Antimicrobial resistance and detection of mecA and blaZ genes in coagulase-negative Staphylococcus isolated from bovine mastitis / Resistência antimicrobiana e detecção dos genes mec e blaZ em Staphylococcus coagulase-negativos isolados de mastite bovina

The present study evaluated the pheno- and genotypical antimicrobial resistance profile of coagulase-negative Staphylococcus (CNS) species isolated from dairy cows milk, specially concerning to oxacillin. Of 100 CNS isolates, the S. xylosus was the prevalent species, followed by S. cohnii, S. hominis, S. capitis and S. haemolyticus. Only 6% were phenotypically susceptible to the antimicrobial agents tested in disk diffusion assay. Penicillin and ampicillin resistance rates were significantly higher than others antimicrobials. Four isolates were positive to mecA gene (4%), all represented by the S. xylosus species. The blaZ gene was detected in 16% of the isolates (16/100). It was noticed that all mecA + were also positive to this gene and the presence of both genes was correlated to phenotypic beta-lactamic resistance. We conclude that CNS species from bovine milk presented significantly distinct antimicrobial resistance profiles, evaluated by phenotypic and genotypic tests, which has implications for treatment and management decisions.

O presente estudo avaliou o perfil fenogenotípico de resistência aos antimicrobianos em espécies de Staphylococcus coagulase-negativo (ECN) isoladas do leite de vacas com mastite, em especial considerando a oxacilina. Dos 100 isolados de ECN, S.xylosus foi a espécie predominante, seguida por S. cohnii, S. hominis, S. capitis and S. haemolyticus Apenas 6% dos isolados foram fenotipicamente suscetíveis aos agentes antimicrobianos testados no ensaio de difusão em disco. O percentual de resistência à penicilina e ampicilina foi significativamente maior que aos outros antimicrobianos. Quatro isolados foram positivos para o gene mecA (4%), sendo todos representados pela espécie S.xylosus. O gene blaZ foi detectado em 16% dos isolados (16/100), sendo todos mecA positivos e a presença de ambos os genes foi correlacionada com a resistência fenotípica aos beta-lactâmicos. Foi possível concluir que as espécies de ECN provenientes de leite bovino apresentaram distintos perfis de resistência antimicrobiana, avaliados por testes fenotípicos e genotípicos, podendo dificultar a adoção de medidas de tratamento e manejo dos animais.

Antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. from small ruminant mastitis in Brazil / Resistência antimicrobiana de Staphylococcus spp. de mastite de pequenos ruminantes no Brasil

The study aimed to determine the antimicrobial resistance patterns and to identify molecular resistance markers in Staphylococcus spp. (n=210) isolated from small ruminant mastitis in Brazil. The antimicrobial resistance patterns were evaluated by the disk diffusion test and by detection of the presence of mecA, blaZ, ermA, ermB, ermC and msrA genes by PCR. The efflux pump test was performed using ethidium bromide and biofilm production was determined by Congo red agar test along with PCR for detection of the icaD gene. The isolates were most resistant to amoxicillin (50.0%), streptomycin (42.8%), tetracycline (40.4%), lincomycin (39.0%) and erythromycin (33.8%). Pan-susceptibility to all tested drugs was observed in 71 (33.8%) isolates and 41 Staphylococcus isolates were positive for the efflux pump. Although phenotypic resistance to oxacillin was observed in 12.8% of the isolates, none harbored the mecA gene. However, 45.7% of the isolates harbored blaZ indicating that beta-lactamase production was the main mechanism associated with staphylococci resistance to beta-lactams in the present study. The other determinants of resistance to antimicrobial agents ermA, ermB, ermC, and msrA were observed in 1.4%, 10.4%, 16.2%, and 0.9% of the isolates, respectively. In addition, the icaD gen was detected in 32.9% of the isolates. Seventy three isolates (54 from goats and 19 from sheep) were negative for all resistance genes tested and 69 isolates presented two or more resistance genes. Association among blaZ, ermA, ermB, ermC and efflux pump were observed in 17 isolates, 14 of which originated from goats and three from sheep. The data obtained in this study show the resistance of the isolates to beta-lactamics, which may be associated with the use of antimicrobial drugs without veterinary control.

O presente trabalho teve como objetivo determinar os padrões de resistência a agentes antimicrobianos e identificar marcadores moleculares de resistência em Staphylococcus spp. (n=210) isolados de mastite de pequenos ruminantes no Brasil. Os padrões de resistência a agentes antimicrobianos foram avaliados pelo teste de difusão em disco e pela detecção da presença dos genes mecA, blaZ, ermA, ermB, ermC e msrA via PCR. O teste da bomba de efluxo foi realizado utilizando brometo de etídio e a produção de biofime foi determinada pelo teste do vermelho congo em paralelo com o PCR para detecção do gene icaD. Os isolados foram mais resistentes a amoxicilina (50,0%), estreptomicina (42,8%), tetraciclina (40,4%), lincomicina (39,0%) e eritromicina (33,8%). Setenta e um (33,8%) isolados foram sensíveis a todas as drogas testadas e 41 foram positivos para a bomba de efluxo. Embora a resistência fenotípica a oxacilina tenha sido observada observada em 12,8% dos isolados, nenhum possuiu o gene mecA. Entretanto, 45,7% dos isolados continham a gene blaZ, indicando que a produção de beta-lactamases foi o principal mecanismo associado com a resistência dos Staphylococcus aos beta-lactâmicos. Os outros determinantes de resistência a agentes antimicrobianos ermA, ermb, ermC e msrA foram observados em 1,4%, 10,4%, 16,2% e 0,9% dos isolados respectivamente. Além disso, o gene icaD foi detectado em 32,9% dos isolados. Setenta e três isolados (54 de cabras e 19 de ovelhas) foram negativos para todos os genes de resistência testados e 69 isolados apresentaram dois ou mais genes de resistência. A associação entre blaZ, ermA, ermB, ermC e bomba de efluxo foi observada em 17 isolados dos quais 14 eram oriundos de cabras e três de ovelhas. Os dados obtidos no presente estudo indicam a resistência dos isolados aos beta-lactâmicos, o que pode estar associado ao uso sem controle veterinário destas drogas nos animais.

Penicilin resistant Streptococcus pneumoniae from patients with meningitis

Avaliou-se a susceptibilidade a antibióticos em 146 cepas de Streptococcus pneumoniae isoladas de líquido cerebroespinhal. Sete cepas (3 com o fenótipo de resistência e 4 com o fenótipo de susceptibilidade moderada) apresentaram resultados semelhantes para a oxacilina segundo o método da difusäo em disco, e para a penicilina segundo o método da concentraçäo mínima inibitória. Duas cepas tiveram comportamentos discrepantes ao comparar-se os resultados de 2 métodos. Todas as outras cepas (137) apresentaram inibiçäo de crescimento para uma concentraçäo de oxacilina de 1 mg/ml, segundo o método da difusäo em disco

Infecciones por staphylococcus aureus meticilino resistente: Hospital Roberto del Río / Staphylococcus aureus, methicilin resistant infections at Hospital Roberto del Río, 1991-1992

Las infecciones por Staphylococcus aureus siguen siendo un problema importante, especialmente aquellas causadas por las cepas resistentes a meticilina. Se decidió realizar un estudio restrospectivo con el objeto de conocer la frecuencia real de infecciones estafilocócicas y analizar aquellas producidas por las cepas resistentes. Se revisaron los hemocultivos positivos a Staphylococcus aureus en el laboratorio del Hospital Roberto del Río en el período comprendido entre el 1 de enero de 1991 y el 31 de diciembre de 1992, encontrándose 121 hemocultivos positivos, 58 de los cuales (48 por ciento) resultaron meticilino resistente por la técnica de Kirby Bauer. El estudio mostró 25 recién nacidos (RN) y 22 niños que se comportaron como grupos distintos por lo que el análisis se realizó por separado. En el grupo de niños 13/22 casos son intrahospitalarios los que se produjeron en prácticamente todos los servicios del hospital. Ocurrieron 4 muertes en el grupo. En 9/22 niños no se encontró factores de riesgo de infección. Del grupo de niños RN 20/25 casos corresponden a infección segura por Staphylococcus aureus meticilino resistente, 13/22 son intrahospitalarios. Fallecieron 10/25 casos, siendo la infección responsable en 6 casos. Se concluye que el 48 por ciento de los hemocultivos en que se aisló Staphylococcus aureus resultó ser resistente a la meticilina, correspondiendo un número semejante a niños y recién nacidos. En el grupo de niños la mitad de los casos corresponde a infecciones seguras, a diferencia de los RN en que el 80 por ciento (20/25) tienen una infección segura. La mitad de los casos en niños proviene de la comunidad hecho que se repite en el grupo de RN. El foco más frecuente es el pulmonar en ambos grupos. La mitad de los niños no tiene factores de riesgo a diferencia del grupo de RN donde el 84 por ciento (21/25) tiene al menos uno. En el grupo de RN la mortalidad fue mayor que en el grupo de niños (40 por ciento vs 18 por ciento)