Recombinant human B7.2 IgV-like domain expressed in bacteria maintains its co-stimulatory activity in vitro / 中华医学杂志(英文版)

<p><b>OBJECTIVE</b>To investigate which of the two immunoglobulin (Ig)-like domains, the immunoglobulin variable region homologous domain IgV (hB7.2 IgV) and the immunoglobulin constant region homologous domain IgC (hB7.2 IgC) on the human B7.2 molecule contains receptor binding sites, and to evaluate whether the B7.2 protein expressed in bacteria has biological activity in vitro.</p><p><b>METHODS</b>Three fragments of hB7.2 IgV,hB7.2 IgC and the complete extracellular region of human B7.2 containing both the IgV and IgC domains,hB7.2 Ig (V+C), were amplified by PCR and subcloned into pGEM-Teasy. Three recombinants,pGEX-4T-3-hB7.2 IgV,pGEX-4T-3-hB7.2 IgC and pGEX-4T-3-hB7.2 Ig (V+C), were generated by cloning the fragments into a prokaryote expression plasmid (pGEX-4T-3) and transformed into the host strain E. coli DH5alpha. The relevant target fusion proteins consisting of GST and hB7.2 IgV,hB7.2 IgC and hB7.2 Ig (V+C), were identified by SDS-PAGE and Western blotting. With the presence of the first signal imitated by anti-CD3 antibody, T cell activation was observed by exposing purified T lymphocytes to each soluble form of the three bacterially-produced human B7.2 fusion proteins by [(3)H]-TdR incorporation.</p><p><b>RESULTS</b>Three recombinant fusion proteins of human B7.2, GST-hB7.2 IgV, GST-hB7.2 IgC and GST-hB7.2 Ig (V+C) were produced and detected in inclusion body form from engineered bacteria. With the first signal present,T lymphocytes proliferated when co-stimulated by bacterially-produced either GST-hB7.2 Ig (V+C) or GST-hB7.2 IgV fusion proteins, but not by GST-hB7.2 IgC.</p><p><b>CONCLUSIONS</b>Functional human B7.2 fusion protein can be produced in bacteria. The IgV-like domain of human B7.2 is sufficient for B7.2 to interact with its counter-receptors and co-stimulate T lymphocytes.</p>

Esplenose associada a esplenectomia em crianças esquistossomóticas: análise sequencial das imunoglobulinas G, A e M e dos componentes 3 e 4 do sistema complemento / Esplenosis associated a splenectomy in hepatosplenic children with schistosomiasis mansoni: Sequential analysis of the immunoglobulins G , A end M and the components 3 and 4 of the complement system

Doze crianças de oito a 14 anos, portadoras de esquistossomose mansônica, forma hepatoesplênica, tratadas com Oxaminiquine, foram submetidas a auto-implante de cerca de 100 gramas de baço no grande omentum, em associaçÝo com esplenectomia e ligadura de veia gástrica esquerda. A esplenose foi comfirmada, em todos os casos, por cintilografia hepatoesplênica seis meses após e autoimplante. A análise sequeqncial das imunoglobulinas G(IgG), A(IGA) e M(IgM) e dos componentes 3 (C3) e 4(c4) do sistema complemento revelou:1§ antes do tratamento clínico as médias das concentraçSes séricas de IgG e IgM (4.048+-1.262mg por centoe 243 +-232mg por cento) foram significativamente mais elevadas (p<0,01) do que as da populaçäo normal. As concentraçäo média de IgG foi maior do que a de adultos na mesma fase evolutiva (p<0,05). As médias das concentraçöes séricas de IgA, C3 e C4 estiveram dentro dos limites da normalidade; 2§ - trinta dias após tratamento clínico houve reduçÝo significativa (p<0,05) e IgG (3.385+-2.182mgpor cento) As médias das concentraçöes séricas de IgA, IgM, C3 e C4 näo variaram significativamente: 3§ após segmento pós-operatório médio de 10 meses houve reduçäo ainda mais significativa (p<0,05 de IgG (2.612+- 656mgpor cento). As concentraçöes médiad de IgA (316+-68mgpor cento) se elevaram de forma significativa. A média de IgM (340+-108mg por cento) embora inferior a média pré-operatória, nÝo alcançou significaçäo estatística. Os resultados evidênciam uma imunoresposta humoral mais acentuada em crianças esquistossomóticas forma hepato-esplênica quando comparada com adulto. A imunomoduçaçäo face ao tratamento clínico inclui a diminuiçäo das respostas humoral sobretudo com queda da concentraçäo de IgG. a eplenectomia associada a esplenose acentua a queda das concentraçöes de IgG e eleva as concentraçöes de IgA e C3

Efectos de la manipulación del sueño sobre los niveles plasmáticos de inmunoglobulinas, albúmina y cortisol en sujetos voluntarios sanos / Sleep manipulation effects on plasmatic levels of inmunoglobulins albumin and cortisol in voluntary health subjects

Se estudió el efecto que dos formas de manipulación del sueño tiene sobre las inmunoglobulinas, la albúmina y el cortisol plasmáticos. Los 24 voluntarios sanos estudiados se asignaron al azar, a 3 grupos: en el primero se les privó totalmente de sueño (PST) durante 40 hr, y se recolectaron muestras plasmáticas antes de la manipulación experimental (BSL), durante la privación (TRANS) y en el seguimiento (POST). las muestras se tomaron a las 06:00 hr. A un segundo grupo de voluntarios se le privó del sueño de movimientos oculares rápidos (PSMOR-2); y al tercer grupo de sujetos se le privó de SMOR durante 6 noches (PSMOR-6). A estos dos grupos se les tomó sangre (en la situación basal y en la última nohe de manipulación del sueño), a las 06:00 hrs. En los resultados se obsevó que el grupo de PTS mostraba una disminución de los niveles de IgG en las condiciones TRANS y POST, sin cambios en el resto de las inmunoglobulinas o la albúmina, mientras que el cortisol se elevó en forma significativa en la situación TRANS. En el grupo PSMOR-2, únicamente se encontró una elevación de cortisol plasmático y, finalmente, en el grupo PSMOR-6 se detectó una elevación de la IgM