithidia luciliae for detecting anti-dsDNA: comparison with other serodiagnostic tests.

The indirect immunoperoxidase (IIP) method was modified and improved for detecting anti-dsDNA. Using fetal calf serum to block the non-specific antibodies and staining with chromatic substrate solution at pH 6.2, the performance time is substantially decreased and the patterns of positive and negative staining are easily distinguished. IIP was compared with indirect hemagglutination (IHA), latex agglutination (LA) and the standard method indirect immunofluorescent technique (IFT). The sensitivities and specificities of the three methods were studied in 507 sera from various sources. Using IFT as the gold standard, sensitivities of IIP, IHA, LA were 98.18%, 88.18% and 50.91% respectively, and the corresponding specificities were 99.5%, 98.24% and 100%. There was a good correlation between titers of IFT and IIP (Spearman correlation coefficient = 0.77, p < 0.001) with no significant difference between the titer of both tests (Wilcoxon Matched-Pairs Signed-Rank test, p = 0.143). These results indicate that the modified IIP method is both highly sensitive and specific and only needs a light microscope to perform it.

Lupus eritematoso sistemico no idoso: caracteristicas clinicas e laboratoriais / Systemic lupus erythematosus in the elderly: clinical and laboratorial characteristics

As caracteristicas clinicas e laboratoriais de 199 pacientes com lupus eritematoso sistemico (LES) foram estudadas. Os pacientes que apresentaram inicio apos 50 anos foram comparados aqueles com inicio mais precoce. O acometimento clinico definiu diferencas importantes entre as duas populacoes. Os pacientes idosos apresentaram maior frequencia de manifestacoes musculares (p<0,05) e menor frequencia de alteracoes cutaneas (p<0,001) e de alopecia (p<0,02). Alem disso a apresentacao clinica mais frequente foi fraqueza muscular, poliartrite e emagrecimento (>10Kg), condicoes estas que podem sugerir o diagnostico de polimialgia reumatica ou doenca neoplasica. A presenca dos diversos auto-anticorpos foi semelhante nos dois grupos. Em contraste com estudos anteriores nao encontramos maior frequencia de anti-La/SSB no LES de inicio tardio. A apresentacao clinica do LES no idoso e menos exuberante e muitas vezes pouco caracteristica, exigindo consideracao especial para este diagnostico no sentido de se evitar retardo na sua terapeutica.

Preparación de láminas de crithidia luciliae para el diagnóstico por inmunofluorescencia del lupus eritematoso sistémico / A technique for the preparation of crithidia luciliae slides for inmunofluorescence diagnosis of systemic lupus erythematosus

Se cultiva el parásito Crithidia luciliae y se preparan a partir de este cultivo, láminas portaobjetos de fabricación china, para utilizarlas en la detección de anticuerpos anti ADN de doble cadena en el suero de pacientes con lupus eritematoso sistémico mediante la técnica de inmunofluorescencia indirecta. Se comparan los resultados obtenidos de l00 sueros mediante láminas comerciales de procedencia holandesa, con los obtenidos con las láminas fabricadas nacionalmente por nosotros y se comprueba mediante la prueba de Chi cuadrado que no existen diferencias significativas entre ambos métodos