Micrografía analítica de semillas de Cebil (Anadenanthera colubrina var. Cebil (Griseb.) Altschul, Fabaceae) y Chamico (Datura ferox L., Solanaceae), empleadas como drogas alucinógenas en Argentina / Analytical micrography of seeds of Cebil (Anadenanthera colubrina var. Cebil (Griseb.) Altschul, Fabaceae) and Chamico (Datura ferox L., Solanaceae), employed as hallucinogenic drugs in Argentina

Resumen La micrografía analítica es una herramienta útil para la identificación de restos vegetales en muestras de material trozado o molido que no podrían ser identificadas de forma morfológica. El objetivo de este estudio es conocer los caracteres mi- crográficos de las semillas de Cebil (Anadenanthera colubrina var. cebil (Griseb.) Altschul, Leguminosae) y Chamico (Datura ferox L., Solanaceae), con el fin de proporcionar parámetros empleables para su identificación en un contexto forense y toxicológico. Los caracteres micrográficos relacionados con el tegumento exterior y las esclereidas fueron los más indicados para diferenciar entre ambas especies.

Abstract Analytical micrography is a useful tool for the identification of plant parts that can't be identified for its morphological characters. The aim of this work is to obtain micrographic characters of Cebil (Anadenanthera colubrina var. cebil (Griseb.) Altschul, Leguminosae) and Chamico (Datura ferox L., Solanaceae) seeds for its identification in a toxicological and forensic context. The most suitable micrographic features were the ones related with exterior testa and the stone cells.

Análise da expressão imunoistoquímica de regy e de proteínas envolvidas na regulação da apoptose em carcinomas epidermoides de língua oral / Analysis of the immunohistochemical expression of regy and of proteins involved in the regulation of apoptosis in oral tongue squamous cell carcinomas

O câncer na cavidade oral é uma das lesões malignas mais frequentes na população mundial. Como o processo de desenvolvimento das neoplasias malignas remete a danos que promovem um desequilíbrio na regulação da divisão e morte celular, nos últimos anos, diversos estudos foram realizados com o intuito de verificar a influência desses danos no comportamento global das células e na evolução da doença. Nesse contexto, pesquisas recentes mostraram que alterações na expressão de REG podem desempenhar um importante papel na progressão tumoral de várias neoplasias malignas, por interferir na regulação da apoptose. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi investigar a expressão imunoistoquímica dos marcadores REG, p53, MDM-2, Bcl-2 e Bax em carcinomas epidermoides de língua (CELs) oral, com a finalidade de promover uma análise comparativa da imunoexpressão destas proteínas com os parâmetros clínico-patológicos de agressividade da lesão, no intuito de identificar se o REG contribui para a progressão do tumor e se interfere na expressão das proteínas relacionadas a apoptose. Para tanto, foram coletadas informações clínicas de 58 pacientes acometidos por CELs. Em seguida, foi realizada análise histopatológica e imunoistoquímica dos marcadores supracitados, em amostras de material biológico parafinado da lesão. Os resultados mostraram que os tumores com metástase nodal e de alto grau histopatológico de malignidade apresentavam percentuais significativamente menores de REG (p<0,05). Em adição, a análise da expressão de p53, MDM-2 e Bax nos diferentes parâmetros clínico-patológicos avaliados nesse trabalho, não revelou diferenças significativas nos percentuais de imunopositividade desses marcadores. Com relação ao Bcl-2, foi visto que tumores de alto grau de malignidade e com óbitos relacionados a doença apresentavam percentual significativamente menor de positividade dessa proteína (p<0,05). Por fim, o teste de correlação de Spearman demonstrou existir fraca correlação positiva, estatisticamente significativa, entre os percentuais de REG e das proteínas MDM-2 e Bcl-2. Baseado nesses achados, pode-se concluir que a redução da expressão de REG parece contribuir para a progressão do CEL oral e pode influenciar na expressão das proteínas relacionadas a regulação da apoptose (AU).

Cancer of the oral cavity is one of the most common malignancies in the world. Since the development of malignant neoplasms is related to damage that causes an imbalance in the regulation of cell division and cell death, many studies have been conducted in recent years to verify the influence of this damage on overall cell behavior and on the progression of the disease. Within this context, recent studies suggest that changes in the expression of REG play an important role in the progression of different malignant tumors by interfering with the regulation of apoptosis. Therefore, the objective of the present study was to investigate the immunohistochemical expression of REG, p53, MDM-2, Bcl-2 and Bax in oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC), correlating the immunoexpression of these proteins with clinicalpathological parameters of tumor aggressiveness, in order to determine whether REG contributes to tumor progression and interferes with the expression of apoptosisrelated proteins. For this purpose, the clinical data of 58 patients with OTSCC were collected and paraffin-embedded tumor specimens were submitted to histopathological analysis and immunohistochemistry using the markers cited above. The results showed significantly higher expression of REG (p<0.05) in low-grade tumors and without lymph node metastases. In addition, comparison of the expression patterns of p53, MDM-2 and Bax according to the clinical-pathological parameters studied revealed no significant differences in the percentage of immunostaining for these markers. Regarding Bcl-2, a significantly lower percentage of immunostaining for this protein was observed in tumors with a high grade of malignancy and tumors associated with deaths related to the disease (p<0.05). Finally, Spearman's correlation test demonstrated a significant weak positive correlation between the percentages of REG and of MDM-2 and Bcl-2. These findings suggest that the reduced expression of REG contributes to the progression of OTSCC and may influence the expression of proteins related to the regulation of apoptosis (AU).

Ultrastructure of the surface of dental enamel with molar incisor hypomineralization (MIH) with and without acid etching / Ultraestructura de la superficie del esmalte dental con hipomineralización molar incisiva (mih) con y sin grabado ácido

El objetivo del presente trabajo fue analizar la ultraestructura y composición mineral de la superficie del esmalte de un molar con MIH, con y sin tratamiento de grabado ácido. Se analizaron una pieza dentaria permanente sin lesiones clínicas de MIH (controles) y una pieza con diagnóstico clínico de MIH leve y moderada, con indicación de extracción con y sin grabado acido (H3PO4 37 por ciento, 20”). Fueron procesadas para su observación con microscopio electrónico de barrido (SEM) ZEISS (Supra 40) y análisis de la composición mineral con detector EDS (Oxford Instruments). El esmalte del control mostró superficie prismática y patrón de grabado normales. El esmalte clínicamente sano en la pieza con MIH reveló una pérdida parcial del patrón prismático. La lesión leve se presentó porosa con ocasional esgrietas. La moderada presentó mayor porosidad, con grietas de mayor tamaño y presencia de gran cantidad de escamas. La composición mineral de las superficies afectadas mostró menor contenido de Ca y P y aumento de O y C. En la muestra con MIH, inclusive con aspecto normal, las desmineralizaciones no responden a un patrón de grabado, mostrando exposición de cristales con redondeamiento en los extremos de las varillas y menor desmineralización en los espacios interprismáticos. El grabado ácido incrementó la aparición de grietas y profundos poros en la estructura adamantina del esmalte con lesión. La composición mineral mostró en las lesiones moderadas una mayor disminución del contenido de Ca, P y Cl.El esmalte con MIH, inclusive en la superficie adamantina clínicamente intacta, presenta severas alteraciones ultraestructurales y cambios en la composición iónica afectando el patrónde grabado ácido, que podría interferir con los mecanismos de adhesión.

The aim of the present work was to analyze the ultrastructure and mineral composition of the surface of the enamel on amolar with MIH, with and without acid etching. A permanent tooth without clinical MIH lesions (control) and a tooth with clinical diagnosis of mild and moderate MIH, with indication for extraction, were processed with and without acid etching(H3PO437%, 20”) for observation with scanning electron microscope (SEM) ZEISS (Supra 40) and mineral composition analysis with an EDS detector (Oxford Instruments). The control enamel showed normal prismatic surface and etching pattern. The clinically health y enamel on the tooth with MIH revealed partial loss of prismatic pattern. The mild lesion wasporous with occasional cracks. The moderate lesion was moreporous, with larger cracks and many scales. The mineral composition of the affected surfaces had lower Ca and Pcontent and higher O and C. On the tooth with MIH, even on normal looking enamel, the demineralization does not correspond to an etching pattern, and exhibits exposure of crystals with rods with rounded ends and less demineralization in the inter-prismatic spaces. Acid etching increased the presence of cracks and deep pores in the adamantine structure of the enamel with lesion. In moderate lesions, the mineral composition had higher content of Ca, P and Cl. Enamel with MIH, even on clinically intact adamantine surfaces, shows severe alterations in the ultrastructure and changes in ionic composition, which affect the acid etching pattern and may interfere with adhesion.

Pulpectomía lateral: una técnica de micro-odontología para desarrollar habilidad en el manejo de microscopios dentales / Lateral pulpectomy: a microtechnique to develop competency in the use of the dental microscope

Con la aparición de cada nuevo sistema de diagnóstico o tratamiento dental, es necesario capacitar a los cirujanos dentistas para su correctoempleo; los microscopios dentales no escapan a esta regla. En las últimasdos décadas el uso de microscopios dentales se ha incrementado, pero aún no se establece una reglamentación respecto a su empleo y son muy pocos los profesionistas que cuentan con estos equipos para su práctica privada, es por ello que no se han estandarizado técnicas para que los clínicos desarrollen las habilidades necesarias que les permitan utilizar los equipos de microscopia en su práctica cotidiana en forma segura y con facilidad. La técnica de ®pulpectomía lateral¼ es un ejerciciode micro-odontología que se realiza en dientes extraídos, que no tiene aplicación clínica como tal, pero es parte de una serie de procedimientos que tienen la fi nalidad de desarrollar las habilidades de orientación, movimientoy aplicación de presión. Estas habilidades son indispensablescuando se trabaja en la boca de los pacientes con microscopios dentales

As new diagnostic and dental treatments emerge, dental surgeons need to be trained in their correct use. Dental microscopes are no exception to this rule. In the last two decades, the use of dental microscopes has increased, though no set rules for their use have been defi ned. Moreover, few professionals have this equipment in their private practice, which is why techniques have not been standardized for clinicians to develop the skills required for them to be able to use dental microscopes easily and safely in their daily practice. The ®lateral pulpectomy¼ technique is a microdentistry training exercise that is performed on extracted teeth. Though it has no clinical application as such, it forms part of a series of procedures that are designed to develop directional, motion, and pressure skills, all of which are essential when working with dental microscopes in the mouths of patients.

Reprodutibilidade do diagnóstico histopatológico de dermatoses por fotomicrografias digitais versus microscopia óptica convencional / Reproducibility of histopathologic diagnosis of skin diseases by digital photomicrographs versus conventional optical microscopy

FUNDAMENTOS: A telepatologia é considerada boa alternativa para consultas de segunda opinião. Sua implementação é desejável, mas estudos que confirmem sua aplicação prática são necessários. OBJETIVOS: Analisar a concordância entre os diagnósticos histopatológicos de dermatoses feitos com base em microfotografias digitais em comparação com a microscopia convencional. MÉTODOS: As lâminas de 135 pacientes foram avaliadas por dois consultores por meio de microscópio. Após quatro semanas, os mesmos consultores avaliaram 1.738 microfotografias digitais obtidas dessas lâminas. Estimou-se a taxa geral de concordância intraobservadores e interobservadores e obteve-se o índice Kappa com a categorização das dermatoses: dermatoses neoplásicas, dermatoses infectocontagiosas e não infectocontagiosas. RESULTADOS: A concordância do Consultor 1, que analisou lâminas ao microscópio versus imagens, foi de 88,1 por cento (IC 95 por cento = 81,5 por cento - 93,1 por cento). O Consultor 2 obteve concordância de 80,7 por cento (IC 95 por cento = 73,1 por cento - 87 por cento). A concordância interconsultores ao microscópio foi de 81,5 por cento (IC 95 por cento = 73,9 por cento - 87,6 por cento). A mesma análise por meio de microfotografias mostrou concordância de 85,9 por cento (IC 95 por cento = 78,9 por cento - 91,3 por cento). O índice Kappa, que avalia as dermatoses categorizadas, foi de 98,6 por cento para o Consultor 1, de 93,1 por cento para o Consultor 2, de 95,8 por cento para interconsulta por imagens e de 95,9 por cento para interconsultas ao microscópio óptico. Todos esses valores são considerados ótimos. CONCLUSÃO: A avaliação das microfotografias apresentou ótimo nível de reprodutibilidade quando comparada à microscopia tradicional, sendo uma opção viável para consultas de segunda opinião em dermatopatologia.

BACKGROUND: Telepathology is considered a good alternative for a second opinion consultation. Its implementation is desirable, but studies to confirm its practical application are required. OBJECTIVES: To evaluate the reproducibility of histopathologic diagnoses of skin diseases obtained through digital photomicrographs compared with conventional microscopy. METHODS: We evaluated the surgical specimens of 135 patients using an optical microscope. After 4 weeks, the same consultants independently evaluated a total of 1,738 digital photomicrographs obtained from the histopathological slides. We estimated the overall rate of intra and interobserver agreement, and the Kappa coefficient was obtained with the categorization of the skin diseases: neoplastic skin diseases, infectious-contagious skin diseases and non-infectious-contagious skin diseases. RESULTS: Consultant 1 obtained an agreement of 88.1 percent (95 percent CI = 81.5 percent - 93.1 percent) between conventional microscopy and images. Consultant 2 obtained an agreement of 80.7 percent (95 percent CI = 73.1 percent - 87 percent). The interobserver agreement for the microscopy analysis was 81.5 percent (95 percent CI = 73.9 percent - 87.6 percent). The same analysis using microphotography showed an agreement of 85.9 percent (95 percent CI = 78.9 percent - 91.3 percent). The Kappa coefficient, which evaluated the categorized skin diseases, was 98.6 percent for Consultant 1, 93.1 percent for Consultant 2, 95.8 percent for interconsultant analyses of images and 95.9 percent for interconsultant analyses using conventional optical microscopy. All of these values are considered optimal. CONCLUSION: The evaluation of microphotographs shows a good level of reproducibility when compared to traditional microscopy and, therefore, is a viable option for a second opinion consultation in dermatopathology.

Avaliação microscópica de fragmentos ósseos obtidos por diferentes métodos de osteotomia e de irrigação / Microscopic evaluation of bone fragments obtained by different methods of irrigation and osteotomy

Objetivo: Avaliar microscopicamente peças ósseas de coelho obtidas por meio de diferentes métodos de osteotomia e de irrigação. Metodologia: Um coelho adulto New Zealand foi submetido à eutanásia e os ossos foram congelados a -80°C. Os espécimes foram irradiados com Cobalto-60 e seccionados em 24 peças, divididos em quatro grupos de acordo com a técnica de osteotomia utilizada: (G1) broca esférica Carbide nº. 6 em caneta de alta rotação com irrigação manual; (G2) broca esférica Carbide nº. 6 em motor cirúrgico a 1500rpm com irrigação manual; (GA) broca trefina com 5 mm de diâmetrocom irrigação manual; e (GB) broca trefina com 5 mm de diâmetro e irrigação proveniente de bomba peristáltica do motor cirúrgico. As peças ósseas foram analisadas por Microscopia de Luz (ML) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Nos grupos GA e GB foi realizado um estudo histomorfométrico para avaliar a área de tecido ósseo carbonizado e os dados quantitativos foram analisados pelo teste t de Student (p menor que 0,05). Resultados: Na ML observou-se a presença de tecido carbonizado nas margens das amostras dos quatro grupos estudados. Além disso, G1 e G2 apresentaram irregularidades nas superfícies. Na análise por MEV, foram observadas microfissuras em ambas as técnicas de irrigação estudadas. No GA houve uma maior heterogeneidade entre as linhas de corte. No GB observou-se uma maior presença de smear layer. Não houve diferença estatística significante no perímetro de tecido carbonizado entre os grupos GA e GB. Conclusão: O uso da caneta de alta rotação promoveu cortes ósseos mais regulares. O corte com broca trefina usando irrigação com bombas peristálticas do motor cirúrgico se mostrou mais homogêneo. O grau de carbonização do tecido ósseo não variou nas técnicas estudadas.

Objective: To evaluate, by microscopic means, specimens of rabbitbone obtained by different methods of irrigation and osteotomy. Method: A New Zealand adult rabbit was submitted to euthanasia and the bones frozen at -80°C. Specimens were irradiated with Cobalt-60 and sectioned into 24 bone specimens. These were divided into four groups according to the osteotomy technique used, i.e., with a: carbide round bur number 6 in a high-speed handpiece over manual irrigation (G1); carbide round bur number 6 in a surgical motor system at 1500 rpm and manual irrigation (G2); 5-mm diameter trephine bur and manual irrigation (GA); 5-mm diameter trephine bur and irrigation from a peristaltic pump of a surgical motor (GB). Bone specimens were examined under light microscopy (LM) and scanning electron microscopy (SEM). A morphometric study was also carried out in groups GA and GB for evaluating the carbonized bone area, and the quantitative data were analyzed using the Student's t-test (p less than 0.05). Results: LM showed the presence of charred tissue on the margin of samples in the four groups. G1 and G2 had irregular surfaces. According to SEM, microcracks were observed when the two irrigation techniques were used. In GA, there was greater heterogeneity between the cutting lines. In GB, there was a greater presence of a smear layer. There was no statistically significant difference in the perimeter of the carbonized tissue layer between GA and GB. Conclusion: The use of a high-speed handpiece promoted more regular bone cuts. Cutting using trephine burs with a peristaltic irrigation pump of a surgical motor was more homogeneous. The degree of carbonization of bone tissue did not vary in the techniques studied.

Morfología e inmunohistoquímica del conducto deferente humano / Morphology and immunohistochemistry of the human vas deferens

El conducto deferente es una estructura par, simétrica, que da continuidad al transporte espermático desde la porción caudal de epidídimo hacia el conducto eyaculador. Está formado por una mucosa y una túnica muscular, envueltas por una adventicia proveniente del cordón espermático y participa en la regulación del equilibrio ácido/base del fluido seminal y la fisiología de los espermatozoides. En el presente trabajo se describe la histología normal del conducto deferente humano de un paciente con diagnóstico de seminoma y sometido a una orquiectomía total. El conducto deferente fue fijado inmediatamente en Formol tamponado por 48 horas. Luego se procesó por técnicas de histología de rutina con impregnación en parafina de punto de fusión entre 56º y 58º C, obteniéndose secciones de 5 μm de espesor, las que fueron adheridas a portaobjetos silanizados y teñidas con: Hematoxilina/Eosina, Van Gieson y Gomori, a objeto de describir morfología topográfica, fibras musculares, colágenas y reticulares, y con citoqueratinas AE1/AE3 para identificar los tipos de filamentos intermedios presentes en el epitelio de revestimiento del conducto deferente a través de inmunohistoquímica (IHQ). Los resultados permiten observar un conducto deferente formado por una mucosa revestida de un epitelio seudoestratificado cilíndrico con estereocilios, que descansa sobre un corion fibroelástico. La túnica media presenta células musculares rodeadas por una fina red reticular y distribuidas de manera fascicular por manojos circulares de colágeno tipo I. Las agrupaciones celulares fasciculares musculares se ordenan y distribuyen en tres láminas con diferentes sentidos: longitudinal interna, circular media y longitudinal externa. La adventicia, que envuelve al conjunto, en las cercanías de las fibras musculares se distribuye como un tejido conectivo denso muy fibrilar, que hacia la periferia se hace laxo y ricamente vascularizado. La IHQ demuestra la presencia de citoqueratinas de entre 40 kD a 67 kD de peso molecular, constitutivas de numerosos tipos de epitelios. Por lo tanto, la organización estructural y composición tisular del conducto deferente son compatibles con un conducto de gran fuerza contráctil. Las células del epitelio de revestimiento presentan un citoesqueleto reforzado por citoqueratinas en asociación con las uniones de tipo hemidesmosomas y zonas de adhesión.