Avaliação da zinco protoporfirina (ZPP) em ruminantes domésticos / Zinc protoporphyrin (ZPP) evaluation in domestic ruminants

Nos sistemas de criação de ruminantes, a anemia crônica pode levar a grandes prejuízos econômicos, sendo decorrente da deficiência de ferro no organismo. Quando este se torna indisponível para ser incorporado à hemoglobina, forma-se um composto denominado zinco protoporfirina (ZPP), que pode ser um marcador precoce para a anemia, útil, portanto, para seu diagnóstico. Porém, para a utilidade dessa mensuração, é necessário que se conheçam os valores normais de ZPP para cada espécie. Assim, foram utilizados 30 bezerros, 30 caprinos e 30 ovinos, todos saudáveis, nos quais foram mensurados esses valores. Essa mensuração foi determinada em amostras de sangue refrigeradas, coletadas com EDTA, obtendo-se valores em hemácias não lavadas e lavadas. A lavagem visou à eliminação de substâncias interferentes nessas medidas. A média da ZPP nas amostras não lavadas foi de 80,9µmol ZPP/mol de heme nos bezerros; 55,09µmol ZPP/mol de heme nos caprinos e 73,76µmol ZPP/mol de heme nos ovinos. Após a lavagem, os valores foram 61,4µmol ZPP/mol de heme; 43,92µmol ZPP/mol de heme e 59,36µmol ZPP/mol de heme, nos bezerros, caprinos e ovinos, respectivamente. Devido à praticidade da técnica, essa pode ser empregada para a detecção precoce da anemia ferropriva, sendo recomendada a prévia lavagem das hemácias.(AU)

In ruminant breeding systems, chronic anemia can lead to economic losses, resulting from iron deficiency in the organismo. When iron is unavailable for incorporation into hemoglobin, a compound called zinc protoporphyrin (ZPP) is formed, may be an early marker for anemia and is useful for its diagnosis. However, for this measurement to be useful, it is necessary to know the normal values for the species. Therefore, 30 calves, 30 goats and 30 sheep, all of them healthy, to standardize the values were used. This measurement was determined on refrigerated blood samples collected with EDTA, obtaining values in red blood cells not washed and washed. The washing aimed at the elimination of interfering substances in these measures. The mean of the ZPP in the unwashed samples was 80,9µmol ZPP/mol of heme in calves; 55,09µmol ZPP/mol of heme in goats and 73,76µmol ZPP/mol of heme in sheep. After washing, the values were 61,4µmol ZPP/mol of heme; 43,92µmol ZPP/mol of heme e 59,36µmol ZPP/mol of heme, in calves, goats and sheep, respectively. Due to its practicality, the techniquecan be used for the early detection of iron deficiency anemia, recommending the previous lavage of the red blood cells.(AU)

Envolvimento da CaMKII no efeito proliferativo do heme(Fe-Protoporfirina IX)em Trypanosoma cruzi / Envolvement of the CaMKII in the proliferativo effect of the heme(Fe-Protoporfirina IX)em Trypanosoma cruzi

O Trypanossoma cruzi é o agente etiológico da Doença de Chagas, que é transmitida através de insetos vetores triatomíneos durante a alimentação no hospedeiro vertebrado. A doença de Chagas é um grave problema na América Latina, e apesar disso a quimioterapia existente para a doença ainda não é satisfatória, sendo pouco eficaz em seus estágios avançados, além de ser extremamente tóxica para o hospedeiro. Os triatomíneos chegam a ingerir em sangue, de 6 a 12 vezes o seu peso original, ingerindo numa única alimentação cerca de 10 mM de heme ligado à hemoglobina. Como a forma epimastigota de T. cruzi vive em constante presença de heme, começamos a investigar sua participação na proliferação do parasito como molécula sinalizadora. No presente trabalho testamos diversos inibidores de proteínas quinases in vitro. Somente o KN93 (2M), inibidor de quinases dependentes de Ca2+/CaM (multifuncionais), teve um efeito inibitório da ação do heme, enquanto os demais inibidores não alteraram a proliferação destas células. Quando utilizado o KN92, um análogo sem atividade inibitória, este não apresentou efeito, mostrando então a especificidade do KN93. A fim de identificar qual CaMK está envolvida na proliferação mediada por heme, testamos o peptídeo Myr-AIP, um inibidor altamente específico e potente, derivado do substrato da CaMKII, e observamos que a adição do inibidor na cultura bloqueou a proliferação dos parasitos na presença de heme, confirmando o efeito específico sobre a proliferação mediada por heme, e o envolvimento da via da CaMKII. Através da técnica de western blotting mostramos o aumento da fosforilação da CaMKII na presença de heme, confirmando o envolvimento da CaMKII nesse processo. Posteriormente, ensaiamos a atividade da CaMKII utilizando uma CaMKII recombinante comercial. Vimos que a adição de heme 300 ?M no meio de reação aumentou a atividade enzimática cerca de 10 vezes, corroborando o resultado obtido no western blotting, e sugerindo a existência de dif...

Effects of Heme Oxygenase-1 Inducer and Inhibitor on Experimental Autoimmune Uveoretinitis

PURPOSE: Experimental autoimmune uveoretinitis (EAU) is an animal model of posterior uveitis and heme oxygenase-1 (HO-1) is a well-known anti-oxidant factor. However, there is no report a protective role of HO-1 on EAU in vivo. To verify that HO-1 is induced in EAU by interphotoreceptor retinoid-binding protein (IRBP), that an HO-1 inducers ameliorates the associated inflammation, and that an HO-1 inhibitor exacerbates this inflammation. METHODS: Forty four Lewis rats were given either 40 mol/kg hemin or 40 mol/kg SnPP (tin protoporphyrin IX) by intraperitoneal injection and twenty two uveitis control rats were injected with 0.5 mL of saline once daily 5-20 days after IRBP immunization inducing EAU. Three normal control rats were used for Western blotting and ELISA assay of HO-1. The clinical uveitis signs of inflammation were scored in the three groups from 0 to 4 on alternate three days. To confirm the clinical results, histological and immunohistochemical stain of HO-1 were performed on the day of peak inflammation and Western blotting and ELISA assay of HO-1 were performed on 6th, 12th and 18th day after IRBP immunization. RESULTS: Hemin, an inducer of HO-1, ameliorated the clinical signs of EAU. In contrast, SnPP-treated rats show that the severity of the clinical sign were exacerbated at the peak period of the disease. These results are roughly compatible with histological, immunoblotting, and immunohistochemical evaluations and an ELISA assay of HO-1. CONCLUSIONS: We suggest that HO-1 plays an important protective role in EAU.

Síndrome de Rotor: apresentaçäo de um caso

Os autores apresentam um caso de síndrome de Rotor em paciente de 65 anos que desde os 10 anos apresenta icterícia assintomática, por hiperbilirrubinemia conjugada. A presença de colecistite calculosa e a operaçäo realizada mostraram a perfeita integridade do fígado e ductos biliares