ABSTRACT
Los anticuerpos monoclonales AcM contra los interferones han demostrado ser una "herramienta" poderosa para la purificación y detección de estas moléculas. En el presente trabajo se reporta la generación de hibridomas de ratón secretores de AcM que reconocen específicamente el interferón alfa 2 recombinante humano (rIFN alfa 2), así como una caracterización más detallada de tres de ellos con respecto a su reconocimiento del antígeno, cuando este es presentado bajo diferentes condiciones. Los AmC CB-IFNA2.1 y CB-IFNA2.3 demostraron su utilidad en la purificación del rIFN alfa 2: el CB-IFNA2.3 fue usado como anticuerpo de recubrimiento en un sistema microELISA para la cuantificación del antígeno, junto al AmC CB-IFNA2.2 como segundo anticuerpo. Este sistema permite detectar niveles de hasta 10 UI/ml del antígeno. El CB-IFNA2.3 mostró además un fuerte efecto neutralizante sobre la actividad antiviral del rIFN alfa 2. Estos AcM están siendo usados sistemáticamente en nuestra institución, tanto en la purificación del rIFN alfa 2 como en el trabajo analítico relacionado con esta molécula
Subject(s)
Mice , Animals , Antibodies, Monoclonal/isolation & purification , Hybridomas , Interferon Type I/isolation & purificationABSTRACT
La purificación parcial del Hu-IFN-* se logra en un solo paso por adsorción y elución sobre ácido silícico. La recuperación de la actividad antiviral es del 80-100 por ciento, con un aumento de la actividad específica de aproximadamente 20-80 veces. El producto obtenido por este método es estable y apropiado para ser utilizado en terapéuticas locales