ABSTRACT
Lutzomyia longipalpis é o principal vetor da leishmaniose visceral americana (LVA), erepresenta um complexo de espécies crípticas. Trabalhos anteriores sugeriram a existência de quatroespécies com distribuições geográficas distintas: (1) espécie A- Lu. longipalpis sensu stricto Brasil(Exceto Roraima), (2) Laran espécie B = Lu. pseudolongipalpis (Venezuela), (3) cis-Andina espécie C(Colômbia, noroeste da Venezuela e incluíram Roraima no Brasil) e (4) trans-Andina espécie D(América Central). Além disso, experimentos com cruzamentos, análise dos sons de cópula, feromônios,microsatelites e genes que controlam o som de corte, sugeriram que as populações brasileiras deste vetorrepresentam diferentes espécies que podem ser divididas em dois grupos principais de acordo com o tipode som (Burst ou Pulsado) que machos produzem durante a cópula. No entanto, nenhuma diferençadiagnóstica foi observada entre esses dois grupos na maioria dos marcadores moleculares utilizados até omomento. Inicialmente analisamos a divergência molecular em um fragmento do gene paralytic, um locusenvolvido no controle dos sons de corte em Drosophila, entre diversas populações de Lu. longipalpis doBrasil produzindo sons do tipo Burst ou Pulsado. Comparamos também Lu. longipalpis com uma espéciemuito próxima, Lutzomyia cruzi, que produz sons do tipo Burst. Os resultados indicaram um númeromaior de diferenças fixas entre Lu. cruzi e as populações de Lu. longipalpis com som tipo Pulsado quecom aquelas produzindo som do tipo Burst. Os dados confirmaram que as diferentes espécies docomplexo Lu. longipalpis no Brasil podem ser divididas em dois grupos, um representando uma únicaespecie e o segundo grupo mais heterogêneo que provavelmente representa diversas espécies incipientes.Também fizemos uma análise macrogeográfica da divergência e fluxo gênico no gene paralytic entrepopulações de Lu. longipalpis das Américas do Sul e Central...
Lutzomyia longipalpis is the main vector of American Visceral Leishmaniasis, and represents acomplex of cryptic sibling species. Previous studies suggested the existence of four main clades in LatinAmerica representing different species with distinct geographical ranges: (1) Brazil (except RoraimaState) Species A = Lu. longipalpis sensu stricto, (2) Laran Species B = Lu. pseudolongipalpis(Venezuela), (3) cis-Andean Species C (Colombia and northwestern Venezuela, and Roraima State inBrazil) and (4) trans-Andean Species D (Central America). In addition, cross-mating experiments,analysis of copulation songs, pheromones, microsatellites and lovesong genes, suggested that the Brazilianpopulations of this vector represent different species that can be divided into two main groups accordingto the type of song (Burst vs. Pulse) males produce during copulation. Nevertheless, no diagnosticdifferences have been observed between these two groups with most molecular markers used to date. Weinitially analyzed the molecular divergence in a fragment of the paralytic gene, a locus involved in thecontrol of courtship songs in Drosophila, among a number of Lu. longipalpis populations from Brazilproducing Burst and Pulse-type songs. We also compared Lu. longipalpis with a very closely relatedspecies, Lutzomyia cruzi, which produces Burst-type song. The results indicated a higher number of fixeddifferences between Lu. cruzi and the Pulse-type populations of Lu. longipalpis than with those producingBurst-type songs. The data confirmed that the different sibling species of the Lu. longipalpis complex inBrazil can be divided into two main groups, one representing a single species and a second, a moreheterogeneous group, that probably represents a number of incipient species. We also performed amacrogeographic analysis of the divergence and gene flow in the paralytic gene among Lu. longipalpispopulations from South and Central America...
Subject(s)
Sex Attractants/analysis , Multilocus Sequence Typing , Psychodidae/genetics , Vocalization, Animal , LeishmaniasisABSTRACT
O presente estudo privilegia os aspectos comportamentais relacionados com a atração sexual em Triatoma brasiliensis. Considerando o fato de que o abrigo é um recurso fundamental para a sobrevivência na maioria das espécies de triatomíneos e que o sucesso reprodutivo se dá por meio de um eficaz encontro com o parceiro sexual, optamos por analisar o padrão de atividade locomotora em relação ao abrigo por adultos desta espécie durante a fase escura do ciclo diário e verificar o efeito da presença de coespecíficos nesta atividade. Uma vez fora do abrigo e motivados a procurar alimento e/ou parceiro para o acasalamento, estes insetos podem caminhar ou voar em direção à. fonte de estímulo. Neste sentido, avaliamos se existem sinais químicos emitidos por indivíduos do sexo oposto que sejam capazes de disparar o voo de machos ou fêmeas. Sabendo que estes insetos deslocam-se fundamentalmente caminhando, testamos se há comunicação mediada por odor entre os sexos através da técnica de olfatometria.
O próximo passo foi determinar a origem do sinal químico que promovia as respostas dos machos no olfatômetro. Foi realizada a identificação química da secreção das glândulas. metasternais através de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CGEM)e os diferentes componentes da secreção destas glândulas foram testados na antena de machos de T. brasiliensis por meio de cromatografia gasosa acoplada a. eletroantenografia (CG-EAD). Adicionalmente, foram descritos detalhadamente os aspectos gerais do comportamento durante a cópula e caracterizados fatores fisiológicos, tais como idade e estado nutricional, que afetam a receptividade da fêmea. Finalmente, o. efeito da presença de grupos de machos sobre a duração da cópula e a existência de comportamentos relacionados com competição sexual entre indivíduos foi analisada. Os resultados encontrados mostram que a atividade locomotora nas proximidades do abrigo (saídas do abrigo e atividade locomotora) é maior na primeira hora da fase escura, tanto. em fêmeas quanto em machos de T. brasiliensis. Além disso, odor de fêmea foi capaz de provocar um aumento significativo no número de machos que saíram do abrigo. Uma vez fora do abrigo, os machos aumentaram sua atividade quando odor de fêmea foi apresentado. Verificamos que uma proporção importante dos machos e fêmeas inicia o voo quando confrontados com correntes de ar limpo, porém de maneira não orientada.
A atividade de início de voo parece ser maior durante as primeiras horas da fase escura tanto em fêmeas quanto em machos. Foi observado que a presença de odor de fêmea provoca um aumento da atividade de início de voo nos machos. Além disso, foi possível. comprovar que as respostas dos machos foram orientadas contra a corrente de ar quando na presença de odor de fêmea. Nosso resultados mostram que as secreções das glândulas metasternais de fêmeas são relevantes para o sucesso da cópula nesta espécie. Surprendentemente, os dados mostraram que as secreções das glândulas de Brindley de fêmea também parecem relevantes para o sucesso da cópula em T. brasiliensis. Nos testes de olfatômetro verificamos que machos são significativamente atraídos por odor de fêmea e de macho. Adicionalmente, foi possível demonstrar que os odores emitidos pelas glândulas metasternais de fêmea são responsáveis pela resposta. de orientação dos machos no olfatômetro.
Os dados mostram que as glândulas metasternais não são a fonte dos sinais químicos que provocaram a atração de machos por machos. As glândulas metasternais de T. brasiliensis também estão envolvidas na síntese de substâncias voláteis, basicamente cetonas, dioxolanos e álcoois, sendo a 3-. pentanona o principal componente em ambos os sexos. No estudo de eletrofisiologia, 100% das antenas responderam à 3-pentanona, 71% ao (4R)-metil-1-heptanol, 28% ao (2S)-metil-1-butanol e (1R)-feniletanol e 14% ao 2,2,4-trietil-5-metil-1,3-dioxolano. Fêmeas de T. brasiliensis exibem três tipos de comportamento de rejeição em resposta as tentativas de cópulas realizadas pelos machos: movimentos abdominais, achatamento corporal e evasão. A idade afeta a motivação dos machos para realizar tentativas de cópula e o estado nutricional afeta a receptividade da fêmea. Machos de T. brasiliensis reagem à presença de machos competidores guardando a fêmea por um longo intervalo de tempo. A análise do comportamento de fêmeas sugere que elas são capazes de reconhecer o estado nutricional dos machos e aceitar com maior frequência as tentativas de cópula dos machos alimentados
Subject(s)
Humans , Animals , Guinea Pigs , Mice , Sex Attractants/analysis , Chagas Disease/prevention & control , Electrophysiology/methods , Triatominae/growth & developmentABSTRACT
O presente estudo privilegia os aspectos comportamentais relacionados com a atração sexual em Triatoma brasiliensis. Considerando o fato de que o abrigo é um recurso fundamental para a sobrevivência na maioria das espécies de triatomíneos e que o sucesso reprodutivo se dá por meio de um eficaz encontro com o parceiro sexual, optamos por analisar o padrão de atividade locomotora em relação ao abrigo por adultos desta espécie durante a fase escura do ciclo diário e verificar o efeito da presença de coespecíficos nesta atividade. Uma vez fora do abrigo e motivados a procurar alimento e/ou parceiro para o acasalamento, estes insetos podem caminhar ou voar em direção à. fonte de estímulo. Neste sentido, avaliamos se existem sinais químicos emitidos por indivíduos do sexo oposto que sejam capazes de disparar o voo de machos ou fêmeas. Sabendo que estes insetos deslocam-se fundamentalmente caminhando, testamos se há comunicação mediada por odor entre os sexos através da técnica de olfatometria.
O próximo passo foi determinar a origem do sinal químico que promovia as respostas dos machos no olfatômetro. Foi realizada a identificação química da secreção das glândulas. metasternais através de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CGEM)e os diferentes componentes da secreção destas glândulas foram testados na antena de machos de T. brasiliensis por meio de cromatografia gasosa acoplada a. eletroantenografia (CG-EAD). Adicionalmente, foram descritos detalhadamente os aspectos gerais do comportamento durante a cópula e caracterizados fatores fisiológicos, tais como idade e estado nutricional, que afetam a receptividade da fêmea. Finalmente, o. efeito da presença de grupos de machos sobre a duração da cópula e a existência de comportamentos relacionados com competição sexual entre indivíduos foi analisada. Os resultados encontrados mostram que a atividade locomotora nas proximidades do abrigo (saídas do abrigo e atividade locomotora) é maior na primeira hora da fase escura, tanto. em fêmeas quanto em machos de T. brasiliensis. Além disso, odor de fêmea foi capaz de provocar um aumento significativo no número de machos que saíram do abrigo. Uma vez fora do abrigo, os machos aumentaram sua atividade quando odor de fêmea foi apresentado. Verificamos que uma proporção importante dos machos e fêmeas inicia o voo quando confrontados com correntes de ar limpo, porém de maneira não orientada.
A atividade de início de voo parece ser maior durante as primeiras horas da fase escura tanto em fêmeas quanto em machos. Foi observado que a presença de odor de fêmea provoca um aumento da atividade de início de voo nos machos. Além disso, foi possível. comprovar que as respostas dos machos foram orientadas contra a corrente de ar quando na presença de odor de fêmea. Nosso resultados mostram que as secreções das glândulas metasternais de fêmeas são relevantes para o sucesso da cópula nesta espécie. Surprendentemente, os dados mostraram que as secreções das glândulas de Brindley de fêmea também parecem relevantes para o sucesso da cópula em T. brasiliensis. Nos testes de olfatômetro verificamos que machos são significativamente atraídos por odor de fêmea e de macho. Adicionalmente, foi possível demonstrar que os odores emitidos pelas glândulas metasternais de fêmea são responsáveis pela resposta. de orientação dos machos no olfatômetro.
Os dados mostram que as glândulas metasternais não são a fonte dos sinais químicos que provocaram a atração de machos por machos. As glândulas metasternais de T. brasiliensis também estão envolvidas na síntese de substâncias voláteis, basicamente cetonas, dioxolanos e álcoois, sendo a 3-. pentanona o principal componente em ambos os sexos. No estudo de eletrofisiologia, 100% das antenas responderam à 3-pentanona, 71% ao (4R)-metil-1-heptanol, 28% ao (2S)-metil-1-butanol e (1R)-feniletanol e 14% ao 2,2,4-trietil-5-metil-1,3-dioxolano. Fêmeas de T. brasiliensis exibem três tipos de comportamento de rejeição em resposta as tentativas de cópulas realizadas pelos machos: movimentos abdominais, achatamento corporal e evasão. A idade afeta a motivação dos machos para realizar tentativas de cópula e o estado nutricional afeta a receptividade da fêmea. Machos de T. brasiliensis reagem à presença de machos competidores guardando a fêmea por um longo intervalo de tempo. A análise do comportamento de fêmeas sugere que elas são capazes de reconhecer o estado nutricional dos machos e aceitar com maior frequência as tentativas de cópula dos machos alimentados
Subject(s)
Humans , Animals , Guinea Pigs , Mice , Chagas Disease/prevention & control , Electrophysiology/methods , Sex Attractants/analysis , Triatominae/growth & developmentABSTRACT
The cytotoxic effects of Diflubeizuron, pyriproxifen as insect growth regulators, ZZ/ZE-7,11-hexadecadienyl acetate, Z-9- hexadecenal and Z-11-hexadecenal as insect sex pheromones were evaluated in vitro using Chinese hamster ovary [CHO-K1] cells. Total cellular protein [TCP] content and methyl tetrazolium [MTT] assays were carried out using serum free medium and medium supplemented with fetal calf serum [FCS, 10%], bovine serum albumin [BSA, 1%] and/or metabolic activation system [S9-mix]. All the tested compounds displayed cytotoxic effects that rise with time exposure. TCP assay exhibited higher sensitivity than MTT assay with all the tested compounds. In presence of the added extracellular proteins and/or metabolic activation system [S9-mix], the cytotoxic effects significantly decreased which indicate that the tested agents may be binding non-specifically with protein and extensive metabolized to less toxic metabolites
Subject(s)
Animals, Laboratory , Animals , Juvenile Hormones/analysis , Sex Attractants/toxicity , Cricetinae , Ovary , Sex Attractants/analysis , Pyridines/toxicity , Pyridines/analysis , /toxicity , /analysis , Diflubenzuron/toxicity , Diflubenzuron/analysis , Aldehydes/toxicity , Aldehydes/analysisABSTRACT
In Brazil, four populations of Lutzomyia longipalpis each producing different sex pheromones are recognised. It has been suggested that these chemotype populations represent true sibling species. In this study we present the results of an analysis, by coupled gas cromotography - mass spectrometry, of the pheromones of males L. longipalpis from two different municipalities of the state of São Paulo. Our study showed that L. longipalpis from these two municipalities produced different sex pheromones from each other. This coupled with the remarkable difference between the epidemiological situation in Araçatuba and Espírito Santo do Pinhal, suggests that the (S)-9-methylgermacrene-B and cembrene-1 populations may have different vectorial capacities.