Técnicas anatômicas no ensino da prática de anatomia animal / Anatomical techniques in the animal anatomy practice teaching

A preocupação quanto a conservação de peças anatômicas existe a mais de 5 mil anos, pois o uso de peças cadavéricas são indispensáveis para o ensino, contribuindo com a melhora das habilidades aplicativas, assimilativas e compreensivas da disciplina. Esse trabalho propõe maior utilização das técnicas apresentadas em laboratórios de anatomia, visando abolir o uso do formol como conservante, permitindo um ambiente agradável para a prática da relação ensino-aprendizagem. Para isso foram utilizadas quatro técnicas anatômicas, a criodesidratação, glicerinação, injeção de látex e injeção de vinilite seguido de corrosão, que foram executadas utilizando cães, gatos e órgãos provenientes de doações. Com a criodesidratação e glicerinação os materiais anatômicos ficaram consideravelmente mais leves do que eram quando mantidos em formol, mantendo-se inodoros, diferente do evidenciado na utilização de formol e outros conservantes. As estruturas de estudo das peças ficaram intactas, de fácil visualização e o armazenamento passou a ser feito em caixas fechadas sem qualquer tipo de liquido, mantendo-se assim por até 3 anos. As técnicas de injeção de látex e vinilite seguido de corrosão mostraram total eficiência preenchendo os sistemas injetados, podendo visualizar as ramificações e todo caminho percorrido no sistema circulatório. As quatro técnicas anatômicas estudadas nesse trabalho mostraram ser suficientes para atender as necessidades dos estudantes quanto ao estudo da anatomia, devido à perfeita evidenciação de estruturas externas e internas dos animais.

The concern about preservation of anatomical specimens in existence for over 5000 years, since the use of anatomical parts, are indispensable for teaching and contribute for the improvement of applicative, assimilative skills and understanding of the discipline. This paper proposes better use of techniques in anatomy laboratories, to abolish the use of formaldehyde as preservative, allowing a pleasant environment for the practice of teaching/learning relationship. For this purpose, we used four anatomical techniques, (1) the cryodehydration, (2) glycerin conservation, (3) latex injection and (4) vinylite injection followed corrosion, we executed using dogs, cats and organs from donations. With cryodehydration and glycerin conservation the anatomical materials were considerably lighter than when kept in formaldehyde, odorless unlike in the use of formaldehyde and other preservatives. The structures to be studied were kept intact, easily to view, and the specimens could be stored in closed boxes without any liquid, thus remaining for up to 3 years. The Injection techniques (latex and vinylite followed by corrosion) showed total efficiency to inject filling systems, and allowed a clear view of all ramifications and paths of the circulatory system. The four anatomical techniques studied were shown to be sufficient to meet the needs of students to study anatomy due to the perfect disclosure of external and internal animal structures.

Freeze-drying as an alternative method of human sclera preservation / Liofilização como alternativa à preservação de esclera humana

PURPOSE: To compare the effect of preserving sclera samples in either 95 percent ethanol or freeze-dried. METHODS: Ninety-six samples of human sclera were studied. Half of them were freeze-dried and half preserved in 95 percent ethanol. Preservation periods of 18, 45, 90 or 174 days were studied. Automated immunostaining was carried out in the Ventana BenchMarkR LT platform using collagen 1 and fibronectin antibodies. Histological staining was also performed with hematoxilin-eosin and Masson trichrome. Samples were classified according to the degree of collagen fiber parallelism (0-2), intensity of Masson staining (0-2), and the expression of both antibodies (0-3). Friedman and Wilcoxon tests were applied to compare preservation methods and p-values below 0.05 were considered to ensure statistical significance. RESULTS: Relevant results were found in three situations: (i) Friedman's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group rehydrated after 174-days as compared to the 90-day group; (ii) Wilcoxon's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group after 18 and 174 days as compared to the ethanol group; (iii) the freeze-dried group disclosed higher immunohistochemical expression for COL-1 antibody in the sclera samples rehydrated after 45, 90 and 174 days as compared to the ones rehydrated after 18 days. CONCLUSION: Histological and immunohistochemical analysis showed freeze-drying to be a superior method for sclera preservation as compared to 95 percent ethanol. This technique provides an easy method to manipulate tissue, with longer shelf life, and storage at room temperature.

OBJETIVO: Comparar dois métodos de preservação de esclera humana, liofilização e álcool 95 por cento, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: Foram avaliados 96 fragmentos de seis escleras humanas. Metade das amostras foi submetida ao processo de liofilização e metade conservada em álcool 95 por cento. Dois fragmentos de cada grupo foram avaliados pelas colorações de hematoxilina-eosina e tricrômio de Masson e submetidos a técnica de imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina e colágeno 1, após 18, 45, 90 e 174 dias de preservação. Os espécimens foram classificados de acordo com o paralelismo (PF:0-2) e integridade (IF:0-1) das fibras de colágeno e expressão imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina (FIB:0-3) e colágeno 1 (COL-1:0-3). A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Friedman e Wilcoxon e o valor de p menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significante. RESULTADOS: Verificaram-se diferenças significantes em três situações: (i) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 174 dias quando comparado aos 90 dias; (ii) maior expressão imuno-histoquímica para o anticorpo COL-1 nas amostras de escleras liofilizadas após os 18 dias iniciais de preservação; (iii) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 18 e 174 dias quando comparado às escleras preservadas em álcool. CONCLUSÕES: A preservação de tecido escleral por liofilização mostrou-se técnica tão eficaz quanto a preservação em álcool, apresentado vantagem quando considerada a integridade das fibras de colágeno. A liofilização mostra-se benéfica por permitir a estocagem do tecido em temperatura ambiente e com prazo de validade estendido.

Application of alcohol- or acetone-fixed Schistosoma eggs as an alternative to lyophilized eggs for the circumoval precipitin test.

Antigenicity of Schistosoma mansoni and S. japonicum eggs preserved in ethanol or acetone were assessed in a circumoval precipitin (COP) assay. The egg antigens were found to retain sufficiently their COP reactivity for the diagnosis of both schistosomiasis mansoni and japonica, although their reactivity became lower than that of lyophilized eggs. These alternative preparations for COP tests have advantages, such as keeping eggs directly in fixatives soon after the egg-purification process. Furthermore, evaporation-process may cause eggshell cleavages which facilitate the reaction. The possible usefulness of those eggs in COP assays in local endemic areas is discussed.