Production of intravenous human dengue immunoglobulin from Brazilian-blood donors

Dengue represents an important health problem in Brazil and therefore there is a great need to develop a vaccine or treatment. The neutralization of the dengue virus by a specific antibody can potentially be applied to therapy. The present paper describes, for the first time, the preparation of Immunoglobulin specific for the dengue virus (anti-DENV IgG), collected from screened Brazilian blood-donations. Production was performed using the classic Cohn-Oncley process with minor modifications. The anti-DENV IgG was biochemically and biophysically characterized and fulfilled the requirements defined by the European Pharmacopoeia. The finished product was able to neutralize different virus serotypes (DENV-1, DENV-2, and DENV-3), while a commercial IgG collected from American blood donations was found to have low anti-dengue antibody titers. Overall, this anti-DENV IgG represents an important step in the study of the therapeutic potential and safety of a specific antibody that neutralizes the dengue virus in humans.

A dengue representa um importante problema de saúde no Brasil, portanto, a identificação de vacina ou tratamento eficaz é uma necessidade urgente. A neutralização do vírus da dengue, por anticorpo específico, tem potencial aplicação terapêutica. Descrevemos aqui, pela primeira vez, a preparação de imunoglobulina específica para o vírus da dengue (IgG anti-DENV), produzida a partir do plasma selecionado de doadores brasileiros. A produção foi realizada utilizando o método clássico de Cohn-Oncley com pequenas modificações. A IgG anti-DENV foi bioquimicamente e biofisicamente caracterizada e cumpriu os requisitos definidos pela Farmacopeia Europeia. O produto final foi capaz de neutralizar diferentes sorotipos do vírus (DENV-1, DENV-2 e DENV-3), enquanto que a IgG comercial, produzida a partir do plasma de doadores americanos, apresentou baixos títulos de anticorpos anti-dengue. No geral, esta IgG anti-DENV representa uma importante etapa para o estudo do potencial terapêutico e segurança da neutralização, por anticorpos específicos, do vírus da dengue em humanos.

Utilidad clínica de la IgIV en enfermedades autoinmunes e inflamatorias / Clinical utility of the IgIV in autoinmune and inflamatory diseases

Las inmunoglobulinas (Igs) son un grupo de glicoproteínas que se hallan presentes en el plasma y líquidos intersticiales, constituyen los anticuerpos (Acs) que el organismo elabora ante la entrada de un antígeno (Ag) y que tienen la capacidad de unirse específicamente al mismo. Son producidas y secretadas en gran cantidad por las células plasmáticas resultantes de la activación y diferenciación de los linfocitos B, pudiendo encontrarse en forma soluble o unida a la membrana de los linfocitos B, constituyendo el receptor de la célula B específica para el antígeno (BCR). Las Igs en el hombre son de cinco clases diferentes: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE. En la figura 1 se observa la estructura básica que posee una molécula de Ac. Está constituída por cuatro cadenas polipépticas: dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas livianas (L). Ambas cadenas, tanto pesadas como livianas son idénticas, se hallan unidas por puentes disulfuro, y se dividen en dos regiones: una llamada "variable" (VL) y otra la región "constante" (CL). Las cadenas livianas, menores o ligeras pueden ser de dos tipos: Kappa y Lambda, comunes a todas las Igs. En el humano el 65 por ciento de los Acs poseen Kappa y el 35 por ciento Lambda. Las cadenas pesadas son esencialmente de cinco tipos diferentes, y definen la clase o isotipo de ac: (IgM), (IgD); (IgG), (IgE) y (IgA). El sitio de combinación del Ac con el Ag está determinado en forma conjunta por la estructura espacial de las regiones de las cadenas livianas y pesadas. Por lo tanto, una molécula de Ac, como la mostrada en la figura 1, posee dos sitios de unión, es decir es bivalente. La digestión enzimática de los Acs por papaína genera los fragmentos llamdos Fab (cada uno con su sitio de combinación) y un fragmento llamado Fc, asimismo la digestión por la pepsina permite generar un fragmento llamado F(ab)2 y el Fc. La variabilidad en las regiones V, no es uniforme, sino que existen sectores de hipervariabilidad, que determinan la complementariedad con la superficie tridimensional del Ag. Estos sitios se denominan idiotipo, que comportan como verdaderos Ags, contra los cuales se pueden producir Acs anti-idiotípicos, (éste sería un mecanismo de regulación inmune normal). La función primaria de los Acs es la de unirse al Ag, en algunos casos esta unión tiene consecuencias directas, como por ejemplo, neutralización de toxinas bacteriana o inhibición de la penetración del virus en las células