Cell accumulation and antileishmanial effect of exogenous and endogenous protoporphyrin IX after photodynamic treatment / Acumulación celular y efecto anti- Leishmania de la protoporfirina IX exógena y endógena después del tratamiento fotodinámico

Introduction: Photodynamic therapy (PDT) using 5-aminolevulinic acid-induced protoporphyrin IX (ALA-PpIX) constitutes an interesting alternative for cutaneous leishmaniasis treatment. Objective: To evaluate the production of PpIXbased on the administration of ALA and MAL and the effect of ALA-PDTat cellular level on non-infected and infected THP-1 cells using Leishmania ( Viannia ) panamensis or Leishmania ( Leishmania ) infantum (syn Leishmania chagasi ) parasites. Materials and methods: Protoporphyrin IX (PpIX) production and mitochondrial colocalization were evaluated by confocal microscopy. Cell toxicities were evaluated after treatment with the compounds, followed by light irradiation (597-752 nm) at 2.5 J/cm 2 fluency using a colorimetric MTT assay for THP-1 cells and a standard microscopic analysis of parasites. Results were expressed as compound concentration activity against 50% of cells or parasites (CC 50 or IC 50 ). Results: ALA or MAL induced an endogenous PpIX with a red fluorescence localized mainly in the mitochondria inside human cells. ALA and MAL-PDT induced a similar range of toxicities on THP-1 cells (CC 50 0.16±0.01mM and 0.33±0.019 mM, respectively) without any apparent inhibition of intracellular parasites in the infected cells as compared to untreated controls. Exogenous PpIX-PDT was toxic to THP-1 cells (CC 50 0.00032±0.00002 mM), L. (L.) infantum (IC 50 0.003±0.0001 mM) and L. (V.) panamensis (IC 50 0.024±0.0001 mM) promastigotes. Conclusions: Despite the effectiveness of exogenous PpIX on promastigotes and the production of PpIX by human infected cells, treatment with ALA or MAL before irradiation was unable to completely destroy L. (L.) infantum or L. (V.) panamensis intracellular amastigotes.

Introducción. El tratamiento fotodinámico con ácido 5-aminolevulínico como inductor de la protoporfirina IX (ALA-PpIX) constituye una alternativa interesante en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea. Objetivo. Evaluar la producción de protoporfirina IX (PpIX) a partir de la administración de ALA o MAL y el efecto de la PDT con ALA a nivel celular en células THP-1 no infectadas e infectadas con Leishmania ( Viannia ) panamensis o Leishmania ( Leishmania ) infantum (syn. Leishmania chagasi ). Materiales y métodos. La producción de protoporfirina IX y su ‘colocalización´ mitocondrial se evaluaron mediante microscopía ‘confocal´. Se evaluó la toxicidad celular después del tratamiento con los compuestos y la aplicación de irradiación de luz (597-752 nm) en una fluencia de 2,5 J/cm 2 mediante el empleo de la prueba colorimétrica con metil-tiazol-tetrazolio (MTT) en las células, y de métodos microscópicos estándar en los parásitos. Los resultados se expresaron como la concentración del compuesto activo en el 50 % de las células o parásitos (CC 50 o CI 50 ). Resultados. El ácido aminolevulínico o el metil-5-aminolevulinato indujeron la protoporfirina IX endógena en células humanas, y se observó fluorescencia de color rojo en las mitocondrias. La actividad del ácido aminolevulínico y del metil-5-aminolevulinato utilizados con terapia fotodinámica fue similar en las células THP-1 (CC 50 0,16±0,01 mM y 0,33±0,019 mM, respectivamente) y, aparentemente, no inhibió los parásitos en las células infectadas, en comparación con los controles. El tratamiento exógeno con protoporfirina IX y terapia fotodinámica fue tóxico para las células THP-1 (CC 50 0,00032 ±0,00002 mM) y para los promastigotes de L. (L .) infantum (IC 50 0,003±0,0001 mM) y L. ( V .) panamensis (CI 50 0,024±0,0001 mM). Conclusiones. A pesar de la ‘fotoactividad´ del tratamiento con protoporfirina IX en promastigotes y de su producción después del tratamiento con ácido aminolevulínico y metil-5-aminolevulinato en las células infectadas con Leishmania , no se observó daño en los amastigotes presentes en las células de L. ( L .) infantum o L . ( V .) panamensis .

Repercusión de la anemia ligera por deficiencia de hierro sobre el desarrollo psicomoto en niños de 6 a 19 meses de edad / Repercusion of mild anemia due to iron deficiency upon psychomotor development in children 6-19 months of age

Se evaluaron 90 niños saludables entre 6 y 19 meses de edad, con el objeto de conocer la relación de la anemia por deficiencia de hierro con el desarrollo psicomotor. Se clasificaron en deficientes según el número de indicadores de la deficiencia de hierro alterados, y se hallaron valores promedio del índice mental significativamente más bajos en el grupo deficiente. No se encontró correlación significativa del nivel socioeconómico y cultural con el índice mental ni el índice motro. Se hallaron correlaciones significativas del índice mental con la hemoglobina y del índice mental con la protoporfirina eritrocitaria libre. Se concluye que las alteraciones del índice mental halladas en el presente estudio plantean, con una elevada probabilidad, la influencia de la deficiencia de hierro, dada en una de las muestras más numerosas y con anemia con deficiencia de hierro más ligera informada hasta el presente, después de descartar la presencia de otras carencias nutricionales, así como de un grupo de factores demográficos, sociales y del estado de salud

Análisis de los valores de protoporfirina eritrocitaria libre, en escolares de una zona urbana de Buenos Aires / Free erythrocyte protoporphyrins study in school-children of Buenos Aires city

El aumento de la Protoporfirina Eritrocitaria Libre (FEP), detecta deficiencias marginales de hierro (Fe), constituyendo un indicador precoz que, a las características de simplicidad y rapidez, une las de su determinación en una muestra mínima de sangre de fácil conservación. Pese a esta ventajas, ha sido poco utilizada en estudios poblacionales, salvo en USA, donde su aplicación en la II Nutritional and National Health Examination Survey (NANHES II), ha permitido establecer valores normativos para las diferentes edades. En este trabajo, se aporta información sobre los valores hallados en una población escolar (n = 102), perteneciente al nivel socio-económico bajo y medio-bajo de la ciudad de Buenos Aires, en la que se determinó Hematocrito (Hto) y FEP (según Piomelli). Los resultados, expresados como FEP/dL de glóbulos rojos (FEP/dLg.r.), se agruparon de acuerdo con intervalos de edad y se compararon: a)entre sí, mediante análisis de varianza; b)con los valores normativos derivados de NHANES II, para los mismos rangos de edad. El 99%de la población mostró valores normales de Hto, y de FEP/dL g.r. Los promedios de FEP/dLg.r., para los datos agrupados por años de edad cumplida, no presentaron diferencias estadísticamente significativas: 40ñ22; 23ñ17; 25ñ14; 29ñ13; 31ñ15; 29ñ15; 28ñ20; 32ñ12; 30ñ30 (4 a 12 años, respectivamente). Estos valores fueron sensiblemente inferiores a los considerados normales en NHANES II y en el 90%de los casos inferiores a los de su mediana. Se observó correspondencia entre el valor de la mediana y el percentilo 5 de la población norteamericana. Los valores obtenidos para la mediana y percentilo 95 fueron, respectivamente: < 5 años: 25 & 55; 6-8 años: 25 & 57; 9-11 años: 29 & 55; 12-13 años; 29 & 51

Nuevo indicador de la carencia de hierro: relación hemoglobina y protoporfirina eritrocitaria

La protoporfirna es metabolismo indispensable en al síntesis del HEM, pues su presencia hace posible que el hierro en estado ferroso se incorpore en su interior mediante la acción catalítica de una enzima mitrocondrial denominada ferroquetalasa o hem sintetasa y finalmente formarse el Hem. Este hecho puede alterarse ya sea, por un estado deficitário en hierro en forma crónica o por acumulación anormal de plomo. El estudio se realiza en 199 personas de la zona rural de Sto. Domingo de los Colorados, integrado por 87 hombres (43.72%) y 112 mujeres (56.28%). Los resultados nos permiten inferir la existencia de un estado deficitario de este mineral son: niños en crecimiento rápido (lactantes, preescolares y escolares), mujeres en edad fértil y mujeres embarazadas (no consideradas en este trabajo). En este presente estudio aproximadamente el 90% de las personas pertencientes a estos grupos señalados presentan algún trastorno relacionado con el metabolismo del hierro, definido por una disminución en la concentración sanguínea de hemoglobina y un aumento en la concentración de protoporfirina eritrocitaria. Con el presente estudio pretendemos insistir en el uso de indicadores adecuados y técnicas de laboratório fáciles y fiables para determinar el estado de hierro en el organismo

Significado biológico de la separación de porfirinas intravesiculares del metacestodo de Taenia solium con técnicas de cromatografía en capa fina y electroforesis / Biological significance of the separation of intravesicular porphyrins of the metacestode of Taenia solium with fine coat chromatography techniques and electrophoresis

Derrien en 1927 describe la presencia de sustancias fluorescentes (protoporfirinas) en el líquido intraquístico del metacéstodo de Taenia solium, la literatura europea y soviética comunican su aplicación como un método práctico para el diagnóstico de la cisticercosis bovina y porcina. El presente trabajo describe y cuantífica por Espectofotometría visible y fluorometría una mezcla de porfirinas (15 a 48 microgramos/por ml..), separadas por cromatografía en placa fina y electroforesis en acetato de celulosa, que revelan la presencia de 3 a 4 porfirinas con un máximo de 5 carboxilos libres, la demostración de esta singular porfirina requiere de un sistemático estudio de las vías biosintéticas y de su función biológica en el parásito, del papel patogénico en la relación huéspede-parásito (encefalitis, retinitis, vasculitis, miositis); su cuantificación en líquidos orgánicos representa una potencial ayuda diagnóstica, y su capacidad fotoexcitable con radioisótopos y energía radiante podría ser aplicada para una selectiva destrucción del parásito