Evaluation of QIAamp DNA mini kit for removing of inhibitors in detection of Cryptosporidium parvum oocysts in water samples by a nested- PCR assay

In recent years, there has been a dramatic increase in the occurrence of waterborne disease outbreaks caused by the Cryptosporidium parvum, and presence of this protozoan parasite in drinking water is a significant health problem faced by the water industry. A new strategy for detection of Cryptosporidium oocysts in water samples is PCR' based techniques. In this study a nested' PCR assay was designed for the specific amplification of a 199 bp DNA fragment of the gene encoding the heat shock protein [hsp70] of Cryptosporidium parvum oocysts. In order to prevent the inhibition of PCR amplification by substances contained in water samples, three DNA purification methods including QIAamp DNA mini kit, InstaGene Matrix, MagExtractor ' Genome were compared in concentrates of tap water samples spiked with the oocysts. After it was found that the QIAamp is only efficient purification technique, the efficiency of QIAamp and immunomagnetic separation for nested'PCR assay of various water samples was compared. The results show that QIAamp provide a useful and rapid tool for removing of PCR inhibitors. It seems that QIAamp purification- nested PCR assay is a sensitive, rapid and cost effective method for detection of Cryptosporidium parvum oocysts in clean water samples with turbidity < 2 nephelometric turbidity unit [NTU]

Identificación de Cryptosporidium en cerdos con enteritis / Identification of Cryptosporidium in pigs with enteritis in Mexico

Se observaron numerosos Cryptosporidium en el borde ciliado de las células epiteliales del intestino delgado, en tres lechones de 10 semanas de edad. Estos hallazgos se asociaron con una severa atrofia de vellosidades y moderada infiltración linfoide en la lámina propia. Además, en todos estos casos hubo una severa neumonía intersticial y linfoproliferativa compatible con una infección por Mycoplasma. Los estudios bacteriológicos fueron negativos a cepas enteropatógenas de Salmonella y Pasteurella. Estos cerdos pertenecían a una piara con mala higiene y sujetos a masivos tratamientos con varios antibióticos. Aunque el principal papel patológico de Cryptosporidium no puede ser atribuido en éste, la infección por este protozoario podría estar involucrada en el desarrollo de las lesiones. La cryptosporidiosis ha sido previamente notificada en becerros en México, pero este constituye el primer informe en cerdos

Diagnóstico sorológico da criptosporidiose humana / Serological diagnosis of human cryptosporidiosis

Para verificar a prevalência de Cryptosporidium em indivíduos humanos, através da Reação de Imunofluorescência Indireta, foram examinados 74 soros de imunodeficientes com um percentual de ocorrência de 55,40 pôr cento de IgC. Em 210 soros de crianças examinados verificou-se uma prevalência global extimada de 9,05 pôr cento. O antígeno utilizado foi obtido da porção distal do terço posterior do íleo de bezerros inoculados experimentalmente com C. parvum. A sensibilidade da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) tomanto como padrão os esfregaços fecais, foi 79,27 pôr cento. Em 44 soros de vaqueiros examinados foram encontrados 3 casos (6,81 pôr cento) positivos em uma diluição de 1:40

Prevalência de Cryptosporidium parvum em bezerros procedentes da microrregião de Goiânia-Go / Prevalence of Cryptosporidium parvim in calves proceeding from the micro-region of Goiânia-Go

Foi verificada a prevalência de Cryptosporidium em bezerros na faixa etária de 0 a 30 dias na microrregião de Goiânia. Examinou-se 499 bezerros na faixa etária acima referida, oriundos de 87 propriedades. Foram examinados através de esfregaços fecais corados pela técnica de Ziehl-Neelsen modificado. A prevalência global estimada do Cryptosporidium para a microrregião de Goiânia, foi de 12,02 pôr cento