Analysis of immunostaining and western blotting of endothelin 1 and its receptors in mitral stenosis / Análise da expressão imunohistoquímica e de western blotting da endotelina 1 e seus receptores na estenose mitral

Abstract Introduction: Rheumatic Fever represents a serious public health problem in developing countries, with thousands of new cases each year. It is an autoimmune disease, which occurs in response to infection by streptococcus A. Objective: The aim of this study was to evaluate the immunolabeling and protein expression for endothelin-1 and 3 (ET-1, ET-3) and its receptors (ETA, ETB) in rheumatic mitral valves. Methods: Immunohistochemistry was used to identify ET-1/ET-3 and ETA/ETB receptors in rheumatic and control mitral valves. Quantitative analysis of immunostaining for ET-1/ET-3 and ETA/ETB receptors was performed. In addition, western blot analysis was carried out to assess protein levels in tissue samples. Results: ET-1 and ETA receptor immunostaining predominated in stenotic valves, mainly associated with fibrotic regions, inflammatory areas and neovascularization. Quantitative analysis showed that the average area with positive expression of ET-1 was 18.21±14.96%. For ETA and ETB, the mean expressed areas were respectively 15.06±13.13% and 9.20±11.09%. ET-3 did not have a significant expression. The correlation between the expression of both endothelin receptors were strongly positive (R=0.74, P=0.02), but the correlation between ET-1 and its receptor were negative for both ETA (R=-0.37, P=0.25), and ETB (R=-0.14, P=0.39). This data was supported by western blot analysis. Conclusion: The strong correlation between ET-1 and its receptors suggests that both play a role in the pathophysiology of rheumatic mitral valve stenosis and may potentially act as biomarkers of this disease. .

Resumo Introdução: A febre reumática representa um sério problema de saúde pública em países em desenvolvimento, com milhares de novos casos a cada ano. Ela é uma doença autoimune que ocorre em resposta à infecção por estreptococos do grupo A. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão proteica e imunohistoquímica para a endotelina-1 e 3 (ET-1 e ET-3) e seus receptores (ETA e ETB) em valvas mitrais reumáticas. Métodos: Imunohistoquímica foi utilizada para identificar receptores de ET1/ET3 e ETA/ETB em valvas mitrais reumáticas e controles. A análise quantitativa da expressão imunohistoquímica para receptores de ET1/ET3 e ETA/ETB foi também efetuada. Adicionalmente, foi feita análise do western blot para mensurar níveis de proteínas em extratos tissulares. Resultados: A expressão imunohistoquímica de ET-1 e de seu receptor predominou em valvas estenóticas, estando associada com regiões fibróticas, áreas inflamatórias e neovascularização. A análise quantitativa mostrou que a área média com expressão positiva para ET-1 foi de 18,21±14,96%. Para o ETA e o ETB, as áreas médias expressas foram, respectivamente, 15,06±13,13% e 9,20±11,09%. ET-3 não teve uma expressão significante. A correlação entre a expressão dos dois receptores de endotelina foi fortemente positiva (R=0,74, P=0,02); mas a correlação entre ET-1 e o seu receptor foi negativa tanto para ETA (R=-0,37, P=0,25) como para ETB (R=-0,14, P=0,39). Estes dados foram confirmados pela análise do western blot. Conclusão: A forte correlação entre ET-1 e seus receptores sugere que ambos têm papel importante na fisiopatologia da estenose mitral reumática, podendo potencialmente atuar como biomarcadores desta doença. .

Enfermedad reumática cardiovascular: observaciones anatomopatológicas en biopsias valvulares de jóvenes con menor e igual a 20 años de edad / Cardiovascular rheumatic disease: pathologic´s observations in biopsies valvulares of young people minor and equal 20 years of age

La fiebre reumática es una enfermedad endémica en los países en desarrollo como Venezuela y es causa importante de valvulopatía crónica progresiva, siendo primeramente afectado el aparato valvular mitral. Evaluar el aspecto morfológico de la valvulitis crónica en su etapa inicial, en individuos quienes han sido sometidos a reemplazo valvular mitral o mitro-aórtico. Se seleccionaron 20 biopsias de válvulas mitrales y mitro/aórticas diagnosticadas como valvulopatía crónica reumática, representativas de la etapa inicial, en pacientes con edad igual o menos de 20 años. Los diagnósticos pre-operatorios fueron: disfunción valvular severa mitral (insuficiencia (60%), doble lesión (10%) y estenosis (5%) y mitro-aórtica (25%). Las biopsias (valvas y aparatos valvulares mitrales) fueron evaluadas macroscópicamente. El estudio histológico se hizo con secciones teñidas con Hematoxilina-eosina e inmunomarcadas con anticuerpos CD 34 y antimúsculo liso. Todos los casos mostraron lesiones morfológicas propias de la valvulitis crónica reumática inicial: inflamación grado 1 (81,6%), con nódulos de Aschoff (35%), fibrosis de grado 2 (40%) y 3 (60%) Con una alta densidad de neovascularización (14,78 ± 1,92). Se hizo el análisis de los hallazgos morfológicos y se consideró que este trabajo puede servir de base para investigaciones comparativas con casos de etapas más avanzadas de la enfermedad valvular en relación a la inflamación, remodelado colágeno y angiogénesis.

Rheumatic fever is an endemic disease in developing countries such as Venezuela and is an important cause of progressive chronic valve disease, the mitral valve apparatus being affected in the first place. To evaluate the morphologic aspect of chronic valvulitis in its initial stage among individuals that have gone through mitral and mitro-aortic valve replacement. Twenty (20) biopsies of mitral and mitro-aortic valves diagnosed with rheumatic chronic valvulopathy in its initial stage were selected from patients aged 20 years or younger. Preoperating diagnoses were as follows: severe mitral valve dysfunction (insufficiency: 60%, double injury: 10%, stenosis: 5%, and mitro-aortic: 25%). The biopsy material (valve apparatuses) was macroscopically evaluated. A histological study was made on haematoxylin-eosin stained and CD34 antibody immunomarked sections and smooth antimuscle. All cases showed morphologic lesions typical of initial chronic rheumatic valvulitis: grade 1 inflammation (81,6%), with Aschoff's bodies or nodules (35%), grade 2 fibrosis (40%), and grade 3 fibrosis (60%) with high density neovascularization (14,78 ± 1,92). Morphologic findings were analyzed, thus concluding that this work can serve as a basis for comparative investigations on case of valvular disease at more advanced stages in terms of inflammation, collagen remodeling and angiogenesis.

Febre reumática / Rheumatic fever

A febre reumática (FR) é seqüela da infecção de orofaringe pelo estreptococo beta-hemolítico do grupo A, em 3 a 4% das crianças (3 a 18 anos) acometidas por faringoamidalite, e não tratadas, que apresentam fatores genéticos predispondo ao desenvolvimento da doença. A doença reumática cardíaca (DRC) é considerada...

Aspectos anatomopatológicos da febre reumática / Pathological aspects of the heart in rheumatic fever

A febre reumática é uma doença inflamatória, sistêmica e recorrente, que se manifesta cerca de uma a seis semanas após a infecção aguda da orofaringe por estreptococos beta-hemolíticos do grupo A. Presume-se que seja uma resposta imunológica a antígenos estreptocócicos ou uma reação auto-imune induzida pelos estreptococos, em indivíduos geneticamente suscetíveis. Acomete crianças de 5 a 15 anos, mas 20 por cento dos surtos iniciais ocorrem em indivíduos de meia idade ou idosos. No coração há comprometimento dos tecidos conjuntivos pericárdico, miocárdico e endocárdico. A pericardite é exuberante e predominantemente fibrinosa, com aspecto macroscópico de "pão com manteiga". A miocardite causa aumento cardíaco, principalmente por dilatação ventricular. No tecido conjuntivo cardíaco encontram-se nódulos de Aschoff, que retratam histologicamente as fases evolutivas da doença: exsudativa, proliferativa e cicatricial. O nódulo de Aschoff, na fase proliferativa, é patognomônico de atividade reumática, apresentando degeneração fibrinóide do colágeno e acúmulo de células inflamatórias, dentre elas as células de Anitsch-kow. Pequenas vegetações são encontradas nas linhas de fechamento valvar, mais comumente mitro-aórticas. Histologicamente são elevações da superfície valvar, decorrentes da deposição de fibrina e plaquetas ou da degeneração fibrinóide do colágeno local. O dano cardíaco é cumulativo, aumentando a cada episódio de atividade. As alterações reumáticas crônicas mais importantes resultam da cicatrização das lesões agudas valvares e podem ocorrer em todas as valvas. A estenose mitral é a seqüela reumática mais freqüente, seguida pela estenose mitro-aórtica e pela estenose aórtica isolada. Pode haver associação de estenose e insuficiência valvar, que é mais comum nas lesões aórticas.

Febre reumática / Rheumatic fever

O trabalho atualiza os diferentes aspectos da febre reumática, enfatizando os modernos conceitos acerca de sua patogenia, o quadro clínico, compreendendo artrite, cardite, coréia de Syndenham e outras manifestaçöes, bem como os dados laboratoriais, o diagnóstico diferencial, patologia e terapêutica. Neste particular, analisa a erradicaçäo do estreptococo, o tratamento das síndromes e a profilaxia secundária.

Tratamento da cardite reumática / Treatment of rheumatic carditis

A cardite reumática é responsável pela grande morbidade da febre reumática sendo o seu tratamento da maior importância para a reduçäo das complicaçöes e mortalidade associadas à doença. O tratamento pode ser dividido nas seguintes etapas: profilaxia primária, estabilizaçäo hemodinâmica, tratamento anti-inflamatório e profilaxia secundária. Algumas alternativas de tratamento, como pulsoterapia, seräo abordadas.

Patogênese da febre reumática / Pathogenesis of fever rheumatic

Os autores comentam que, para o surgimento da febre rumática, seria necessário, além do agente etiológico (streptococcus beta-hemolítico do grupo A), outros fatores ligados ao hospedeiro que influenciam a resposta imunológica do indivíduo. A hipótese da susceptibilidade genética e da teoria do mimetismo molecular, entre outros, pela qual determinamos anticorpos reagiriam contra proteínas cardíacas, seria uma das explicaçöes para o mecanismo patogênico desta doença. No futuro, a descoberta de um marcador genético poderá identificar populaçöes de risco, propiciando o desenvolvimento de uma vacina antiestreptocócica que, sem dúvida, modificará a história natural da febre reumática.

Reconhecimento da febre reumática sem cardite / Recognition of rheumatic fever without carditis

O diagnóstico da Febre Reumática é considerado um dos mais difíceis em Pediatria, pela falta de sinal, sintoma ou prova laboratorial patognomônica da doença. O autor discute o diagnóstico diferencial e a avaliação dos Critérios de Jones no diagnóstico da Febre Reumática.

O ecocardiograma na febre reumática / The echodopplercardiography in rheumatic fever

A capacidade da ecoDopplercardiografia em fornecer informaçöes relevantes sobre aspectos estruturais e funcionais do coração coloca este método diagnóstico em posição privilegiada na avaliação não invasiva de inúmeras afecçöes. Na Febre Reumática, a possibilidade de detectar alteraçöes na fase aguda bem como o acompanhamento da progressão da doença para a fase crônica, expandiu o potencial do método, que hoje contribui definitivamente na tomada de decisão clínica e cirúrgica desta cardiopatia.

O difícil diagnóstico diferencial entre atividade e cardite reumática / The difficult differential diagnosis between acute rheumatic fever and carditis

A febre reumática constitui-se, ainda hoje, na cardiopatia adquirida mais frequente na idade pediátrica em todo o mundo. O diagnóstico diferencial entre atividades e cardite reumática torna-se muitas vezes difícil, em vista da sintomatologia pouco específica das cardites leves na infância. É, no entanto, de importância fundamental, visto que influencia a conduta terapêutica e o prognóstico quanto a lesöes valvares crônicas. O diagnóstico efetivo da cardite faz-se na presença de cardiomegalia, sopro cardíaco patológico, pericardite ou quadro de insuficiência cardíaca congestiva.Corroboram ainda para o diagnóstico alteraçöes menos específicas, como a taquicardia persistenta, presença de arritmias, alteraçöes cardíacas podem ocorrer entre duas a cinco semanas após a instalação do quadro de artrite, aconselham-se avaliaçöes cardiológicas sequênciais, em caso de o paciente ser encaminhado logo no início do quadro, para evitar-se falha diagnóstica.

Rheumatic fever in Iranian children: clinical and preventive aspects

A total of 70 children aged 6 to 15 years with rheumatic fever and completed in-hospital data were reviewed from 1988 to 1993. In 58.6% of patients this was the first attack of disease, while in 41.4% the episode represented a recurrence. Noncompliance of antimicrobial prophylaxis was noted in all of the subjects with recurrences. 61.4% of cases gave a previous history of sore throat, and inappropriate or inadequate antibiotics had been prescribed for all of them. Carditis had occurred. In 76% of patients and 51% of them had developed heart failure. Congestive heart failure was three times more prevalent in recurrences than in initial attacks. The study showed an urgent requirement for a national training program for all health personnel [including doctors], along with the education of healthy children, patients, and their families in order to establish effective primary and secondary prophylaxis in this area

Fiebre reumática: rebrote en el adulto

La fiebre reumática (FR) ha sido definida como un proceso inmunológico sistémico, presente como secuela tardía de infecciones del tracto respiratorio superior, por el estreptococo Beta Hemolítico del grupo A de lancfiel. En su evolución puede adoptar un comportamiento agresivo causando lesiones inflamatorias con compromiso articular, cardíaca, tegumentario y del sistema nervioso central, con tendencia a la recidivas, o a remitir espontaneamente sin dejar huella. En vista de su polimorfismo sintomático y el comportamiento en los diferentes grupos etáreos, a propósito de un caso con rebrote en la edad adulta en forma florida, se realiza revisón de la bibliografía.

Fiebre reumática: un problema que persiste: aspectos clínicos-epidemiológicos / Rheumatic fever: a problem that clinical aspects: epidemiology

Se analiza sobre la base de una revisión bibliográfica casuística, sean locales e internacionales, la situación de la Fiebre Reumática (FR); aspectos clínicos-epidemiológicos de la enfermedad, como proceso sistémico, que afecta el tejido colágeno en general. tres series nacionales realizadas en el Hospital de Niños, en diferentes momentos, sirven de marco de referencia para avalar comentarios y conclusiones sobre la FR como problema de salud colectiva, que aún persiste a pesar de los progresos en la profilaxia. A raíz de los hallazgos del trabajo, la infección estreptococcica es muchas veces descuidada por los representantes y médicos en general, sea en la duración o dosis de la quimioprofilaxia

Histopatogenia de la fiebre reumática: revisión / Hystopatologic of the rheumatic fever: review

Se revisan diversos aspectos de la patogenia de la fiebre reumática (FR), entre ellos el mimetismo antigénico, toxicidad de subproductos, respuesta inmune celular, respuesta humoral y marcadores la (DR). Se incorpora a esta revisión asimismo los hallazgos histopatológicos de la FR, a partir del concepto de NOMICLOPASIA, que involucra a los sistemas fibroblástico e inmunológico, y que finalmente desembocan en las formas graves de la enfermedad, cardiopatía reumática crónica o valvulapatía mitro-aórtica con disfunción ventricular permanente. Se destaca la importancia de las recurrencias de la actividad reumática en la génesis de los fenómenos isquémicos. Finalmente se procede a la revisión de las diferentes formas de la enfermedad, particularmente las alteraciones encefálicas, la neumonitis reumática y la arteritis reumática

Colagenoses associadas / Associated collagen diseases

O autor apresenta um caso de associaçao entre febre reumática e poliarterite nodosa, duas colagenoses, com todo cortejo histológico descrito na literatura.