Serological survey of leptospirosis, brucellosis, and lentivirus in herds of small ruminants in Recôncavo Baiano, Bahia, Brazil / Inquérito sorológico de leptospirose, brucelose e lentiviroses em rebanhos de pequenos ruminantes no Recôncavo Baiano, Bahia, Brasil

A serological survey was carried out to assess the frequency of leptospirosis, small ruminants lentivirus (SRLV), and brucellosis in small ruminant herds in the Recôncavo Baiano, State of Bahia, Brazil, from February to December 2017. In four goat herds, 125 animals were tested for SRLV and leptospirosis, while in five sheep herds, 378 animals were tested for leptospirosis, brucellosis, and SRLV. Regarding leptospirosis, MAT detected 80% of goats and 15.34% of sheep seroreactive. Reactivity was most frequent to serogroups Autumnalis and Grippotyphosa in goats and sheep, respectively. Regarding SRLV, 8.8% of goats and 0.79% of sheep were reactive. Search for anti-B. ovis antibodies revealed 0.52% reactivity. In sheep, three animals showed simultaneous seroreactivity for SRLV and leptospirosis, while one animal had a serological response for brucellosis and leptospirosis. In goats, simultaneous seroreactivity for SRLV and leptospirosis was observed in only one animal. Leptospirosis was the most frequent of the three infectious diseases in investigated herds.(AU)

Foi realizado um inquérito sorológico para avaliar a frequência de ocorrência de leptospirose, lentiviroses de pequenos ruminantes (LVPR) e brucelose em rebanhos de pequenos ruminantes no Recôncavo Baiano, estado da Bahia, Brasil, no período de fevereiro a dezembro de 2017. Em quatro rebanhos de caprinos, foram testados 125 animais para LVPR e leptospirose, enquanto em cinco rebanhos de ovinos, foram testados 378 animais para leptospirose, brucelose e LVPR. Em relação à leptospirose, 80% das cabras e 15,34% das ovelhas foram sororreativas. Os sorogrupos de Leptospira spp. predominantes foram Autumnalis e Grippotyphosa para caprinos e ovinos, respectivamente. Em relação as LVPR, 8,8% dos caprinos e 0,79% dos ovinos foram reativos. Adicionalmente, a pesquisa de anticorpos Anti-B. ovis revelou 0,52% de ovinos reativos. Em ovinos, três animais apresentaram sororreatividade simultânea para LVPR e leptospirose, enquanto um animal teve resposta sorológica para brucelose e leptospirose. Em caprinos, sororreatividade simultânea para LVPR e leptospirose foi observada em apenas um animal. A leptospirose foi a doença infecciosa mais frequente nos rebanhos investigados.(AU)

Avaliação de dois testes sorológicos comerciais para diagnóstico das infecções pelo FIV e pelo FeLV / Evaluation of two point-of-care tests to diagnosis of FIV and FeLV infections

FIV e FeLV são retrovírus associados principalmente com neoplasias. Dois testes rápidos são disponibilizados no Brasil para o diagnóstico dessas infecções: um kit de imunocromatografia de fluxo bidirecional (SNAP® Combo IDEXX) e um kit de imunocromatografia de fluxo lateral unidirecional (ALERE/BIONOTE Anigen Rapid). O objetivo deste estudo foi comparar o teste SNAP® com o teste ALERE. Amostras de sangue de 178 gatos foram testadas utilizando-se ambos os kits. A reação em cadeia de polimerase em tempo real (qPCR) foi empregada como método confirmatório para todos os resultados. O teste SNAP® apresentou sensibilidade e especificidade de 100% para FIV; a sensibilidade e a especificidade do teste ALERE foram de 96,15% e 98,68%, respectivamente. A sensibilidade e a especificidade para o FeLV foram de 93,02% e 96,30% para o teste SNAP® e de 90,70% e 97,78% para o teste ALERE. Ainda em relação ao FeLV, três amostras com resultado positivo na qPCR obtiveram resultado falso-negativo em ambos os testes. Não houve diferença estatisticamente significante entre os métodos. Considerando a qPCR como padrão-ouro, o teste SNAP® apresentou maior sensibilidade e especificidade para o FIV, e o teste ALERE apresentou maior especificidade para o FeLV. Os resultados mostraram uma boa correlação entre os testes.(AU)

FIV and FeLV are Retrovirus associated mainly with feline neoplasms. Two point-of-care tests are commercially available in Brazil for diagnosis of these infections: a bidirectional flow immunochromatography kit (IDEXX SNAP ® Combo) and a lateral unidirectional flow immunochromatography kit (ALERE/BIONOTE Anigen Rapid). The aim of this study was to compare SNAP ® and ALERE tests. Blood samples obtained from 178 cats were evaluated using both tests. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) was used as confirmatory test for all samples. The sensitivity and specificity of SNAP ® test was 100% for FIV, and for ALERE test was 96.15% and 98.68%, respectively. The sensitivity and specificity for FeLV was 93.02% and 96.30% for SNAP ® test and 90.70% and 97.78% for ALERE test. Three samples with a qPCR positive result for FeLV obtained a false negative result in both SNAP ® and ALERE tests. There was no statistically significant difference between the two methods. Considering qPCR as gold standard method, the SNAP® test showed higher sensitivity and specificity for FIV, and the ALERE test presented higher specificity for FeLV. The results showed good agreement among the tests.(AU)

Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por lentivírus de pequenos ruminantes no Estado de Sergipe / Occorrence and risk factors associated with small ruminant lentivirus infection in the State of Sergipe, Brazil

Os lentiviros de pequenos ruminantes (LVPR) são responsáveis por enfermidades infecciosas e multissistêmicas causadas pelo Vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) e o Vírus da Maedi-Visna (MVV), e se apresentam sob as formas clínicas: articular, mamária, respiratória e nervosa. Desta forma esse trabalho objetivou determinar a ocorrência e avaliar os fatores de risco associados à infecção por LVPR no Estado de Sergipe, Brasil. Foram coletadas amostras sanguíneas de 1200 ovinos e 675 caprinos oriundos respectivamente de 60 e 41 propriedades localizadas em 25 municípios sergipanos no período de 2011 a 2014. Os diagnósticos dos LVPR foram determinados pela técnica sorológica de Imunodifusão em Gel Ágar (IDGA) usando o kit comercial da marca Biovetech®. Os dados das variáveis associadas aos fatores de risco foram obtidos a partir de questionários aplicados aos proprietários dos rebanhos e analisados estatisticamente. As frequências absolutas e relativas foram determinadas por análise estatística descritiva e os fatores de risco por análise univariada das variáveis de interesse pelo Teste de Qui-quadrado de Pearson e Exato de Fisher, quando necessário, e em seguida submetidos à análise de regressão logística. Foi evidenciada uma soropositividade de 5,03% (34/675) em caprinos e 1,50% em ovinos com 26,82% (11/41) e 28,33% (17/60) das propriedades apresentando ao menos um animal positivo respectivamente. Na análise dos fatores de risco, não foram observadas diferenças significantes para os ovinos, enquanto que, para os caprinos, rebanhos acima de 100 animais, que pastejam em áreas comuns com outros rebanhos, em uma distância ≤500 metros entre as propriedades, que adotam medidas biotecnológicas da reprodução e não utilizam agulhas estéreis, são mais susceptíveis à infecção por LVPR. Sendo assim, conclui-se que, há a presença dos LVPR em rebanhos sergipanos, e mesmo que em baixas frequências faz-se necessário a implementação de medidas profiláticas devido a possibilidade de expansão e desenvolvimento da caprinocultura do estado, e o alto padrão genético da raça Santa Inês.(AU)

The lentiviruses of small ruminants are infectious and multisystemic diseases caused by the Caprine Arthritis Encephalitis Virus (CAEV) and the Maedi-Visna Virus (MVV), and present the clinical forms: articular, mammary, respiratory and nervous. This work aimed to determine the occurrence and to evaluate the risk factors associated with lentivirus infection of small ruminants in the State of Sergipe, Brazil. Blood samples were collected from 1200 sheep and 675 goats from 60 and 41 farms respectively, located in 25 Sergipe municipalities from 2011 to 2014. The diagnosis of small ruminant lentiviruses (LVPR) was determined by the serological technique of Immunodiffusion in Gel Agar (IDGA) using the commercial kit of the brand Biovetech®. Data from the variables associated with risk factors were obtained from questionnaires applied to the owners of the herds and analyzed statistically. Absolute and relative frequencies were determined by descriptive statistical analysis and risk factors by univariate analysis of the variables of interest by Pearson's Chi-square test and Fisher's exact test, when necessary. A logistic regression analysis was used, considering as a dependent variable for LVPR infection the reactive or non-reactive result observed in the IDGA. A seropositivity of 5.03% (34/675) was observed in goats and 1.50% in sheep with 26.82% (11/41) and 28.33% (17/60) of the properties had at least one animal positive respectively. The analysis of the risk factors, no significant differences were observed for sheep, while for goats, herds above 100 animals grazing in common areas with other herds, at a distance ≤ 500 meters between the properties, that adopt Biotechnological measures of reproduction and do not use sterile needles, are more susceptible to LVPR infection. Therefore, it´s concluded there is presence of lentiviruses of small ruminants in sergipan herds, and even if at low frequencies it is necessary to implement prophylactic measures due to the possibility of expansion and development of goat breeding of the state and the high genetic standard of the Santa Inês breed.(AU)

Duplex nested-PCR for detection of small ruminant lentiviruses

Abstract Small ruminant lentiviruses (SRLV) have high genetic variability which results in different viral strains around the world. This create a challenge to design sensible primers for molecular diagnosis in different regions. This work proposes a protocol of duplex nested-PCR for the precise diagnosis of SRLV. The technique was designed and tested with the control strains CAEV Co and MVV 1514. Then, field strains were submitted to the same protocol of duplex nested-PCR. Blood samples of sheep and goats were tested with AGID and nested PCR with specific primers for pol, gag and LTR. The AGID results showed low detection capacity of positive animals, while the nested PCR demonstrated a greater capacity of virus detection. Results demonstrated that LTR-PCR was more efficient in detecting positive sheep samples, whereas gag-PCR allowed a good detection of samples of positive goats and positive sheep. In addition, pol-PCR was more efficient with goat samples than for sheep. Duplex nested PCR performed with standard virus samples and field strains demonstrated that the technique is more efficient for the detection of multiple pro-viral DNA sequences. This study demonstrated a successful duplex nested PCR assay allowing a more accurate diagnosis of SRLV.

[ first survey on the status of bovine immunudeficiency virus infection and associated clinical, pathological, haematological and flow cytometric findings in Holestein cattle in Iran]

Bovine Immunodeficiency Virus is a Lentivirus which can cause varieties of infectious complications and induce remarkable losses to dairy industry. Considering to the probability of worldwide distribution of the BIV infection, this study was conducted for the first time in Iran to determine of the status of BIV infection in the Holstein cattle and evaluate the associated findings. According to the results of the Nested-PCR method in this study, 16.2% of 197 slaughtered Holstein cattle in Meysam abattoir of Tehran were infective with BIV. Sequencing of the amplicons obtained from PBLs of the cattle using gag-specific primers revealed that there was 98.7-98.9% homology between this field strain and reference sequences of BIV. The infection rate of cattle with enlarged heamal nodes was higher than the animals without these lesions [0.01

Produção de antígeno viral para o sorodiagnóstico da artrite-encefalite caprina utilizando um teste imunoenzimático (ELISA) / Viral antigen production for the sorodiagnóstico of the goat artrite-encefalite using one has tested imunoenzimático

O vírus da Artrite-encefalite caprina (CAEV) é um Lentivírus de pequenos ruminantes, que causa uma doença crônica e progressiva, caracterizada por encefalomielite, mastite, pneumonia e artrite. O diagnóstico é baseado na detecção de anticorpos contra o vírus através da Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA), técnica sorológica de referência para CAEV, porém de baixa sensibilidade. O objetivo deste trabalho foi produzir um antígeno a partir da cultura de células de membrana sinovial caprina (MSC) infectadas com a CAEV, para ser utilizado em um teste diagnóstico (ELISA indireto). O antígeno foi obtido de culturas de células de MSC infectadas e posterior tratamento com SDS 0,1%. Amostras de soros caprinos (n=343) foram utilizadas para detectar a presença de anticorpos para CAEV pelo teste ELISA indireto e a técnica IDGA. Nessas amostras, o teste ELISA detectou 72 (21%) amostras positivas. Entretanto, o teste IDGA detectou 30 (8%) amostras positivas. O ELISA indireto também detectou precocemente uma soroconversão em 5 animais de um total de 13 controlados periodicamente durante 2 anos. A sensibilidade e a especificidade do teste ELISA com relação a IDGA foi de 73,3% e 84% respectivamente. Esse ELISA com o antígeno viral assim produzido mostrou-se efetivo, de baixo custo e sensível para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV.

Prevalência da infecçäo pelo vírus da artrite encefalite caprina no Estado do Ceará, Brasil / Prevalence of caprine arthritis encephalitis virus infection in the state of Ceará, Brazil

A elevaçäo do risco de contaminaçäo pelo vírus da artriteencefalite caprina (CAEV) em rebanhos caprinos nativos e sem raça definida (SRD) tem sido verificada paralelamente à introduçäo de caprinos de raças exóticas no Brasil, o que motivou a realizaçäo deste levantamento epidemiológico no Estado do Ceará. Para o diagnóstico da infecçäo pelo CAEV, utilizou-se a microtécnica de imunodifusäo em gel de ágar. Foram pesquisadas 4019 amostras de soro caprino em 30 municípios do Ceará. A prevalência da infecçäo pelo CAEV verificada foi de 1 por cento (40/4019 animais), sendo a maior prevalência (11,1 por cento) na regiäo metropolitana de Fortaleza. Analisando a distribuiçäo de animais soropositivos nos municípios pesquisados, constatou-se que um terço dos municípios (10/30) apresentaram pelo menos um animal soropositivo. Verificou-se maior prevalência (p<5 por cento) nos caprinos mais velhos quando comparados com os jovens. A análise por sexo e composiçäo do rebanho mostrou que os machos estavam estatisticamente mais afetados (p<5 por cento). Consideramdo-se o grau de sangue, 5,02 por cento de raças puras e 0,12 por cento de animais mestiços apresentavam anticorpos contra CAEV. Dentre os soropositivos, a raça Parda Alpina foi estatisticamente mais afetada (p<5 por cento). Com base nos resultados, pode-se verificar que o lentivírus de pequenos ruminantes já se encontra disseminado nas várias regiöes do Ceará e que, provavelmente, os reprodutores sejam a principal fonte de transmissäo viral entre os rebanhos nativos/SRD.

Produção de antígeno nucleoprotéico do vírus da artrite-encefalite caprina e comparação com o do vírus Maedi-Visna para utilização em teste de imunodifusão em ágar gel / CAEV nucleoproteic antigen production and comparison with Maedi-Visna antigen in the immunodiffusion test

Foi feita uma comparação entre os antígenos (Ag), preparados a partir dos vírus Maedi-Visna (MVV) e Artrite-encefalite Caprina (CAEV) para detecção de anticorpos contra o CAEV em 120 amostras de soro caprino. A sensibilidade e especificidade relativa da imunodifusão em ágar gel (IDAG) usando-se Ag MVV em relação ao Ag CAEV, foi 77,3% e 100%, respectivamente (X2, p<0,01). Assim, para diagnóstico de infecção pelo CAEV recomenda-se apenas o uso de Ag preparado a partir do CAEV. TERMOS DE INDEXAÇÃO: Artrite-encefalite caprina, Maedi/Visna, antígeno, imunodifusão