Validation of the Dual-path Platform chromatographic immunoassay (DPP® CVL rapid test) for the serodiagnosis of canine visceral leishmaniasis

BACKGROUND Visceral leishmaniasis is a major public health challenge in South America, and dogs are its main urban reservoir. OBJECTIVE Validation of the canine Dual-path Platform immunoassay for canine visceral leishmaniasis (DPP® CVL) for a sample set composed of 1446 dogs from different Brazilian endemic areas. METHODS A well-defined reference standard by means of parasitological culture, immunohistochemistry, and histopathology was used. Animals were classified as asymptomatic, oligosymptomatic, or symptomatic. Sensitivity and specificity were assessed as a single set and in clinical groups. A reproducibility assessment of the tests was conducted using the Kappa (κ) index at three different laboratories (A, B, and C). FINDINGS Overall, 89% sensitivity and 70% specificity were obtained for the entire sample set. Analysis of the clinical groups showed a gradual decrease in the sensitivity and an increase in the specificity with the reduction of clinical signs in the dogs that were assessed, reaching a sensitivity of 75% (42.8-94.5%) among asymptomatic dogs and lower specificity of 56% (46.2-66.3%) among symptomatic dogs. Inter-laboratory agreement was substantial (κAB= 0.778; κAC= 0.645; κCB= 0.711). MAIN CONCLUSIONS The test performance is somewhat dependent on canine symptomatology, but such influence was less evident than in previous studies. Favourable results for sensitivity and specificity can be obtained even in asymptomatic animals; however, caution is needed in these evaluations, and the results suggest that the immunochromatographic test may be further improved for better investigation in asymptomatic dogs. The results obtained confirm the usefulness of DPP® CVL for application in serological surveys.

Evaluación de la técnica inmunoensayo en capa delgada utilizando microplacas, en la detección de anticuerpos cirulantes de Oestrus ovis, en ovinos infestados naturalmente / Evaluation of the immunoassay test in thin layer, using microplates of polyestirene for the detection of circulating antibodies of Oestrus ovis naturally infected ovines

Introducción. La estrosis es una miasis cavitaria que afecta a los ovinos y caprinos. En la actualidad el diagnóstico es a través de la observación de los signos clínicos y el hallazgo de larvas en los conductos nasales de los animales a la necropsia. Diferentes técnicas serológicas se han utilizado y evaluado para tratar de realizar un mejor diagnóstico de esta enfermedad. Objetivo. Evaluar la prueba de inmunoensayo en capa delgada (ICD) utilizando microplacas de poliestireno, para el diagnóstico de estrosis ovina. Material y métodos. Se utilizaron 95 ovinos sacrificados para abasto, de los cuales se obtuvo el suero y se les realizó el examen postmorten para la detección de la presencia de larvas en los conductos nasales. La presencia de larvas en los conductos nasales fue considerada como prueba de oro. El antígeno usado fue a partir de larvas L2 con una concentración de proteína de 4.2 mg/mL. La prueba se realizó en microplacas de poliestireno de fondo plano y de 96 pozos, se siguió el mismo procedimiento utilizado en la técnica descrita por Bautista 1982. Se determinó la sensibilidad y se midió la concordancia entre ambas pruebas, calculando el valor de kappa. Resultados. De los 95 ovinos sacrificados, 51 (54 por ceinto) fueron positivos, a la preencia de larvas en el examen postmortem y 61 (51 por ciento) a la prueba de ICD y u valor de kappa de 0.53 al comparar ambas pruebas. Conclusiones. El uso de microplacas en la prueba ICD es una alternativa para el diagnóstico de estrosis ovina en estudio epidemiológicos ya que permite con una sensibilidad alta, analizar una mayor cantidad de sueros por placa, utilizando una menor cantidad de antígeno