Comparison between two methods of scorpion venom milking in Morocco

Background The present study compared two methods used successfully in a large-scale program for the collection of scorpion venoms, namely the milking of adult scorpions via manual and electrical stimulation. Results Our immunobiochemical characterizations clearly demonstrate that regularly applied electrical stimulation obtains scorpion venom more easily and, most importantly, in greater quantity. Qualitatively, the electrically collected venom showed lack of hemolymph contaminants such as hemocyanin. In contrast, manual obtainment of venom subjects scorpions to maximal trauma, leading to hemocyanin secretion. Our study highlighted the importance of reducing scorpion trauma during venom milking. Conclusions In conclusion, to produce high quality antivenom with specific antibodies, it is necessary to collect venom by the gentler electrical stimulation method.(AU)

Group III PLA2 from the scorpion, Mesobuthus tamulus: cloning and recombinant expression in E. coli

Phospholipases A2 (PLA2) are enzymes that specifically hydrolyze the sn-2 fatty acid acyl bond of phospholipids, producing a free fatty acid and a lyso-phospholipid. We report the cloning and expression of a secretory phospholipase A2 (sPLA2) from Mesobuthus tamulus, Indian red scorpion. The nucleotide sequence codes for a 167 residue enzyme. The open reading frame codes for a 31 amino acid signal peptide followed by a mature portion of the protein. The primary structure shows the calcium binding motif, catalytic residues, 8 highly-conserved cysteines and C-terminal extension which classify it as a group III PLA2. The entire transcript was expressed in Escherichia coli and was purified by metal affinity chromatography under denaturing conditions. The protein was refolded by serial dilutions in the refolding buffer to its active form. Hemolytic assays indicate that the protein adopts a functional conformation. The functional requisites such as optimum pH of 8 and calcium dependency are shown. This report provides a simple but robust methodology for recombinant expression of toxic proteins.

Protección contra el alacranismo / Protectión agains scorpionism

En este capítulo se revisan algunos aspectos del problema del alacranismo en México. Se discuten algunos datos obtenidos con una vacuna experimental animal, para la cual el antígeno fue generado por polimerización de extractos solubles de glándulas venenosas de alacranes mexicanos. Se da énfasis a la discusión de los procedimientos y datos bioquímicos más importantes obtenidos en el fraccionamiento del veneno soluble extraído por estimulación eléctrica de telsons de alacranes vivos. También se mencionan algunas propiedades inmunológicas de los extractos de las glándulas, del veneno soluble, de sus fracciones cromatográficas y de sus polipéptidos altamente purificados. Finalmente, se presentan datos sobre la inmunización de ratones con péptidos sintéticos, diseñados con base en la secuencia de aminoácidos de las toxinas de alacranes. Las perspectivas futuras de este trabajo se enfocan a la determinación de los epítopos protectores de las toxinas del veneno y a la clonación y modificación por ingeniería genética de genes que codifican para estos péptidos tóxicos. No obstante el vasto trabajo experimental realizado, todavía no existe una vacuna disponible contra los efectos neurotóxicos del veneno de alacrán. Desde el punto de vista médico, el problema del envenenamiento por piquete de alacrán debe ser tratado mediante el uso del suero antialacrán, única medicina de elección para el tratamiento de los casos severos de accidentes con estos arácnidos