Development of indigenous ELISA for rotavirus diagnosis & its comparison with commercial kit.

Preparation of reagents for the diagnosis of rotavirus by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was carried out at the National Institute of Virology (NIV), Pune. This is a double antibody sandwich ELISA test. The coating antibody was raised in guinea pig against SA-11 (Simian rotavirus), and is used at 1:20,000 dilution. The indicator antibody was also raised against SA-11 in rabbits. The rabbit preimmune serum is used as negative control serum. Both, pre- and post-immune rabbit antisera are used at 1:10,000 dilution in the test. Goat IgG-HRP conjugate against rabbit IgG was procured commercially (Sigma, USA). Results of ELISA test can be read visually. A total of 63 pretested faecal specimens and 38 specimens of rotavirus in different concentrations were compared simultaneously by the NIV ELISA and Dakopatts ELISA. Of the 63 specimens, 36 were positive in NIV ELISA and 33 positive by Dakopatts ELISA. Human and animal rotavirus strains also showed higher titers in NIV ELISA than Dakopatts ELISA. From our data we conclude that NIV ELISA is 100 per cent specific and more sensitive than Dakopatts ELISA test. It is much more economical than any other commercial kit available for the diagnosis of rotavirus. Since the reagents are in lyophilized form, they are suitable for use in developing countries.

Utilidad clínica de la determinación de PTH sérica en los pacientes en hemodiálisis de mantenimiento, utilizando un antisuero medio molecular/carboxilo terminal / Clinical utility of the determination of serum PTH in patients in hemodialysis of maintenance, using an antiserum mid-molecular/carboxy-terminal

Para evaluar el grado de hiperparatiroidismo o secundario se efectuaron dosajes de PTH sérica en 106 pacientes (70 hombres y 36 mujeres) en HDM, cuyas edades oscilaban entre 20 y 84 años y presentaban una permanencia promedio en HDM de 37,8 meses. El dosaje de PTH se efectuó con el antisuero CH-9, que reconoce los fragmentos medio-molecular y carboxilo-terminal de la molécula. El fragmento medio-molecular 43-68 se utilizó como trazador radioactivo y standard, expresándose los resultados como PTH-MM equivalente. La recuperación esquelética del hiperparatiroidismo secundario se estimó a través de las mediciones de fosfatasa alcalina y el grado de resorción subperióstica en la radiografía de manos. Los valores promedio obtenido de PTH-MM sin distinción de sexo fueron de 3.900 ñ 430 pg/ml, con un rango de 200-20.000 pg/ml. Los niveles de PTH no se correlacionaron con la calcemia total y el calcio iónico. En cambio se correlacionaron en forma significativa con los meses en HDM (p <0,01), el nivel de fosfatemia (p <0,05), el grado de lesión ósea en la radiografía de manos (p <0,01> y la fosfatasa alcalina (p <0,01). Los pacientes con lesiones óseas específicas de hiperparatiroidismo secundario mostraron un nivel medio de PTH-MM circulante de 12.160 pg/ml, significativamente mayor que los niveles de los pacientes sin lesiones específicas. En base a los datos obtenidos, la Tabla 3 indica una relación aproximada entre los niveles de PTH circulante y el grado de hiperparatiroidismo secundario en los pacientes en HDM. La medición confiable de la PTH y los valores de referencia adecuados pueden faciliater la prevlencia del desarrollo del hiperparatiroidismo secundario grave en estos pacientes