Citoesqueleto e mecanotransdução na fisiopatologia da lesão pulmonar induzida por ventilador / Cytoskeleton and mechanotransduction in the pathophysiology of ventilator-induced lung injury

A ventilação mecânica é uma terapia importante, mas pode resultar em complicações. Uma das mais relevantes é a lesão pulmonar induzida por ventilador. Devido à hiperdistensão alveolar, o pulmão inicia um processo inflamatório, com infiltrado neutrofílico, formação de membrana hialina, fibrogênese e prejuízo de troca gasosa. Nesse processo, a mecanotransdução da hiperdistensão celular é mediada através do citoesqueleto da célula e de suas interações com a matriz extracelular e com as células vizinhas, de modo que o estímulo mecânico da ventilação se traduz em sinalização bioquímica intracelular, desencadeando ativação endotelial, permeabilidade vascular pulmonar, quimiotaxia leucocitária, produção de citocinas e, possivelmente, lesão de órgãos à distância. Estudos clínicos demonstram essa relação entre distensão pulmonar e mortalidade em pacientes com lesão pulmonar induzida por ventilador. Entretanto, apesar de o citoesqueleto ter um papel fundamental na patogênese da lesão pulmonar induzida por ventilador, a literatura carece de estudos utilizando modelos in vivo sobre as alterações do citoesqueleto e de suas proteínas associadas durante esse processo patológico.

Although mechanical ventilation is an important therapy, it can result in complications. One major complication is ventilator-induced lung injury, which is caused by alveolar hyperdistension, leading to an inflammatory process, with neutrophilic infiltration, hyaline membrane formation, fibrogenesis and impaired gas exchange. In this process, cellular mechanotransduction of the overstretching stimulus is mediated by means of the cytoskeleton and its cell-cell and cell-extracellular matrix interactions, in such a way that the mechanical stimulus of ventilation is translated into an intracellular biochemical signal, inducing endothelial activation, pulmonary vascular permeability, leukocyte chemotaxis, cytokine production and, possibly, distal organ failure. Clinical studies have shown the relationship between pulmonary distension and mortality in patients with ventilator-induced lung injury. However, although the cytoskeleton plays a fundamental role in the pathogenesis of ventilator-induced lung injury, there have been few in vivo studies of alterations in the cytoskeleton and in cytoskeleton-associated proteins during this pathological process.

Activity, distribution and regulation of phosphofructokinase in salivary gland of rats with streptozotocin-induced diabetes

Apesar de existirem muitos estudos sobre a influência do diabetes nas glândulas salivares, esses apresentam resultados conflitantes. Neste estudo, a regulação da enzima fosfofrutoquinase-1 (PFK-1) foi estudada utilizando-se glândulas salivares de ratos. O diabetes foi induzido por uma única injeção intraperitonial de estreptozotocina (60 mg/kg peso corporal) em ratos (180-200 g). Os animais foram sacrificados 30 dias após a indução do diabetes e utilizaram-se as glândulas submandibular e parótida. A hiperglicemia foi avaliada por determinação da glicemia sanguínea. A distribuição da PFK-1 entre frações solúvel e ligada, concentração de fosfato na PFK-1, concentração de frutose-2,6-bisfosfato e a atividade da enzima PFK-2 foram determinadas. O cálculo do peso glandular relativo mostrou um aumento na glândula parótida de ratos diabéticos comparados ao controle, o que não ocorreu na glândula submandibular. A atividade da PFK-1 expressa por glândula não mostrou variação entre animais diabético e controle. Contudo, considerando a atividade específica, a fração solúvel da enzima mostrou aumento de 50% com relação ao controle e a fração ligada ao citoesqueleto um aumento de 84% com relação ao controle. Na glândula parótida não foi observada diferença na atividade específica entre os grupos diabético e controle. Por outro lado, a atividade por glândula da fração solúvel aumentou nos animais diabéticos. A concentração de fosfato da PFK-1 aumentou nas glândulas submandibular e parótida nos animais diabéticos. Tanto a concentração de frutose-2,6-bisfosfato quanto a forma ativa da PFK-2 mostraram redução nas glândulas salivares. Concluindo, o aumento na atividade da PFK-1 observado nas glândulas salivares de ratos com diabetes induzida por estreptozotocina não parece ser modulado pela frutose-2,6-bisfosfato.

Expresión de filamentos intermedios durante el desarrollo embrionario de cerdo sus scrofa y bovino bos taurus / Intermediate filaments expression during embryonic development of sus scrofa pig and bos taurus bovine

Utilizando la técnica de inmunoperoxidasa y un panel de anticuerpos monoclonales, se realizó un estudio para caracterizar la expresión de citoqueratinas y vimentina, proteínas constituyentes de los filamentos intermedios, en los tejidos en diferenciación de embriones de cerdo y bovino, en diferentes etapas de la embriogénesis. Ambas especies presentaron características similares en la expresión de citoqueratinas y vimentina. En los embriones prefetales, mayores de 18 mm de longitud cráneo-caudal, ya existe un patrón de citoqueratinas en la mayoría de las células epiteliales, ya que éstas se tiñeron intensamente con los anticuerpos antiqueratinas AE1/AE3 y AE1. En embriones menores, sólo reaccionaron moderadamente con estos anticuerpos, el mesonefros, tubo digestivo y epitelio celómico. La vimentina aparece en embriones más pequeños en el endotelio vascular, en el mesonefros y en algunas células conectivas y del tubo natural. En embriones mayores, además, aparece inmunotinción con este anticuerpo, en el endocardio, dermis, plexos coroídeos, osteoblastos y odontoblasto. La citoqueratina 18 y los controles negativos de las inmunotinciones empleadas, no mostraron reacción positiva en ninguna de las estructuras embrionarias de ambas especies. Nuestros resultados enfatizan la importancia de los filamentos intermedios, especialmente de las citoqueratinas, como marcadores de diferenciación de los tejidos embrionarios y sugieren que en aquellos órganos que comienzan a funcionar tempranamente en el embrión, como el mesonefros y la red vascular, el citoesqueleto se organiza más tempranamente