Effects of cryoprotectants and low temperatures on hatching and abnormal embryo development of Prochilodus lineatus (Characiformes: Prochilodontidae)

This study evaluated the effect of the cryoprotectants and the low temperatures on the embryonic development of Prochilodus lineatus, describing their main morphological alterations. On chilling sensitivity test, the survival rates at the twenty somites stage (20S) were 53.6% at 0ºC, and 100% in 5ºC. To test toxicity, the embryos were exposed to a graded series of 1,2-Propanediol (PROP), dimethyl sulfoxide (Me2SO4) and glycerol (GLY), terminating in a solution of high osmolarity. There was no significant difference in the embryos survival of toxicity test between series of PROP and Me2SO4 in the 6S and 20S. In the cooling protocols, were evaluated the effects of low temperature associated with cryoprotectants. At 5ºC, PROP showed survival rates above 75% in the gastrula stage (G) and above 90% in the 6S and 20S stages. High rates of abnormalities were observed, and the most recurrent were: small bodies, fins presenting uncontrolled cell growth, membrane rupture, and retraction. These results demonstrate the need to use cryoprotectant solutions, even when there is no ice nucleation, and, on the other hand, shows that high cryoprotectant concentrations promote numerous morphological lesions, compromising normal embryonic development.(AU)

Este estudo avaliou os efeitos dos crioprotetores e das baixas temperaturas no desenvolvimento embrionário de Prochilodus lineatus, descrevendo suas principais alterações morfológicas. Nos testes de sensibilidade ao frio, as taxas de sobrevivência, no estágio de vinte somitos (20S), foram de 53,6% a 0ºC e 100% a 5ºC. Nos testes de toxicidade, os embriões foram expostos a uma série graduada dos crioprotetores: 1,2-Propanediol (PROP), dimetilsulfóxido (Me2SO4) e glicerol (GLY), terminando em uma combinação de alta osmolaridade. Não houve diferença significativa na sobrevivência dos embriões nas séries do PROP e Me2SO4 nos estágios de 6S e 20S. Nos protocolos de resfriamento, foram avaliados os efeitos da baixa temperatura associados as séries crioprotetoras. A 5ºC, o PROP apresentou taxas de sobrevivência acima de 75% no estádio de gástrula (G) e acima de 90% nos estádios 6S e 20S. Foram observadas altas taxas de anormalidades sendo as mais recorrentes: corpos pequenos, nadadeiras apresentando crescimento celular descontrolado, ruptura da membrana e retração vitelínica. Estes resultados demonstram a necessidade do uso das soluções crioprotetoras, mesmo não havendo nucleação de gelo e, em contrapartida, demonstra que as elevadas concentrações crioprotetoras promovem numerosas lesões morfológicas, comprometendo o desenvolvimento embrionário.(AU)

Infusion of Hematopoietic Stem Cells: Types, Characteristics, Adverse and Transfusion Reactions and the Implications for Nursing / Infusão de células-tronco hematopoéticas: tipos, características, reações adversas e transfusionais e implicações para a enfermagem / Infusión de células madre hematopoyéticas: tipos, características, reacciones adversas y de transfusión y sus implicaciones para la enfermería

Hematopoietic stem cell infusion is an important procedure in Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT). This study identifies transfusion and other adverse reactions that can occur during infusion and the nursing care related to the procedure. This epidemiologic study used transplantations performed between 2006 and 2008. A total of 166 transplantations were performed: 114 were autologous, 47 allogeneic and five haploidentical. Three transfusion reactions and 96 adverse reactions were observed. Adverse reactions were related to the presence of cryoprotectant, though the infusion rate and quantity of infused cryoprotectant were not related to the occurrence of reactions. The products were fresh and infused within the recommended time when transfusion reactions occurred. In regard to cell source, lower engraftment time was found in peripheral blood. Nursing documentation is relevant for patients' safety as well to planning an infusion in order to minimize the occurrence of reactions.

A infusão de células-tronco hematopoéticas é importante procedimento no transplante de células-tronco hematopoéticas. Este estudo se propôs a identificar as reações adversas e transfusionais que podem ocorrer durante a infusão e os cuidados de enfermagem inerentes ao procedimento. Trata-se de estudo epidemiológico em transplantes, ocorridos entre os anos 2006 e 2008. Ocorreram 166 transplantes, sendo 114 autólogos, 47 alogênicos e 5 haploidênticos. Observaram-se três reações transfusionais e 96 reações adversas. As reações adversas estão ligadas à presença do crioprotetor. No entanto, velocidade de infusão e quantidade do crioprotetor infundido não tiveram relação com a ocorrência das reações. Nas reações transfusionais, os produtos eram frescos e infundidos na velocidade preconizada. Quanto às fontes de células, houve menor tempo de enxertia no sangue periférico. A documentação de enfermagem é relevante tanto para a segurança do paciente como para o planejamento da infusão, a fim de minimizar a ocorrência das reações.

La infusión de las células madre hematopoyéticas es un importante procedimiento en el trasplante de células madre hematopoyéticas. Este estudio se propuso identificar las reacciones adversas y de transfusión que pueden ocurrir durante la infusión y los cuidados de enfermería inherentes al procedimiento. Se trata de un estudio epidemiológico en trasplantes ocurridos en los años de 2006 a 2008. En ese período ocurrieron 166 trasplantes, siendo 114 autólogos, 47 alogénicos y 5 haploidénticos. Se observaron tres reacciones de transfusión y 96 reacciones adversas. Las reacciones adversas están ligadas a presencia del crioprotector. Sin embargo, la velocidad de infusión y la cantidad del crioprotector infundido, no tuvieron relación con la ocurrencia de las reacciones. En las reacciones de transfusión, los productos eran frescos e infundidos con la velocidad preconizada. En cuanto a las fuentes de células, hubo menor tiempo de injerto en la sangre periférica. La documentación de enfermería es relevante tanto para la seguridad del paciente como para la planificación de la infusión, a fin de minimizar la ocurrencia de las reacciones.

Estudio estructural del huso meiótico de ovocitos bovinos vitrificados / Structural study of meiotic spindle of vitrified bovine oocytes

La verificación de ovocitos bovinos se ha venido utilizando como uno de los protocolos de criopreservación más prometedores. Se ha expresado el temor por los efectos que puede causar la utilización de aditivos crioprotectores sobre la integridad estructural de los ovocitos. En este trabajo, los experimentos fueron conducidos para evaluar e efecto de vitrificación sobre la estructura del huso meiótio y la capacidad de desarrollo de ovocitos bovinos. Para ello, ovocitos acabados de loberar de sus folículos y madurados in vitro fueron expuestos a temperatura ambiente a las soluciones vitrificadoras (etilendlicol y sacarosa), también fueron vitrificados ovocitos inmaduros y madurados in vitro. Los ovocitos fueron teñidos in toto, para evaluar la maduración nuclear y a través de la tinción inmunocitoquímica fueron estudiadas las alteraciones estructurales del huso mieótico. Los ovocitos en estadio de VG, son más sensibles al efecto tóxico causado por los agentes crioprotectores a temperatura ambiente y al proceso de criopreservación, valorados mediante la progresión meiótica y el análisis inmunocitoquímico del huso meiótico. La anomalía más frecuentemente observada fue la ausencia del huso meiótico. La estructura del huso meiótico de ovocitos vitrificados MIV, es más resistentes al daño crioinducido, que los ovocitos vitrificados en estadio de VG. Se recomienda la vitrificación de ovocitos bovinos madurados in vitro.

Bovine oocytes vitrification has been used as one of the most promising cryopreservation protocols. Fear of the effects of cryoprotectant additives on the oocytes structural integrity have been posed. In this study, trials were conducted to evaluate the effects of vitrification over meiotic spindle structure and development capability in bovine oocytes. Based in this evidence, oocytes recently released from their follicles and in vitro matured were exposed at room temperature to vitrifying solutions (ethylenglicol and sucrose), also immature and in vitro matured oocytes were vitrified. Oocytes were stained in toto to assess nuclear maturation stage and meiotic spindle structural alterations were studied by immunocytochemistry. Oocytes at GV stage are more sensitive to the toxic effects caused by cryoprotectant agents at room temperature and to the cryopreservation procedure, assessed through meiotic progression and immunocytochemical analysis of meiotic spindle. The most frequently encountered anomaly was absence of meiotic spindle. Meiotic spindle structure in vitrified and IVM oocytes endure better the cryoinduced injuries compared with oocytes vitrified the GV stage. It is recommend the vitrification of in vitro matured bovine oocytes.