ABSTRACT
Trofozoitos obtidos de cultura de Entamoeba histolytica isoladas e axenizadas no Brasil (ICB-CSP, ICB-462 e ICB-32) foram utilizados para a producao de soros imunes em coelhos e para a caracterizacao de antigenos atraves dos seus perfis eletroforetico e glicoproteico, em paralelo com uma cepa padrao isolada e axenizada nos Estados Unidos (HK-9). Obtiveram-se soros hiperimunes, reativos frente aos antigenos homologos e heterologos. As quatro cepas em estudo apresentaram perfis eletroforetico e glicoproteico complexos e semelhantes, compostos por polipeptideos com pesos moleculares variando de 200 kDa a menos de 29 kDa. Nao se detectaram diferencas significativas entre as cepas patogenicas e nao patogenicas.
Subject(s)
Animals , Rabbits , Antigens, Protozoan/isolation & purification , Entamoeba histolytica/immunology , Germ-Free Life , Complement Hemolytic Activity Assay , Electrophoresis, Polyacrylamide Gel , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Immune Sera , Receptors, Concanavalin A , Sodium Dodecyl SulfateABSTRACT
En trabajos anteriores se demostró que la acción inibitoria del esteroide delta HOP a altas concentraciones no era consecuencia de un efecto genómico como en el caso de los glucocorticoides. Para investigar si este efecto se producía a traves de la membrana plasmática, en este trabajo se estudió , en tromocitos de ratas, las alteraciones producidas por estos esteroides en la fuidez de la membrana por polarización de fluorescencia con 1,6-difenil-1, 3, 5-hexatrieno (DPH) y la movilidad de las proteínas de susperficie por la formación de "caps" con concanavalina A fluorescente (Con A-fl). La polarización de fluorescencia disminuyó con los glucocorticoides por aumento de la fluidez de la membrana, mientras que la alfa HOP no produjo ningún cambio. En los experimentos con Con A-fl se observó una disminución del inúmero de células con "cap" cuando se incubó con delta HOP y con los inhibidores de "caps" (citocalasina B y acida sódica), mientras que los glucocorticoides no tuvieron efecto inhibidor. El tratamiento "in vitro" con delta HOP o glucocorticoides produjo el mismo efecto que "in vitro". Estos resultados sugieren que la delta HOP actúa en forma superficial sobre la membrana plasmática, in hibiendo la movilidad de las proteínas de superficie, pero no alterando la fluidez de la bicapa lipídica