Biologia de neurônios hipotalâmicos produtores do hormônio liberador das gonadotrofinas: novas informações sobre o uso das células imortalizadas secretoras desse hormônio / Biology of hypothalamic neurons producing gonadotropin releasing hormone (GnRH): new information on the use of immortalized cells secreting GnRH

O estudo dos neurônios que produzem o hormônio liberador das gonadotrofinas (GnRH), hormônio hipotalámico que estimula a secreção, das gonadotrofinas hipofisárias, tem recebido vigoroso impulso com a disponibilidade das células imortalizadas, que especificamente sintetizam e secretam o hormônio em questão. Duas são as linhas celulares obtidas por tumorigênese induzida em camundongos transgênicos: 1) as células GT1 (com os seus subclones GT1-1, GT1-3, GT1-7) e 2) as células GN (com os seus subclones GN10, GN11, NLT). As células GT1 foram derivadas de um tumor hipotalâmico. Pode-se constatar que elas são dotadas de propriedades dos neurônios maduros secretores de GnRH, que completaram o seu trajeto da sua sede de origem, o placóide olfatório, até a sua sede definitiva, o hipotálamo, e já perderam a capacidade de mover-se. Por essas características, as células GT1 são utilizadas sobretudo para o estudo das propriedades secretórias dos neurônios que produzem o GnRH e para identificar os sinais que ali chegam. Pode-se assim evidenciar uma série de receptores, que, ativados pelos seus ligantes (neurotransmissores, hormônios, fatores de crescimento), modulam a síntese e a secreção do GnRH. As células GN foram retiradas de um tumor do bulbo olfatório, portanto, elas são consideradas mais semelhantes aos neurônios imaturos secretores de GnRH que ainda estão desenvolvendo o processo de migração do placóide olfatório até o hipotálamo. Desse modo, tais células são utilizadas sobretudo para identificar e caracterizar os fatores que possam influenciar os processos de migração dos neurônios que produzem o GnRH. Em particular, pode-se constatar que a motilidade dos neurônios secretores desse hormônio é estimulada pela anosmina, a proteína codificada pelo gene KAL1, que, nas suas formas mutantes, ocasiona o hipogonadismo hipogonadotrófico conhecido como a síndrome de Kallmann, por alguns fatores de crescimento (fator de crescimento de fibroblasto, fator de crescimento...

The study of the neurons secreting the gonadotropin releasing hormone (GnRH), the hypothalamic hormone stimulating the release of pituitary gonadotropins, has been potentiated by the development of immortalized cells that specifically synthetize and secrete GnRH. Two cell lines have been obtained by targeted tumorigenesis in transgenic mice: 1) the GT1 cells (with GT1-1, GT1-3 and GT1-7 subclones), and 2) the GN cells (with the GN10, GN11 and NLT subclones). GT1 cells have been obtained from a hypothalamic tumor and exhibit the properties of fully mature GnRH secreting neurons after they reached their final destination in the hypothalamus starting from the olfactory placode. Because of their characteristics GT1 cells have been mainly utilized to investigate the secretory properties of GnRH neurons and to identify the inputs modulating their activity. By this way a consistent number of receptors responding to specific ligands (neurotransmitters, hormones, growth factors) controlling GnRH synthesis and secretion has been identified. GN cells have been derived from a tumor of the olfactory bulb and are considered to replicate the properties of immature GnRH secreting neurons still retaining the capacity of moving. Consequently these cells are used to identify and characterize the factors influencing the migratory process of GnRH neurons from the olfactory placode to the hypothalamus. It has been found that factors stimulating GnRH neuron motility include anosmin, the protein encoded by the KAL1 gene, whose mutations lead to the form of hypogonadotropic hypogonadism known as Kallmann’s syndrome, growth factors such as fibroblast growth factor, hepatocyte growth factor, vascular endothelial growth factor, and cytoskeleton associated proteins (stathmin). On the contrary GABA agonists and glucocorticoids depress GN cells motility. As a whole the findings reported in this review seem particularly important to provide further information on the central...

Stimulatory effects of gonadotropin-releasing hormone and dopamine on growth hormone release and growth hormone mRNA expression in Epinephelus coioides / 生理学报

Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and dopamine (DA) can stimulate growth hormone (GH) release, but their effects on GH mRNA synthesis are controversial and deficient in fish. Orange-spotted grouper (Epinephelus coioides) is a hermaphroditic marine fish with sex reversal. Few data are available concerning the regulation of GH in grouper. In the present study, the effects of GnRH and DA on GH release and GH mRNA expression were determined using pituitary fragments of orange-spotted grouper under static culture conditions. After incubation from 1 h to 24 h, salmon GnRH (sGnRH, 100 nmol/L) stimulated the release of GH and increased the level of GH mRNA time-dependently. The minimum duration of sGnRH effect was 1 h. Both of sGnRH and mammalian GnRH (mGnRH) augmented the release of GH and the level of GH mRNA in a dose-dependent manner. The potency of sGnRH on both GH release and GH mRNA level was more pronounced than that of mGnRH. The effects of 1 micromol/L APO (Apomorphine), an agonist of D(1)/ D(2) dopamine receptors, significantly stimulated GH release and GH mRNA synthesis after incubation for 12 h. APO stimulated GH release and GH mRNA abundance in a dose-dependent manner. These results demonstrate that both GnRH and DA directly stimulate GH release and GH mRNA expression at the pituitary level, the actions of GnRH are more potent than that of DA in orange-spotted grouper.

The Combined Pituitary Stimulation Test in Patients Suffered from Massive Postpartum Hemorrhage / 대한내분비학회지

BACKGROUND: ackground: Sheehan's syndrome secondary to severe postpartum hemorrhage is one of the major causes of pituitary insufficiency in Korea. Most of these patients do not manifest symptoms or signs of gross endocrinopathies. Earlier detection of pituitary insufficiency is of clinical importance. The combined pituitary stimulation test that uses the four hypothalamic releasing hormones is a rapid, safe, and effective way to evaluate anterior pituitary function. However, the criteria for a normal response has not been established in Korea. METHODS: Combined anterior pituitary stimulation tests were performed on fourteen healthy women who had no history of endocrine disease. Combined tests of anterior pituitary reserve were done no forty-five patients who suffered from massive postpartum hemorrhage which required transfusing, along with subsequent shock or changing consciousness and in thirty-nine patients who experienced mild postpartum hemorrhage. RESULTS: 1) In the severe hemorrhage group, thirty-three of forty-five women (73.3%) showed blunted responses in more than one of the anterior pituitary hormones in the combined pituitary stimulation tests. However, in the mild hemorrhage group, only eighteen of thirty-nine women (46.2%) demonstrated blunted responses of more than one of the anterior pituitary hormones. 2) In the severe hemorrhage group, the TSH response was blunted in twenty-five patients (55.6%), prolactin in eleven patients (24.4%), ACTH in ten patients (22.2%), LH in ten patients (22.2%), GH in nine patients (20%), and FSH in five patients (11.1%). 3) The results of combined pituitary stimulation tests in the normal control group were different from the results of other studies. CONCLUSION: It is recommended that the women who experienced a severe postpartum hemorrhage should be evaluated by using the combined pituitary stimulation test. Moreover, criteria for a normal response to the combined pituitary stimulation test should be established in Korea.

Estudio prospectivo randomizado comparando la via de administración subcutáneas vs. la via intramuscular de depósito de acetato de leuprolide en técnicas de reproducción asistida / Randomized study comparing subcutaneous administration of vial vs. the intramuscular vial of acetate in techniques assited reproduction

Comparar los resultados en técnicas de reproducción asistida (ART) empleando dos vias diferentes de administración de análogos de GnRH (diario vs. depósito9

Efectos de los agonistas de GnRH sobre la supresión hormonal, menstrual y endometrial en endometriosis. Revisión / Effects of GnRH agonists on hormonal supression menstrual and endometrial in endometriosis

La síntesis de análogos de hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) ha permitido manipular, de manera segura y eficaz, el estado hormonal de las mujeres con endometriosis y crear un estado hipoestrogénico reversible, que ocasiona reducción en los implantes endometriósicos y mejoría de la sintomatología, sin los efectos adversos que se observan con el danazol

Evaluación neuroendocrinológica e histopatológica de pacientes azoospérmicos normogonadotrópicos: utilidad de la prueba de estimulación con GnRH / Neuroendocrinologic and histopathologic evaluation of azoospermic, normogonadotropic patientes: usefulness of GnRH challenge test

Se valoró el efecto de la administración de hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) sobre las concentraciones séricas de FSH y LH, Se correlacionaron estos resultados con los hallazgos histopatológicos de biopsias testiculares obtenidas de pacientes azoospérmicos normogonadotrópicos. Se trató de un estudio prospectivo, con grupo testigo. Tuvo lugar en Clínica de Biología de la Reproducción, Centro Hospitalario " 20 de Noviembre" ISSSTE. Quince varones azoospérmicos normogonadotrópicos, sin atrofia testicular. Así como un grupo testigo de diez pacientes sanos. Se realizó una prueba de estimulación con GnRH en ambos grupos y dos días después se efectuó biopsia testicular a los pacientes azoospérmicos. Determinación de las concentraciones séricas de FSH y LH. Además, examen anatomopatológico de las biopsias de testículo. No hubo diferencia significativa en los valores de LH de los dos grupos antes ni después de aplicar la GnRH. Se encontró diferencia significativa en los niveles de FSH, siendo ésto más elevados en los pacientes azoospérmicos. Entre mayor fue el daño testicular, hubo tendencia a que los pacientes presentaran hiperrespuesta de la FSH a la GnRH. La prueba de estimulación con GnRH en pacientes azoospérmicos normogonadotrópicos es útil para detectar casos de lesión gonadal. Entre mayor se la respuesta de la FSH, es más probable que haya alteración histológica del testículo

Interacción entre la liberación de calcio intracelular y la entrada de calcio activada por despolarización en la respuesta de los gonadotrofos de rata a la hormona liberadora de gonadotrofinas / Interaction between intracellular calcium release and calcium intake activated by depolarization in response of rats gonadotrops to gonadotropin releasing hormone

En los gonadotrofos de la hipófisis anterior coexisten la liberación de calcio desde depósitos intracelulares, mediada por inositol 1,4,5 trifosfato )InsP3) y la expresión de canales de calcio activados por despolarización de la membrana plasmática. Para estudiar la posible interacción entre ambos modos de control de la concentración citosólica de calcio ([Ca2+]­), se estudió el comportamiento del potencial de membrana (Vm) de gonadotrofos de rata en cultivo primario, demostrándose que éstas son células excitables. En presencia de la hormona liberadora de gonadotrofinas (GnRH) el disparo espontáneo de potenciales de acción, resultado de la apertura de canales de calcio tipo L, es interrumpido por períodos de hiperpolarización repetitivos; esta hiperpolarización es la consecuencia de la activación por calcio de canales de potasio, bloqueables por apamina (Ik(Ca)). La activación de la (Ik(Ca)) en respuesta al GnRH extracelular puede ser imitada por la aplicación intracelular de InsP3 y es suprimida al bloquear la ATPasa transportadora de calcio del retículo endoplasmático (RE). Estos resultados sugieren que la liberación episódica de calcio desde el RE determina el comportamiento de Vm de los gonadotrofos. Para estudiar la influencia recíproca del Vm sobre los mecanismos de liberación de calcio desde el RE, se utilizó la Ik(Ca) como indicador de la [Ca2+]­ bajo fijación del potencial de la membrana plasmática. El inicio de la liberación de calcio desde el RE en respuesta al GnRH es independiente del Vm; sin embargo la mantención de la amplitud de las espigas de la [Ca2+]­, después de 3 a 10 minutos en presencia del agonista, necesita de la despolarización de la membrana plasmática. El rango de Vm en el cual se observa este fenómeno, así como la disminución de la amplitud de las espigas de la [Ca2+]­ al exponer las células a bloqueadores de canales de calcio de tipo L, es compatible con la idea de que la entrada de calcio a través de éstos, contribuye a la recarga de RE. Por otra parte, el flujo de calcio desde el medio extracelular durante los potenciales de acción participa en la determinación de la frecuencia a la que ocurren los episodios de liberación de calcio desde el RE, a través de un mecanismo compatible con un efecto potenciador del calcio sobre la liberación de calcio inducida por InsP3

Diabetic neuropathies in males: circadian variation in pituitary gonadal hormonal release

The circadian variation in plasma levels of prolactin, gonadotropins, testosterone and glucose were studied in 26 insulin dependent diabetic male [IDDM] patients. Sixteen patients were asymptomatic without neuropathy and ten patients had established neuropathy with organic impotence. The results of this study indicate that diurnal levels of luteinizing hormone [LH], follicle stimulating hormone [FSH], prolactin [PRL] and testosterone [T] are similar in diabetic patients with and without neuropathy. During the nocturnal period, a sleep related increase in plasma prolactin and testosterone levels were obtained in the diabetic patients without neuropathy. In diabetic patients with neuropathy, plasma prolactin and testosterone levels were similar during the diurnal and nocturnal period. These results support previous findings that diabetic patients with neuropathy do not have abnormal gonadotropins and testosterone levels

Inmunización con hormona liberadora de gonodatropinas / Immunization with gonodatropins-releasing hormone

El uso de la inmunización contra la hormana liberadora de gonadotropinas (GnRH), es un método empleado con fines contraceptivos. Se estudió el efecto de una vacuna de GnHR unida al toxoide diftérico sobre el aparato reproductor de la rata blanca adulta y los niveles plasmáticos de testosterona (T). Se encontró que al tercer mes de haber sido inmunizados los animales con GnHR se produjo una significativa pérdida de peso de los testículos, vesículas seminales y próstata. El peso corporal no se afectó. Al estudio histológico se encontró que en los testículos existía una marcada afectación en la espermatogénesis, llegando en algunos animales a haber solamente células de Sertoli. Se concluye que la combinación empleada de GnHR con el toxoide diftérico, así como el esquema de vacunación empleado afectan profundamente al aparato reproductor de la rata. Desconocemos si el proceso deletéreo inducido por la vacunación es reversible o no

Manejo simplificado de un programa de fertilización in vitro / Simplify management of an in vitro fertilization programme

El desarrollo de la fertilización in vitro ha acelerado significativamente el conocimiento de la fisiología reproductiva humana. Los resultados obtenidos han demostrado ser consistentes y reproductibles en diferentes centros de medicina reproductiva en casi todo el mundo. Es sabido que la repetición de la técnica se traduce en tasas acumuladas de embarazo de hasta 60 por ciento Sin embargo, en casos de falla del método, la mayor limitante a los nuevos intentos es, por un lado su costo económico y por otro las opciones quirúrgicas de la técnica. En este estudio se presentan los resultados de un programa que ha intentado simplificar la técnica mediante: el empleo de transferencias no quirúrgicas; el monitoreo ecográfico de la inducción de ovulación y la disminución de la dosis de agonistas de la hormona liberadora de gonadotropinas para la supresión del eje hipotálamo hipófisis. Los resultados en 47 de estos ciclos no muestran diferencias significativas, respecto de la literatura, en lo referente al porcentaje de madurez ovocitaria, la tasa de fertilización y clivaje. La tasa de embarazo por aspiración es de 28,6 por ciento y de 32,3 por ciento por transferencia. Concluimos que el usoi del ultrasonido vaginal como único elemento de monitoreo de la inducción de ovulación, y el uso casi exclusivo de transferencias no quirúrgicas no parecen alterar los resultados

Agonistas de GnRH en ginecología II / Agonists of GnRH in gynecology II

La presente revisión tiene como objeto describir las características químicas y farmacológicas de los análogos de GnRH y las indicaciones actuales de su uso en ginecología. Se realiza una revisión crítica del uso de análogos de GnRH en: Anticoncepción Reproducción asistida, Miomatosis uterina, Endometriosis, Poliquistosis ovárica, Pubertad precoz, Síndrome de tensión premenstrual y cáncer de mama.

Agonistas de GnRH en ginecología I / Agonist of GnRH in gynecology I

La presente revisión tiene como objeto describir las características químicas y farmacológicas de los análogos de GnRh y las indicaciones actuales de sus uso en ginecología. Se realiza una revisión crítica del uso de análogos de GnRH en: Anticoncepción, Reproducción Asistida, Miomatosis Uterina, Endometriosis, Poliquistosis ovárica, Pubertad Precoz, Síndrome de Tensión Premenstrual y Cáncer de mama.

Respuesta hipofisaria a la hormona liberadora de gonadotropinas (LHRH) en pacientes con hiperlipoproteinemia primaria / Hypophyseal response to luteinizing hormone relesing hormone in patients with primary hyperlipoproteinemia

Se estudió la respuesta gonadotrópica a la hormona liberadora de gonadotropinas en 12 pacientes con hiperlipoproteinemia primaria. Se compararon los resultados con los obtenidos en un grupo control de hombres normales, la evaluación estadística se realizó por medio del análisis de varianza y la prueba t de Student. Se constató una respuesta exagerada de la hormona foliculoestimulante a la LHRH, lo cual sugiere que en estos pacientes existe un daño testicualr primario al nivel de los tubos seminíferos. La respuesta de la hormona luteinizante fue similar en los pacientes y en los controles. Los resultados indican que en los pacientes con hiperlipoproteinemia primaria, la reserva gonadotrópica hipofisaria está conservada y en ellos parece existir un daño primario de los tubos seminíferos

Reproducción inducida de la cachama, Colossoma macropumum con extracto hipofisiario y un análogo de la hormona de la gonodotropinas (LHRH-A) / Induced reproduction of the cachama, Colossoma macropomum with hypophysial extract (EH) and with an analog og gonadotropin hormone releasing hormone (LHRH-A)

Hembras adultas de cachama C. macropomum en la etapa de desove, fueron inyectadas intraperitonealmente con 5 mg/Kg de peso corporal de extracto hipofisiario (EH) de cachama obtenido de ejemplares adultos capturados en el príodo de predesove sólo o en combinación con un análogo de la hormona liberadora de la hormona luteinizante ([desGLI10D-Ala6] LHRH etilamida) (LHRH-A) (50 *g/kg de peso corporal), administrada 12 horas después de la administración de EH. La administración de EH produjo el desove en 2 de los 5 animales tratados. Una inyección de EH seguida 12 horas más tarde de LHRH-A causó un 60%de desove. La calidad de los huevos fué mejor en los animales inyectados con EH que en los tratados con la combinación de EH+LHRH-A

Bromocriptina na síndrome dos ovários policísticos: uma revisäo / Bromocriptine in polycystuc ovary syndrome: a review

A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é uma entidade cuja fisiopatologia näo está totalmente esclarecida e os tratamentos propostos apresentam resultados variáveis e insatisfatórios. A possibilidade de que alteraçöes dopaminérgicas hipotalâmicas ocasionassem um distúrbio na secreçäo do hormônio liberador das gonadotrofinas (GnRH) e, em conseqüência, um aumento exagerado do hormônio luteinizante (LH), levou autores a utilizar a bromocriptina (BRC), um potente agonista da dopamina, no tratamento desta síndrome. No entranto, os resultados têm sido confiltrantes, havendo que descrevem sucesso de seu uso e outros que näo conseguiram demonstrar sua utitlidade. Nós revisamos a literatura disponível sobre o controle da secreçäo do LH pela dopamina (DA), as discrepância existentes com o uso da BRC na SOP e os mecanismos de açäo que podem estar envolvidos. Concluímos que a utilidade da BRC na SOP bem como seu mecanismo de açäo, necessitam de trabalhos adicionais para melhor esclarecimento

Use of blocking ELISA additivity test and antibody-antibody competition technique for analysis of recognition ability of monoclonal anti-gonadotropin releasing hormone antibodies.

Monoclonal anti-GnRH antibodies reacting to the heptapeptide 4-10 (H-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-OH) were isolated by affinity chromatography using Sepharose 4B-heptapeptide (4-10) column. The ELISA additivity test and antibody-antibody competition techniques were used to study whether the affinity purified MoAb (A-MoAb) fraction recognize the sequence or the conformation of the native hormone. All four A-MoAbs, P862, P778, P764 and P813, were able to recognize the common epitope and did not allow to bind the conventional anti-GnRH antibodies (CoAbs) indicating that the CoAbs were conformation specific. Similarly in antibody-antibody competition technique, all A-MoAbs were able to compete with CoAbs, indicating that MoAbs were generated against the conformation of GnRH involving the entire molecule.

Monoclonal anti-gonadotropin releasing hormone (GnRH) antibodies reacting to sequence of GnRH preferentially recognize to native hormone.

Monoclonal anti-GnRH antibodies (MoAbs) P862, P778, P813 and P764 reacted optimally to native GnRH and poorly to GnRH(OH) of sequence 4-6, 7-10, 4-10 and 1-10. The heptapeptide 4-10 showed maximum reactivity amongst the four peptides tested for immunoreactivity. Sepharose 4B-GnRH(OH)4-10 (H-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-OH) column was therefore used to purify the fraction of MoAb reacting to this sequence. The affinity purified MoAbs (A-MoAbs) were further characterized for their binding to the different sequences and affinity with native GnRH. The binding, cross-reactivity and affinity characteristics of A-MoAbs were comparable with those of MoAbs. Immunoreactivity of A-MoAbs was also observed to be partly regained when GnRH(OH)1-10 was coupled to Lys, Lys-MDP or H-Ala-Ala-Thr-Lys-Pro-Arg-OH. These observations clearly demonstrate that MoAbs were neither contaminated nor were sequence specific but were directed against the conformation of the molecule.