Monitorização de células-tronco mesenquimais injetadas via retrobulbar próximas ao nervo óptico lesados de coelhos / Monitoring of stem cells from adipose tissue injected via retrobulbar next to previously injured optic nerve of rabbits

Resumo Objetivo: Verificar a presença das células-tronco mesenquimais (MSC) na área próxima ao nervo óptico de coelhos previamente lesado com álcool absoluto. Métodos: Os 12 coelhos da raça Nova Zelândia foram distribuídos em 2 lotes. Após sedação, cada olho do animal recebeu uma injeção retrobulbar de 1 ml de álcool absoluto em um dos olhos e de 1 ml de solução fisiológica 0,9% (SF) no olho contralateral. Após 15 dias deste procedimento inicial todos os olhos dos animais pertencentes ao lote A, receberam via retrobulbar, uma solução contendo MSC de tecido adiposo humano e previamente marcadas com Qdots,. Todos os olhos dos animais do lote B receberam solução PBS. Resultados: Após 15 dias desta última aplicação os animais foram sacrificados e as lâminas foram analisadas. A presença das MSC foi observada em 100% dos olhos dos animais do lote A. Conclusão: Os resultados sugerem que a marcação prévia das MSC com Qdots permitiu o acompanhamento das mesmas na região aplicada e em áreas mais internas do nervo óptico. A permanência de MSC após 15 dias de aplicação ao redor do nervo óptico sugere a viabilidade e possível participação das mesmas no processo de regeneração do tecido lesado. Nas condições deste estudo, a via de aplicação retrobulbar permitiu a mobilização das células tronco do local de aplicação até áreas centrais dos nervos ópticos nos animais do lote A, sugerindo que esta poderá ser uma via de acesso eficaz para as MSC no processo de regeneração de neuropatias ópticas.

Abstract Obtective: To verify the presence of mesenchymal stem cells (MSC) in the area close to the optic nerve of previously injured with absolute alcohol. Methods: Twelve New Zealand breed rabbits were divided into two groups, and after sedation, each eye of the animal received a retrobulbar injection of 1 ml of absolute ethanol in one eye, and 1 ml of physiological solution 0.9 % (PS) in the contralateral eye. After 15 days all eyes of animals belonging to group A, received via retrobulbar a solution containing MSCs from human adipose tissue (AT) and previously marked with Qdots, while all eyes of animals from group B received solution containing PBS. Results: The presence of MSC was observed in 100% of the eyes of the animals of group A and the more central areas near and into the optic nerve. Conclusion: The results suggest that the appointment of MSC with Qdots allowed their follow-up applied in the region and in the inner areas of the optic nerve. The MSC permanence after 15 days of application around the optic nerve suggests the feasibility and possible involvement of the same during the damaged tissue regeneration process. Under the conditions of this study, the route of retrobulbar application and the presence of the stem cells to the central areas of the optic nerves in animals of group A, suggests that this might be an effective approach for MSCs in regeneration process of optic neuropathies.

Análise morfométrica e ultra-estrutural do nervo óptico de ratos induzidos a ingestão de álcool / Morphometric and ultrastructural analysis of the optic nerve in rats following induced ethanol consumption

OBJETIVO: Analisar os efeitos da ingestão crônica de álcool sobre o nervo óptico em um modelo murino adulto. MÉTODOS: Doze ratos machos da raça Wistar, de 30 dias de idade, foram divididos por sorteio em 2 grupos experimentais: "tratado" (TG), com 8 animais, alimentados com ração-padrão para roedores de laboratório e uma mistura de água de torneira e etanol ad libitum; "controle" (CG), com 4 animais, alimentados com a mesma ração e água de torneira pura ad libitum. Após 40 semanas todos os ratos foram sacrificados, sendo os nervos ópticos de ambos os olhos preparados para microscopia óptica e eletrônica. A área de secção transversal de cada nervo a aumento de 500x, assim como número de fibras axonais dentro de 5 campos aleatoriamente selecionados a aumento de 2000x foram medidos com auxílio de digitalizador de imagens acoplado ao microscópio óptico. Foram realizadas fotomicrografias de 10 campos aleatoriamente selecionados de cada nervo (5 centrais e 5 periféricos) a aumento de 4200x em microscópio eletrônico de transmissão. RESULTADOS: A análise morfométrica não mostrou diferenças estatisticamente significativas entre os 2 grupos estudados. Em contraste com o CG, o exame ultra-estrutural dos nervos ópticos do TG mostrou um intenso desarranjo das bainhas de mielina, que se tornaram espessadas, com separação de suas lamelas, apresentando, por vezes, degenerações interlamelares elétron-densas, além da presença de muitas organelas degeneradas. CONCLUSÃO: Os achados desse estudo mostram alterações ultra-estruturais no nervo óptico de ratos adultos após ingestão crônica de álcool, sem modificações morfométricas significativas.

Evidence of muscarinic acetylcholine receptors in the retinal centrifugal system of the chick

In this study we characterize the presence of muscarinic acetylcholine receptors (mAChR) in the isthmo-optic nucleus (ION) of chicks by immunohistochemistry with the M35 antibody. Some M35-immunoreactive fibers were observed emerging from the retinal optic nerve insertion, suggesting that they could be centrifugal fibers. Indeed, intraocular injections of cholera toxin B (CTb), a retrograde tracer, and double-labeling with M35 and CTb in the ION confirmed this hypothesis. The presence of M35-immunoreactive cells and the possible mAChR expression in ION and ectopic neuron cells in the chick brain strongly suggest the existence of such a cholinergic system in this nucleus and that acetylcholine release from amacrine cells may mediate interactions between retinal cells and ION terminals

La retinotopía en el nervio óptico de falconiformes sugiere el desarrollo cronológico de las células ganglionares de la retina / The retinotopy in the falconiform optic nerve suggests the chronologic development of the retinal ganglion cells

En especies bifoveadas del orden falconiformes, se estudió el ordenamiento topográfico de las proyecciones retinianas, en el nervio óptico, mediante inyecciones restringidas de prolina tritiada. El análisis autorradigráfico, revela una clara distribución retinotópica de los axones provenientes de la fóvea nasal, se ubican en el tercio medio del nervio y los axones de la fóvea temporal se ubican en el extremo dorso-temporal del nervio óptico. Hacia el quiasma, el nervio rota medialmente, y las proyecciones foveales se ubican en la parte dorsal del nervio óptico, encontrándose las proyecciones de la fóvea temporal en una posición más dorsal que los axones de la fóvea nasal. Contrastando nuestros resultados con los datos publicados en la literatura especializada, proponemos que el ordenamiento retinotópico dorso-ventral observado en el nervio óptico, refleja la gradiente cronológica de maduración de las células ganglionares de la retina de estas especies bifoveadas