Morphology and Morphometry of the Magellanic Penguin (Spheniscus magellanicus) Trachea / Morfologia e morfometria da traqueia do pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus)

Objective: This work aimed to describe the trachea of the Magellanic Penguin (Spheniscus magellanicus) through descriptive and morphometric approaches. Methods: ten adult male Spheniscus magellanicus were used, which were collected, fixed, and kept immersed in an aqueous solution of 10% formaldehyde. Results: the trachea of the penguin began caudally from the cricoid cartilage of the larynx, represented by 121.3±5.65 cartilaginous rings joined together, which extended to the syrinx (19.75±0.70 cm). Considering its five segments (I-V), the number of tracheal rings decreased in a cranio-caudal direction. The medial tracheal septum, which started caudally from the cricoid cartilage of the larynx, was approximately 2±0.08 cm and was formed by approximately 6.75±0.25 rings. The dimensions of the lumen of the trachea decreased cranio-caudally, with a statistical difference between segment I and the others (II to V). The syrinx of the tracheobronchial type presented 7.52±0.65 rings. Conclusions: these data will contribute to the understanding of the anatomy of this species, as well as to the diagnosis and treatment of possible tracheal pathologies found in it.

Objetivo: o objetivo deste trabalho foi descrever a traqueia do pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus), por meio de abordagens descritivas e mofométricas. Metodologia: foram utilizados dez Spheniscus magellanicus, adultos, machos que foram após coletas, fixados e mantidos imersos em solução aquosa, a 10% de formaldeído. Resultados: a traqueia do pinguim iniciou-se, caudalmente, a cartilagem cricoide da laringe, representada por 121,3±5,65 anéis cartilaginosos unidos entre si, que se estenderam até as siringes (19,75±0,70 cm). Considerando seus cinco segmentos (I-V), o número de anéis traqueais diminuiu seu número em sentido craniocaudal. O septo traqueal medial teve início caudalmente a cartilagem cricoide da laringe, aproximadamente 2±0,08 cm, e foi formado por, aproximadamente, 6,75±0,25 anéis. As dimensões do lúmen da traqueia diminuíram craniocaudalmente, com diferença estatística entre o segmento I e os outros (II a V). As siringes, do tipo traqueobronquiais, apresentaram 7,52±0,65 anéis. Conclusões: esses dados contribuirão para o entendimento da anatomia dessa espécie, bem como para o diagnóstico e tratamento de possíveis patologias traqueais nela encontradas.

Lycopodium clavatum as a homeopathic treatment in Magellanic penguins (Sphenicus magellanicus)

Uric acid is the main form of excretion of nitrogenous components in birds. The assessment verification samples, control, check of uric acid concentrations is widely used to detect kidney disease. High concentrations (up to five times) of uric acid in plasma can lead to the precipitation of this acid in the form of crystals, which accumulate in the tissues, mainly in the synovial joints and the viscera surface. Aims: report the evolution of homeopathic treatment in increased uric acid in Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) from Santo André Municipal Zoo. Methodology: 12 animals showed an increase in uric acid (reference values 0,3-16,1mg/dL) and received homeopathic treatment with Lycopodium clavatum 6cH. The protocol established was the administration of two globules of Lycopodium clavatum 6cH, once a day, inside fishes offered in the animal's beak. Treatment started on 25/09/2019. On 30/10/2019 was collected a new blood sample, those who were not discharged were kept on treatment and new collections were made on 27/11/2019 and 17/12/2019. Results: 8 animals had an average uric acid of 20.45mg /dl and responded to the 35-days treatment, normalizing the biochemical values with an average of 12.24mg /dl. Two animals with 18.27 mg /dl were discharged in 62 days with 11.70 mg /dl and another two penguins with 19.85 mg /dl were discharged in 82 days later with 9.57 mg /dl of uric acid. Conclusion: Homeopathy proved to be successful in the treatment of increased uric acid in Magellanic penguins, easy to administer, affordable and without side effects.

Frequency of Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPRs) in non-clinical Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium strains / Frequência das repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente interespaçadas (CRISPRs) em cepas não-clínicas de Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium

Abstract The fidelity of the genomes is defended by mechanism known as Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR) systems. Three Type II CRISPR systems (CRISPR1- cas, CRISPR2 and CRISPR3-cas) have been identified in enterococci isolates from clinical and environmental samples. The aim of this study was to observe the distribution of CRISPR1-cas, CRISPR2 and CRISPR3-cas in non-clinical strains of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolates from food and fecal samples, including wild marine animals. The presence of CRISPRs was evaluated by PCR in 120 enterococci strains, 67 E. faecalis and 53 E. faecium. It is the first report of the presence of the CRISPRs system in E. faecalis and E. faecium strains isolated from wild marine animal fecal samples. The results showed that in non-clinical strains, the CRISPRs were more frequently detected in E. faecalis than in E. faecium. And the frequencies of CRISPR1-cas and CRISPR2 were higher (60%) in E. faecalis strains isolated from animal feces, compared to food samples. Both strains showed low frequencies of CRISPR3-cas (8.95% and 1.88%). In conclusion, the differences in the habitats of enterococcal species may be related with the results observe in distribution of CRISPRs systems.

Resumo A fidelidade dos genomas ​​é defendida por mecanismos conhecidos como sistemas de repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente interespaçadas (CRISPRs). Três tipos de sistemas CRISPR II (CRISPR1-cas, CRISPR2 e CRISPR3-cas) têm sido identificados em cepas de enterococos isolados de amostras clínicas e ambientais. O objetivo deste estudo foi observar a distribuição dos CRISPR1-cas, CRISPR2 e CRISPR3-cas em cepas não-clínicas de Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium isoladas de amostras alimentícias e fecais, incluindo animais marinhos selvagens. A presenca dos CRISPRs foi determinada por PCR em 120 cepas de enterococos, sendo 67 E. faecalis e 53 E. faecium. É o primeiro relato da presença do sistema CRISPRs nas estirpes E. faecalis e E. faecium isoladas de amostras fecais de animais marinhos selvagens. Os resultados mostraram que em cepas não-clínicas, os CRISPRs foram mais frequentemente detectados em E. faecalis do que em E. faecium. E as frequências de CRISPR1-cas e CRISPR2 foram maiores (60%) em cepas de E. faecalis isoladas de fezes de animais, quando comparadas à amostras de alimentos. Ambas as cepas apresentaram baixas freqüências de CRISPR3-cas (8,95% e 1,88%). Em conclusão, as diferenças nos habitats das espécies de enterococos podem estar relacionadas com os resultados observados na distribuição dos sistemas CRISPRs.

Clinical biochemistry of rescued Magellanic Penguins (Spheniscus magellanicus): serum or heparinized plasma? / Bioquímica clínica de pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) de resgate: soro ou plasma heparinizado?

IIn the last few years, an increasing number of debilitated Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) has been rescued and taken to rehabilitation centers on Brazil's southern coast to be clinically treated and evaluated for re-introduction. This work aims to compare the viability of heparinized plasma with the viability of serum for biochemistry analyses under rehabilitation conditions. Blood sampled from 31 physically healthy rescued penguins was processed into serum/plasma-paired samples and analyzed for 12 biochemical parameters: alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), cholesterol (CHOL), creatine kinase (CK), gamma-glutamyl transpeptidase (GGT), glucose, (GLU) lactate dehydrogenase (LDH), total proteins (TP), triglycerides (TG), urea (UR), and uric acid (UA).The results showed that six paired samples presented visual signs of hemolysis (visual hemolytic score≥1), four of which occurred exclusively in the serum counterpart. Significant differences (P≤ 0.5) between sample types were found for CHOL (3%), GLU (6%) and TG (52%). Only TG was considered clinically relevant (>10%). All mean/median results fell within the available reference intervals by the Association of Zoos and Aquariums (Penguin, 2014). In conclusion, we verified that heparinized plasma is a viable sample for the clinical biochemistry of rescued Magellanic penguins as it yields compatible results with serum, while providing practical benefits. The adoption of this practice favors a faster bird recovery, by minimizing blood sampling volume, and optimizes material resources, allowing use of the same collector tube as for hematology.(AU)

Nos últimos anos, um número crescente de pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) debilitados vem sendo resgatado e encaminhado aos centros de reabilitação do litoral sul do Brasil para cuidados clínicos e posterior avaliação de reintrodução. Este trabalho teve como objetivo comparar a viabilidade do plasma heparinizado com a do soro para análises bioquímicas, em condições de reabilitação. Amostras de sangue de 31 pinguins de resgate fisicamente saudáveis foram processadas em amostras pareadas de soro e plasma heparinizado, e 12 parâmetros bioquímicos foram analisados: alanina aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina (ALP), aspartato aminotransferase (AST), colesterol (CHOL), creatina quinase (CK), gamaglutamil transpeptidase (GGT), glicose (GLU), lactato desidrogenase (LDH), proteínas totais (TP), triglicérides (TG), ureia (UR) e ácido úrico (UA). Os resultados mostraram que seis amostras pareadas apresentaram sinais visuais de hemólise (escore hemolítico visual≥1), das quais quatro ocorreram exclusivamente no soro. Observaram-se diferenças significativas (P≤0,5) entre os tipos de amostra em CHOL (3%), GLU (6%) e TG (52%), sendo apenas TG considerado clinicamente relevante (>10%). Todos os resultados de médias e medianas situaram-se dentro dos intervalos de referência disponíveis fornecidos pela Associação de Zoológicos e Aquários (AZA). Como conclusão, verificou-se que o plasma heparinizado é uma amostra viável para a bioquímica clínica de pinguins-de-magalhães de resgate, produzindo resultados compatíveis com os do soro. Além disso, a adoção dessa prática favorece uma recuperação mais rápida dos animais, ao diminuir o volume de sangue amostrado, e otimiza os recursos materiais, ao permitir o aproveitamento do mesmo tubo de colheita de hematologia.(AU)

Applicability of the Platelia EIA® Aspergillus test for the diagnosis of aspergilosis in penguins / Aplicabilidade do Platelia EIA® Aspergillus como teste diagnostico da aspergilose em pinguins

Abstract Even today, an effective diagnostic test for aspergillosis in penguins is unknown, being the gold standard post-mortem examinations. The fungal antigen galactomannan (GM) has been used as a biomarker of disease in humans and is detected by the Platelia Aspergillus EIA (BioRad)®, a commercial kit based on the sandwich ELISA technique. It is standardized for use in neutropenic patients, however studies have demonstrated its usefulness also possible for birds. The aim of our study was to evaluate the effectiveness of Platelia Aspergillus EIA® test (BioRad-US) in the diagnosis of aspergillosis in Magellanic penguins, determining sensitivity, specificity, and positive and negative predictive values for different cut-off points. Were included in the study, blood serum samples (n = 29) Magellanic penguins in captivity that died by aspergillosis. Detection of GM was performed following manufacturer's instructions and the GM index was obtained by dividing the average value of OD of the duplicate of the clinical sample by duplicate OD of the average value of the cut-off sample provided by the kit. Through information database results were obtained for the presence of anti-Aspergillus fumigatus antibodies detected by agar gel immunodiffusion (AGID) for all serum samples. Results were analyzed using chi-square test and Kruskal-Wallis from SPSS 20.0, IBM®. ROC curve was obtained and from this, rates of sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were also calculated based on four different cutoff points (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0). The serum GM index did not differ between animals of the case and control group (pkw =0.097). In determining the ROC curve for serum GM detection the value of area under the curve was 0.635. From the values ​​determined by the coordinate of the curve, four different cut points (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0) were analyzed, resulting in sensitivity rates ranging from 86.2 to 34.5% % and specificity between 87% and 26.1%. By comparing the serum GM index in group case as the presence or absence of antibodies detected by AGID was found p=0.503. The detection of GM the Platelia Aspergillus EIA® test seems is not be useful for the diagnosis of aspergillosis in naturally infected penguins.

Resumo Ainda hoje, um teste diagnóstico eficaz para aspergilose em pinguins não é conhecido, sendo o padrão-ouro os exames post-mortem. O antígeno fúngico galactomanana (GM) tem sido utilizado como biomarcador da doença em humanos, sendo detectado pelo Platelia Aspergillus EIA (BioRad)®, um kit comercial que se baseia na técnica ELISA sanduíche. É padronizado para utilização em pacientes neutropênicos, no entanto estudos tem demonstrado sua possível utilidade também para aves.O objetivo de nosso estudo foi avaliar a eficácia do teste Platelia Aspergillus EIA® (BioRad-US) no diagnóstico da aspergilose em pinguins-de-Magalhães, determinando sensibilidade, especificidade e valores preditivos positivos e negativos em diferentes pontos de corte. Foram incluídas no estudo, amostras de soro sanguíneo (n=29) de pinguins-de-Magalhães em cativeiro que vieram a óbito por aspergilose. A detecção de GM foi realizada seguindo instruções do fabricante e o índice de GM foi obtido dividindo o valor da média da DO da duplicata da amostra clínica pelo valor da média da DO da duplicata da amostra de cut-off fornecida pelo kit. Através de informações em banco de dados foram obtidos resultados sobre a presença de anticorpos anti-Aspergillus fumigatus, detectada por Imunodifusão em gel de ágar (IDGA) em todas as amostras séricas. Os resultados foram analisados utilizando-se teste de qui-quadrado e Kruskal-Wallis a partir do programa estatístico SPSS 20.0, IBM®. Curva ROC foi obtida e a partir desta, taxas de sensibilidade, especificidade, valores preditivo positivo e negativo foram igualmente calculados considerando quatro diferentes pontos de corte (0.5, 1.0, 1.5 e 2.0). O índice de GM sérica não diferiu entre os animais do grupo caso e controle (pKW = 0.097). Na determinação da curva ROC para detecção de GM sérica o valor da área sobre a curva foi de 0.635. A partir dos valores determinados pelas coordenadas da curva, quatro diferentes pontos de corte (0.5, 1.0, 1.5 e 2.0) foram analisados, resultando em taxas de sensibilidade variando de 86.2% a 34.5%, e de especificidade entre 87% e 26.1%. Ao comparar o índice de GM sérica nos animais do grupo caso quanto a presença ou não de anticorpos detectados pela IDGA foi encontrado p=0.503. A detecção de GM pelo teste Platelia Aspergillus EIA® não parece ser útil para o diagnóstico da aspergilose em pinguins naturalmente infectados.

Comparative morphometric evaluation of hepatic hemosiderosis in wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) infected with different Plasmodium spp. subgenera / Avaliação morfométrica comparativa da hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) de vida livre infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp

Abstract Avian malaria is one of the most important diseases of captive penguins. We employed morphometric techniques to evaluate hepatic hemosiderosis in rehabilitating wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) that were negative (n = 9) or naturally infected by different subgenera of Plasmodium spp. (n = 24), according with: Plasmodium subgenera (Haemamoeba, Huffia, Other lineages, and Unidentified lineages), severity of Plasmodium histopathological lesions, and concurrent diseases, age class (juvenile or adult plumage), sex (male, female or not determined), body score (emaciated, thin, good, excellent, not available), molt, presence or absence of oil contamination upon admission, iron supplementation, and rehabilitation center. The percentage of the area occupied by hemosiderin was called 'Index of Hepatic Hemosiderosis (IHH)'. Plasmodium-positive females presented significantly higher IHH values (17.53 ± 12.95%) than males (7.20 ± 4.25%; p = 0.041). We observed higher levels of congestion (p = 0.0182) and pneumonia (p = 0.0250) severity between Unidentified lineages vs. Huffia. We believe that the hepatic hemosiderosis observed in this study was multifactorial, the result of pathological processes caused by malaria, molting, hemoglobin and myoglobin catabolism during migration, anemia, concomitant diseases, and iron supplementation, all possibly potentiated by decreased liver mass. Further studies are needed to clarify the mechanisms of these hypotheses.

Resumo Malária aviária é uma das mais relevantes doenças em pinguins cativos. Foram aplicadas técnicas morfométricas para avaliar a hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus ) de vida livre em reabilitação negativos (n = 9) e naturalmente infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp. (n = 24), quanto a: subgênero de Plasmodium (Haemamoeba , Huffia, Outras Linhagens, e Linhagens não identificadas), severidade das lesões histopatológicas causadas por Plasmodium e doenças concomitantes, faixa etária (plumagem juvenil ou adulta), sexo (macho, fêmea, indeterminado), condição corporal (emaciado, magro, bom, excelente, indisponível), muda, presença/ausência de óleo a admissão, suplementação de ferro, e centro de reabilitação. A porcentagem da área ocupada por hemossiderina foi denominada "Índice de Hemossiderose Hepática (IHH)". Fêmeas Plasmodium -positivas apresentaram IHH significativamente mais elevado que machos, respectivamente, 17,53 ± 12,95% e 7,20 ± 4,25% (p = 0,041). Níveis mais elevados de congestão (p = 0,0182) e pneumonia (p = 0,0250) foram observados entre Linhagens não identificadas vs. Huffia. Possivelmente, a hemossiderose hepática observada nesse estudo seja multifatorial, resultado de processos patológicos causados por malária, muda, catabolismo de hemoglobina e mioglobina durante a migração, anemia, doenças concomitantes e suplementação de ferro, potencialmente intensificados por massa hepática reduzida. Estudos complementares são necessários para esclarecer os mecanismos de tais hipóteses.

Blood transcriptome resources of chinstrap (Pygoscelis antarcticus) and gentoo (Pygoscelis papua) penguins from the South Shetland Islands, Antarctica

The chinstrap (Pygoscelis antarcticus) and gentoo (P. papua) penguins are distributed throughout Antarctica and the sub-Antarctic islands. In this study, high-quality de novo assemblies of blood transcriptomes from these penguins were generated using the Illumina MiSeq platform. A total of 22.2 and 21.8 raw reads were obtained from chinstrap and gentoo penguins, respectively. These reads were assembled using the Oases assembly platform and resulted in 26,036 and 21,854 contigs with N50 values of 929 and 933 base pairs, respectively. Functional gene annotations through pathway analyses of the Gene Ontology, EuKaryotic Orthologous Groups, and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) databases were performed for each blood transcriptome, resulting in a similar compositional order between the two transcriptomes. Ortholog comparisons with previously published transcriptomes from the Adélie (P. adeliae) and emperor (Aptenodytes forsteri) penguins revealed that a high proportion of the four penguins’ transcriptomes had significant sequence homology. Because blood and tissues of penguins have been used to monitor pollution in Antarctica, immune parameters in blood could be important indicators for understanding the health status of penguins and other Antarctic animals. In the blood transcriptomes, KEGG analyses detected many essential genes involved in the major innate immunity pathways, which are key metabolic pathways for maintaining homeostasis against exogenous infections or toxins. Blood transcriptome studies such as this may be useful for checking the immune and health status of penguins without sacrifice.

Occurrence of gastrointestinal parasites in Spheniscus magellanicus (Foster, 1781) located in Pontal do Sul, PR, Brazil / Ocorrência de parasitas gastrintestinais em Spheniscus magellanicus (Foster, 1781) localizados em Pontal do Sul, PR, Brasil

Gastrointestinal parasitism is the main health problem faced by Spheniscus magellanicus, known as Magellanic penguins, in route on the Brazilian coast. The aim of this research was to report the occurrence and intensity of gastrointestinal parasites in S. magellanicus that reached Pontal do Sul, Paraná, South of Brazil. The study was performed at the Marine Study Center of the Federal University of Parana (CEM-UFPR) with 38 specimens, 31 were necropsied and seven were examined alive with coproparasitological exams. From the necropsied animals, 93.5% (29/31) were parasitized with at least one parasite species. Contracaecum pelagicum was the most prevalent 93,5% (29/31) parasite, followed by Cardiocephaloides physalis (64.5%) and Tetrabothrius lutzi (51.6%). Only one animal was free of parasites and the most infected bird had 1.076 parasites with an average of 194 worms. Willis-Mollay method revealed that 57.1% (4/7) had C. pelagicum eggs. In conclusion, the high rate of gastrointestinal parasites in S. magellanicus confirms the clinical exams, when animals had poor health conditions when they were found in the cost of Paraná. This study provides data to enrich the literature regarding the helminth fauna of the Magellanic penguins, assisting sanitary control programs in Rehabilitation Centers for Marine Animals.(AU)

As parasitoses gastrintestinais são o principal problema sanitário enfrentado pelo Spheniscus magellanicus, conhecido como pinguim-de-magalhães, que faz rota no litoral brasileiro. O objetivo desta pesquisa foi relatar a ocorrência e a intensidade de parasitas gastrintestinais em Spheniscus magellanicus encontrados em Pontal do Sul, Paraná, Sul do Brasil. O estudo foi realizado no Centro de Estudos Marinhos da Universidade Federal do Paraná, CEM-UFPR, com 38 espécimes; 31 dos quais foram necropsiados, e em sete aves vivas foram realizados exames coproparasitológicos. Do total analisado, 93,5% (29/31) aves estavam parasitadas com pelo menos uma espécie, sendo o Contracaecum pelagicum o mais prevalente, 93,5% (29/31), seguido de Cardiocephaloides physalis (64,5%) e de Tetrabothrius lutzi (51,6%). Somente um animal estava livre de parasitas e a ave mais infectada possuía 1.076 parasitas; a média foi em 194 vermes. No exame de Willis-Mollay, foi observada positividade em 57,1% (4/7) para C. pelagicum. Conclui-se que o alto índice de parasitas gastrintestinais em S. magellanicus confirma os exames clínicos que eles apresentaram, de baixa condição sanitária, quando foram encontrados no litoral do Paraná. Este estudo fornece dados que irão enriquecer a literatura sobre a helminto fauna do pinguim-de-magalhães, auxiliando programas de controle sanitário em Centros de Reabilitação de Animais Marinhos.(AU)

Morfologia do coração e dos vasos da base do pinguim-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) / Morphology of heart and vessels of the cardiac base in Magellanic penguin (Spheniscus magellanicus)

O pinguim-de-magalhães é uma ave marinha de porte médio, de origem do hemisfério sul, com grandes colônias próximas à Patagônia. Em certas épocas do ano, alguns exemplares aparecem no litoral brasileiro, devido ao desvio de rotas de caça, e alguns indivíduos não conseguem retornar por debilidades na saúde. Foram utilizados 34 exemplares de Spheniscus magellanicus que vieram a óbito no litoral do estado de Espírito Santo. O presente estudo analisou a morfologia de câmaras e paredes cardíacas, valvas e artérias da base. Os fragmentos dessas regiões foram analisados histologicamente com coloração hematoxilina-eosina (HE) e Tricrômico de Gomori (TG), além da coloração Picrosirius Red (PSR) sob luz polarizada, visando observar, principalmente, a composição do tipo de colágeno existente em cada região descrita. Entre os 34 exemplares, nenhum apresentou discrepância em relação a sua morfologia. A tipificação do colágeno dessas regiões pelas colorações TG e PSR sob luz polarizada demonstrou a presença do colágeno tipo I em maior evidência que o tipo III, encontrada na maioria das estruturas, o que atribuiu a aparência avermelhada intensa a quase todas elas. Pode-se concluir que a anatomia cardíaca do pinguim-de-magalhães é semelhante à de outras aves, com predominância do colágeno do tipo I.(AU)

Magellanic penguin is medium-sized seabird originated from southern hemisphere with colonies near Patagonia. At certain times of the year in Brazilian coast, a few penguins lose their hunting routes and can´t return because they are very sick. Thirty-four penguins died in Espírito Santo´s coast. This study analyzed the cardiac morphology and morph metric of heart chambers and walls, valves, and arteries of the cardiac base. These parts were analysed and stained by Hematoxilin and eosin and Gomori´s trichrome. Mainly targeting the collagen´s composition in each described part the Picru-sirius Red´s stain under polarized light was used. Among thirty-four penguin hearts, none presented discrepancy in morphology, they were all very similar. The characterization of collagen by Picrusirius Red stain highlighted type 1 collagen in comparison to type 3 collagen in most structures, giving a more reddish appearance in almost of them. In conclusion, the cardiac anatomy of the Magellanic Penguin is similar to that of other birds, with a predominance of type I collagen.(AU)

Parámetros hematológicos y de estrés oxidativo en pingüinos de Magallanes rehabilitados por contaminación con petróleo / Blood and oxidative stress parameters of oil-spill rehabilitated magallanic penguins

Los pingüinos de Magallanes son entre las aves marinas, la especie más afectada por la contaminación con petróleo en Chubut y Santa Cruz. Una de las consecuencias adversas de la exposición a hidrocarburos y otros contaminantes es el aumento de los niveles celulares de especies reactivas del oxígeno o estrés oxidativo, considerados herramientas útiles como biomarcadores del impacto de la exposición a contaminantes químicos peligrosos. El objetivo de este trabajo fue evaluar parámetros hematológicos y marcadores de estrés oxidativo durante la rehabilitación de tres pingüinos empetrolados provenientes del Área Natural Protegida Punta Tombo, Chubut, Argentina. Se tomaron tres muestras de sangre por individuo: la primera muestra al arribo de los pingüinos al centro de rehabilitación, la segunda una semana después y una última muestra antes de ser liberados. Se obtuvieron la cantidad total de leucocitos, la razón heterófilos/linfocitos, el hematocrito y las concentraciones de glucosa y de proteínas totales. Se analizó la actividad de la enzima catalasa, responsable de la degradación del peróxido de hidrógeno, los niveles de tioles totales no proteicos y el daño a lípidos evaluando las especies reactivas al ácido tiobarbitúrico, como indicadores de estrés oxidativo. El estudio se complementó con la obtención del peso de los pingüinos. En general, los parámetros medidos, aumentaron o se mantuvieron constantes desde la primera toma de muestra hasta la última. Si bien algunas de las variables para cada pingüino se comportaron diferentes durante el tratamiento, en general se observó una tendencia a normalizarse hacia el momento de su liberación. Se concluye que los pingüinos se liberaron en buen estado físico luego de la rehabilitación.

Magellanic penguins are among the most affected seabirds by oil contamination in Patagonia. Hydrocarbons and other pollutants cause an increase in the cellular levels of reactive oxygen species that lead oxidative stress and in this way, the evaluation of oxidative stress parameters could be useful tools as biomarkers to evaluate the exposure to hazardous chemical contaminants. The aim of the present work was to evaluate hematological parameters and oxidative stress biomarkers during the rehabilitation of three oil-spill penguins from Punta Tombo Natural Protected Area in Chubut, Argentina. Three blood samples were taken from each individual, the first sample was obtained at arrival of penguin to the rehabilitation center, the second one was the following one week and last sample was taken before animals were freed. Hematocrit, white blood cell count, heterophil/ lymphocyte ratio as a measure of stress, and concentrations of glucose and total proteins were determined. The thiobarbituric acid reactive species, a well-established method for monitoring lipid peroxidation, the activity of catalase enzyme (involved in the catabolism of hydrogen peroxide) and the thiol levels were evaluated as oxidative stress indicators. In general, the measured parameters remained constant or increased their values from the first to the last blood sampling. While some of the variables for each penguin behaved differently during treatment, generally they tended to normalize when penguins were released. We conclude that penguins were released in good physical condition after rehabilitation.

Valores hematológicos e bioquímicos de pinguins-de-Magalhães em reabilitação no Espírito Santo, sudeste do Brasil / Hematological and biochemical values of Magellanic penguins in rehabilitation in Espírito Santo, southeastern Brazil

Este trabalho apresenta valores hematológicos e bioquímicos de pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) juvenis que arribaram no Espírito Santo e Rio de Janeiro, litoral sudeste do Brasil, e foram encaminhados a reabilitação. Os valores médios obtidos foram: eritrócitos 2.55±0.54 milhões/µL; hemoglobina 13,37±3,91g/dL; hematócrito 41,5±0,04%; proteína plasmática 6,34±0,81g/dL; leucócitos 16.301±6.402/µL; trombócitos 20.516±4.591 células/µL; volume corpuscular médio (VCM) 172,0±53,0 fL; concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) 26,41±0,02%; alanina transaminase (ALT) 50,0±17,89 U/L; ácido úrico 8,93±3,0mg/dL; albumina 1,68±0,53g/dL; cálcio 9,7±0,57mg/dL; fósforo 10,39±8,5mg/dL e glicose 211,6±30,3mg/dL. Valores de eritrócitos, VCM e CHCM foram discrepantes em relação aos valores de referência atuais. Valores de leucócitos e trombócitos tem significado inconclusivo. Hematócrito, hemoglobina, proteína plasmática e valores bioquímicos forneceram importante contribuição para o estabelecimento de parâmetros de referência.(AU)

This paper reports hematological and biochemical values of juveniles Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) stranded in Espírito Santo and Rio de Janeiro, Southeastern Brazil, that were sent for rehabilitation. The average values were: erythrocytes 2.55±0,54 milhões/µL, hemoglobin 13.37±3,91g/dL, hematocrit 41.5±0.04%, plasma protein 6.34±0.81g/dL, leukocytes 16,301±6,402/µL, thrombocytes 20,516±4,591 células/µL3, mean cell volume (MCV) 172.0±53.0 fL, mean cell hemoglobin concentration (MCHC) 26.41±0.02%, alanine transaminase (ALT) 50.0±17.89 U/L, uric acid 8.93±3.0mg/dL, albumin 1.68±0.53mg/dL, calcium 9.7±0.57mg/dL, phosphorus 10.39±8.5mg/dL and glucose 211.6±30.3mg/dL. Values of erythrocytes, MCV and MCH were discrepant in relation to the current reference values. Leukocytes and thrombocytes values has meant inconclusive. Hematocrit, hemoglobin, plasma protein and biochemical values provided important contribution for the establishment of reference parameters.(AU)

Serological monitoring of antibodies for an early diagnosis ofaspergillosis in captive penguins / Monitoramento sorológico com detecção de anticorpos para diagnóstico precoce da aspergilose em pinguins em cativeiro

This study aimed to evaluate the efficacy of detection of anti-Aspergillus fumigatus antibodies in captive penguins by double radial agar gel immunodiffusion (AGID) for the aspergillosis diagnosis. We included 134 Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) in rehabilitation at the Center for Recovery of Marine Animals (CRAM / FURG). All of them were monitored by AGID weekly until its final destination (death or release), totalizing 660 serum samples studied. All animals were clinically accompanied and post-mortem examinations was performed in penguins that died during the studied period. A total of 28% (37/134) of the penguins died, 89.2% (33/37) due to aspergillosis, 11% (4/37) by other causes and 97 were released. From the 33 animals with proven aspergillosis, 21 presented anti- A. fumigatus antibodies by AGID, being the average interval between death and positive AGID 16.4 days. Twelve animals with negative serology died of aspergillosis. The sensitivity and specificity rates were 63.6% and 95% respectively, and the positive and negative predictive values were 80.7% and 88.9% respectively. These data demonstrate that the serological monitoring for detection of antibodies by AGID can be an important tool for the diagnosis of aspergillosis in penguins.

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da detecção de anticorpos anti- Aspergillus fumigatus em pinguins em cativeiro por imunodifusão radial dupla em gel de ágar (IDGA) para diagnóstico da aspergilose. Foram incluídos 134 pingüins de Magalhães (Spheniscus magellanicus) em reabilitação no Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM/FURG), que foram monitoradas por IDGA, semanalmente, até o seu destino final (morte ou de liberação), totalizando 660 amostras de soro estudadas. Todos os animais foram acompanhados clinicamente e exames post mortem foram realizados em pingüins que vieram a óbito durante o período de estudo. Um total de 28% (37/134) dos pinguins foram a óbito, 89,2% (33/37) de aspergilose, 11% (4/37) de outras causas, e 97 foram liberados. A partir dos 33 animais com aspergilose comprovada, 21 apresentaram anticorpos anti- A. fumigatus por IDGA, sendo o intervalo médio entre a morte e IDGA positivas 16,4 dias. Doze animais com sorologia negativa vieram a óbito por aspergilose. As taxas de sensibilidade e especificidade foram de 63,6% e 95%, respectivamente, e os valores preditivos positivos e negativos foram de 80,7% e 88,9 %, respectivamente. Estes dados demonstram que o monitoramento sorológico para detecção de anticorpos por IDGA pode ser uma ferramenta importante no diagnóstico de aspergilose em pinguins.

Metallothionein and lipid peroxidation as markers to assess health status of chronically oiled Magellanic penguins in Argentina / Metalotioneínas y peroxidación lipídica como marcadores para determinar el estado de salud del Pingüino Magallánico crónicamente empetrolado en Argentina

Chronic oiling affects seabirds, with short (individual survival) and long-term (dynamics of population) effects. Magellanic penguin is the most affected species in Argentina. The aim was to evaluate the use of blood biochemical-molecular biomarkers (MT and TBARs) to assess health status of Magellanic penguin exposed to chronic environmental oiling, in addition with routine hematological analyses (differential WBC count and PCV). Oiled specimens presented significant higher RBC metallothionein and TBARs concentrations than those from shelter; while routine hematological parameters were within normal levels for penguins and did not show any difference between both groups. These results demonstrated the higher sensibility of both biomarkers, evidencing effects on health status by chronic oiling; furthermore, they are the first report in blood metallothionein and oxidative stress in S. magellanicus. These studies will be useful for a better assessment of the health condition in rehabilitation centers (short term); and, as early warning signals in natural colonies (long term).

El empetrolamiento crónico afecta a las aves marinas, con efectos a corto (supervivencia del individuo) y largo plazo (dinámica de la población). El pingüino de Magallanes es la especie más afectada en Argentina. El objetivo fue evaluar el uso de biomarcadores bioquímicos-moleculares (MT y TBARS) en sangre para evaluar el estado de salud del pingüino de Magallanes expuesto a empetrolamiento crónico ambiental, además de los análisis hematológicos de rutina (recuento diferencial de leucocitos y hematocrito). Los ejemplares empetrolados presentaron concentraciones significativamente mayores de metalotioneínas en fracción celular y peroxidación lipídica que aquellos de albergue; por el contrario, los parámetros hematológicos de rutina estuvieron dentro de los niveles normales para los pingüinos y no mostraron ninguna diferencia entre los grupos. Estos resultados demuestran la mayor sensibilidad de los dos biomarcadores, evidenciando efectos del empetrolamiento crónico sobre el estado de salud; además, este es el primer reporte de concentraciones de metalotioneínas en sangre y el estrés oxidativo en S. magellanicus. Estos estudios son de utilidad para una mejor evaluación del estado de salud en los centros de rehabilitación (corto plazo); y, como señales de alerta temprana en las colonias naturales (largo plazo).

Blood parameters and measurements of weight in the rehabilitation of Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus, Foster 1781) / Parâmetros sanguíneos e medidas de peso na reabilitação de pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus, Foster 1781)

During the austral winter the appearance of the Magellanic penguin (Spheniscus magellanicus) is common on the southern coast of Brazil. The oil pollution constitutes a major cause of death of these birds. The monitoring of the weight and blood variables is important to make decisions during the rehabilitation and release of these animals. Thus, the aim of this study was to evaluate the relationship between the penguins' survival during rehabilitation and the values of hematocrit (Hct), total plasma protein (TPP) and body weight (BW) of the birds received at Centro de Recuperação de Animais Marinhos (Recovery Centre for Sea Animals) between 2006 and 2009. The analysis took place weekly, and penguins were classified according to the outcome of the rehabilitation process, when 101 specimens were rehabilitated and released, and 67 died. Released animals showed a decrease in the Hct in the second and third weeks (41±6% and 40±5% respectively) followed by recovery of the values in the fourth and fifth week (41±4% and 43±4% respectively). TPP levels increased steadily over the collections, stabilizing at 7.3±0.8g/dL in the fourth week. On the other hand, animals that died, although following the same response for TPP, showed no significant difference in Hct between collections, and showed a tendency for loss of BW in the last weeks of rehabilitation. The curves of BW and Hct during rehabilitation were considered a potential prognostic indicator of penguins in rehabilitation. Animals that arrived at the recovery centre with BW, Hct and TPP above 2.700g, 45% and 5.6 g / dL, respectively, have a greater chance of recovery, making these parameters crucial points in decision making regarding the treatment to be conducted during rehabilitation.

Durante o inverno austral, é comum o aparecimento do pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) no litoral sul do Brasil. A poluição por petróleo constitui a maior causa de morte dessas aves. O acompanhamento do peso e de variáveis sanguíneas é importante para a tomada de decisões durante a reabilitação e liberação desses animais. O objetivo deste estudo foi avaliar a relação entre a sobrevivência dos pinguins durante a reabilitação e os valores de hematócrito (Ht), proteínas plasmáticas totais (PPT) e peso corpóreo (PC) das aves recebidas no Centro de Recuperação de Animais Marinhos entre 2006 e 2009. As análises ocorreram semanalmente, e os pinguins foram classificados em função do desfecho do processo de reabilitação, quando 101 espécimes foram reabilitados e liberados e 67 foram a óbito. Animais liberados apresentaram queda no Ht na segunda e terceira semanas (41±6% e 40±5%, respectivamente), seguida de recuperação dos valores na quarta e quinta semanas (41±4% e 43±4%, respectivamente). Os níveis de PPT aumentaram progressivamente ao longo das coletas, estabilizando na quarta semana em 7,3±0,8g/dL. Em contrapartida, animais que foram a óbito, apesar de seguirem a mesma resposta para as PPT, não apresentaram diferença significativa do Ht, entre as coletas, e demonstraram tendência à perda de PC nas últimas semanas de reabilitação. As curvas de PC e Ht foram consideradas indicadoras potenciais de prognóstico durante a reabilitação dos pinguins. Animais que chegaram ao centro de recuperação com PC, Ht e PPT acima de 2.700g, 45% e 5,6g/dL, respectivamente, apresentaram maior chance de recuperação, fazendo desses parâmetros pontos críticos na tomada de decisão quanto ao tratamento a ser conduzido durante a reabilitação.

Analysis of hematologic and serum chemistry values of Spheniscus magellanicus with molecular detection of avian malarial parasites (Plasmodium spp) / Análise dos valores hematológicos e bioquímicos de Spheniscus magellanicus com detecção molecular de parasitos maláricos aviários (Plasmodium spp)

Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) routinely migrate from their breeding colonies to Southern Brazil often contracting diseases during this migration, notably avian malaria, which has been already reported in Brazil and throughout the world. Detection of Plasmodium spp. in blood smears is the routine diagnostic method of avian malaria, however it has a low sensitivity rate when compared to molecular methods...

O pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) migra das suas colônias reprodutivas até o extremo sul do Brasil. Esses pinguins frequentemente são acometidos por doenças, notavelmente a malária aviária, que é relatada no Brasil e no mundo. A detecção de Plasmodium spp. no esfregaço sanguíneo é o método de rotina mas apresenta baixa sensibilidade quando comparado aos métodos moleculares...

Clinical, hematological, total plasma protein and fibrinogen parameters of magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) pre- and post-rehabilitation / Parâmetros clínicos, hematológicos, de proteína plasmática total e fibrinogênio em pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) pré e pós-reabilitação

Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) usually arrive in poor body conditions at Brazilian beaches during the winter. Hematology provides valuable information about clinical and immunity status of the animals. The aims of this study were to determine the hematologic, total plasma protein (TPP) and fibrinogen profiles of young and adult magellanic penguins in PROAMAR and CETAS-SC, relating these results with the state of health and survival possibility of the animals. In Paraná 14 animals were evaluated in pre and eight in post-rehabilitation and 29 animals were evaluated in Santa Catarina after rehabilitation. Before rehabilitation, all animals showed weakness. In hematological exams of these animals, we found that anemia was present in 83% of the penguins that died and 50% of those which survived. The heterophils/lymphocytes (H/L) ratio was 3.87±0.57 in animals that died, significantly higher than the average of 2.20±0.30 for animals that survived. These two parameters are useful to assess the survival possibility of animals to rehabilitation. The body condition score was positively correlated with hematocrit and TPP, and negatively correlated with H/L ratio. After rehabilitation, the values were similar to other animals of the family Spheniscidae, with averages ranging from 1.64 to 1.90x106 erythrocytes/µL; 43.38 to 48.80% of hematocrit; 12.45 to 13.52g/dL of hemoglobin; 8,684 to 14,011 leukocytes/µL; 4,767 to 8,041 heterophils/µL; 3,215 to 4,951 lymphocytes/µL; 95 to 655 eosinophils/µl; 179.8 to 277.9 monocytes/µL; 141 to 184.9 basophils/µL; and 1.26 to 1.74 of H/L ratio. These parameters can therefore be used as reference values and release parameters for young and adult Magellanic penguins in captivity on the rehabilitation centers.(AU)

Pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) geralmente chegam debilitados às praias do Brasil durante o inverno. A hematologia fornece informações valiosas sobre estado clínico e imunidade dos animais. Os objetivos do presente estudo foram determinar o perfil hematológico, de proteína plasmática total (PPT) e fibrinogênio de pinguins-de-magalhães jovens e adultos no PROAMAR e no CETAS-SC, relacionando esses resultados com o estado de saúde e possibilidade de sobrevivência dos animais. Foram avaliados no Paraná 14 animais na pré e oito na pós-reabilitação e 29 animais em Santa Catarina após a reabilitação. Antes da reabilitação, todos os animais apresentavam debilidade. Nos exames hematológicos desses animais, observou-se que a anemia estava presente em 83% dos pinguins que foram a óbito e em 50% dos que sobreviveram. A relação heterófilos/linfócitos (H/L) foi de 3,87±0,57 nos animais que foram a óbito, significativamente maior que a média de 2,20±0,30 dos animais que sobreviveram. Esses dois parâmetros são úteis na avaliação da possibilidade de sobrevivência dos animais à reabilitação. O escore corporal apresentou correlação positiva com hematócrito e PPT, e correlação negativa com relação H/L. Após a reabilitação os valores foram semelhantes aos de outros animais da família Spheniscidae, com médias variando de 1,64 a 1,90 x106 eritrócitos/µL; 43,38 a 48,80% de hematócrito; 12,45 a 13,52g/dL de hemoglobina; 8.684 a 14.011 leucócitos/µL; 4.767 a 8.041 heterófilos/µL; 3.215 a 4.951 linfócitos/µL; 95 a 655 eosinófilos/µL; 179,8 a 277,9 monócitos/µL; 141 a 184,9 basófilos/µL; e 1,26 a 1,74 de relação H/L. Esses parâmetros, portanto, podem ser utilizados como valores de referência e parâmetros para soltura para pinguins-de-magalhães jovens e adultos em cativeiro nos centros de reabilitação.(AU)

Ultrastructural aspects of the tongue in Magellanic Penguins Spheniscus magellanicus (Forster, 1781) / Aspectos ultraestruturais da língua de Pinguim-de-Magalhães Spheniscus magellanicus (Forster, 1781)

The tongue of birds presents diversified morphologic characteristics, related directly their feeding habits and may be adapted to food capture. Penguins of the Spheniscidae family are pelagic birds that are totally adapted to the marine environment. The objective of this study was to describe the morphology of the tongue in Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus). In order to investigate these characteristics, six tongues of juvenile S . magellanicus were collected and their morphology analyzed macroscopically and microscopically. The tongue of the Magellanic penguin has a fusiform shape with a round apex that is narrower than the root, following the shape of the beak. The epithelium of the tongue of the Magellanic penguin showed to be stratified and very keratinized, with the presence of lingual papillae that showed a caudally inclined apex. The neighboring connective tissue showed absence of mucous glands. The cartilaginous skeleton was observed in the medial region of the tongue, extending from the base to the apex. The structure of the tongue of the Magellanic penguin showed to be similar to that of other penguin species, but also showed peculiar characteristics that were not observed in other bird families.

A língua das aves apresenta características morfológicas diversificadas, relacionados diretamente com seus hábitos alimentares e pode ser adaptado para a captura de alimentos. Os pinguins da família Spheniscidae são aves pelágicas totalmente adaptadas ao ambiente marinho. O objetivo deste estudo foi descrever a morfologia da língua de pinguins de Magalhães (Spheniscus magellanicus). Para investigar tais características, seis línguas de S. magellanicus juvenis foram coletados e sua morfologia analisada macro e microscopicamente. A língua do pinguim de Magalhães tem formato fusiforme com ápice arredondado e mais estreito em relação à raiz, acompanhando o formato do bico. O epitélio da língua do pinguim-de-Magalhães mostrou-se estratificado e muito queratinizado, com a presença de papilas linguais, com ápices voltados caudalmente. O tecido conjuntivo adjacente mostrou ausência de glândulas mucosas. Um esqueleto cartilaginoso, formado por cartilagem hialina, foi observado na região mediana da língua se estendendo da base até ápice. A estrutura da língua do pinguim Magellanic mostrou ser semelhante ao de outras espécies de pinguins, mas também apresentou características peculiares que não foram observados em outras famílias de aves.

Molecular and morphological characterization of Contracaecum pelagicum (Nematoda) parasitizing Spheniscus magellanicus (Chordata) from Brazilian waters / Caracterização molecular e morfológica de Contracaecum pelagicum (Nematoda) parasito de Spheniscus magellanicus (Chordata) em águas brasileiras

Three new sequences of Mitochondrial cytochrome c-oxidase subunit 2 (mtDNA cox-2) from C. pelagicum parasite of Spheniscus magellanicus, the Magelanicus penguin, were determined from Brazilian waters. The sequences presented 99 and 98% of similarity with C. pelagicum sequences from Argentina, deposited on GenBank for the same genetic region and with a strong statistical support inferred from the phylogenetic tree. The morphological and ultrastructural studies that were carried out confirmed the genetic analysis.

Foram determinadas três novas sequências da região do Citocromo c-oxidase da subunidade II do DNA mitocondrial (cox-2 mtDNA) de Contracaecum pelagicum, parasito de Spheniscus magellanicus, pinguim Magalhães, de águas brasileiras. As sequências apresentaram 99 e 98% de similaridade com sequências de C. pelagicum da Argentina depositadas no GenBank da mesma região genética com forte suporte estatístico inferido pela arvore filogenética. Estudos morfológicos e ultraestruturais realizados confirmaram a identidade genética.

Reducing bumblefoot lesions in a group of captive Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) with the use of environmental enrichment / A redução do bumblefoot com a utilização de enriquecimento ambiental para um grupo de pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) mantido em cativeiro

Captive penguins are prone to pododermatitis (bumblefoot) lesions due to sedentary habits, changes in normal activity patterns, prolonged time on hard and abrasive surfaces, and less time swimming in the water. Environmental enrichment allows the use of creative and ingenious techniques that aim to keep the captive animals occupied by increasing the range and the diversity of behavioral opportunities always respecting the ethological needs of the species. The main goal of this work was to use environmental enrichment techniques to reduce pododermatitis in a group of captive penguins. Five captive Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) that were showing bumblefoot lesions were followed during this project. To monitor the lesions, all animals were physically restraint 3 times a week over a period of 12 weeks. Environmental enrichment was introduced daily in the water with the goal of enhancing their time in the water for one extra hour daily. The results demonstrate that in a twelve weeks period, four animals showed significant reduction of the lesions in both feet and in two animals the lesions were completely healed. With these results we can conclude that aquatic environmental enrichment allowed this group of penguins to spend more time in the water, favoring the reduction of the bumblefoot lesions.

Os pinguins cativos estão predispostos a pododermatite (bumblefoot) devido ao sedentarismo, mudanças dos padrões normais de atividade, tempo prolongado de permanência em pisos duros e abrasivos, diminuição da natação e tempo na água. O enriquecimento ambiental permite a utilização de técnicas imaginativas e engenhosas que visam manter os animais cativos ocupados e com uma maior diversidade de oportunidades comportamentais, sempre respeitando as necessidades etológicas da espécie. O objetivo deste trabalho foi utilizar técnicas de enriquecimento ambiental para reduzir as lesões de pododermatite em um grupo de pingüins. Cinco indivíduos da espécie Pinguim-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) foram monitorados durante este projeto. Todos os animais foram contidos fisicamente 3 vezes por semana para a realização do acompanhamento do tamanho das lesões, durante 12 semanas. Enriquecimento ambiental foi introduzido diariamente na água, objetivando aumentar em uma hora o tempo em que os animais passavam na água. Os resultados mostraram que, ao longo das 12 semanas, 4 animais apresentaram redução significativa das lesões em ambas as patas, sendo que em dois animais as lesões desapareceram. Com isto, podemos concluir que o enriquecimento ambiental aquático para este grupo de pingüins permitiu um maior tempo de permanência dos animais na água favorecendo a redução das lesões de bumblefoot.