Relevant peptides of Taenia crassiceps for the diagnosis of bovine cysticercosis by immunoblot / Peptídeos relevantes de Taenia crassiceps para o diagnóstico da cisticercose bovina pelo immunoblot

Given the limited knowledge about the diagnosis of bovine cysticercosis by immunoblot, the aim of this study was to assess the applicability of this test, identifying key peptides with diagnostic value. Immunoblot assays were performed using total larval antigen of Taenia crassiceps and 60 sera of positive bovines for cysticercosis (30 naturally and 30 experimentally infected with T. saginata eggs), 30 sera of negative bovines for cysticercosis and 30 sera of bovines with other diseases (fascioliasis, hydatidosis and tuberculosis). The peptides of greater diagnostic importance, in descending order of accuracy (%), were as follows: 6-8kDa (90.8%), 129-143kDa (74.2%), 99-105kDa (71.7%) and 14-19kDa (71.1%). Cross-reactions, due to fascioliasis and hydatidosis, were observed in the four intervals of peptides highlighted. The results demonstrate that the total antigen of T. crassiceps has peptides with a high diagnostic potential; therefore, the immunoblot is useful in the diagnosis of bovine cysticercosis.

Tendo em vista o conhecimento limitado sobre o diagnóstico da cisticercose bovina pelo immunoblot, o objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicabilidade desse teste, identificando os principais peptídeos com valor diagnóstico. Foram realizados ensaios de immunoblot, utilizando antígeno total de larva de Taenia crassiceps e 60 soros de bovinos positivos para a cisticercose (30 naturalmente e 30 experimentalmente infectados com ovos de T. saginata), 30 soros de bovinos negativos para a cisticercose e 30 soros de bovinos com outras patologias (fasciolose, hidatidose e tuberculose). Os peptídeos de maior importância diagnóstica, em ordem decrescente de acurácia (%), foram os seguintes: 6-8 kDa (90,8%), 129-143 kDa (74,2%), 99-105 kDa (71,7%) e 14-19 kDa (71,1%). Reações cruzadas, em decorrência da fasciolose e hidatidose, foram observadas nos quatro intervalos de peptídeos ressaltados. Os resultados demonstram que o antígeno total de T. crassiceps possui peptídeos com alto potencial diagnóstico, sendo, portanto, o immunoblot útil no diagnóstico da cisticercose bovina.

Lesões parasitárias encontradas em bovinos abatidos para consumo humano / Parasitic lesions observed in cattle slaughtered for human consumption

During a period of 28 months (January 2011-April 2013) periodical visits were made to four cattle slaughter houses to collect samples of lesions found in cattle slaughtered for human consumption. Three hundred and three lesions were collected, 25% of which were caused by six different parasites: The metacestodes of Echinocccus granulosus (hydatid cysts), Fasciola hepatica, the metacestodes of Taenia saginata (Cysticercus bovis), Oesophagostomum radiatum, Eurythrema coelomaticum, and Paramphistomum cervi. Gross and microscopic aspects of the lesions caused by these worms are profusely illustrated and a detailed description of both pathological aspects, gross and microscopic, are provide in the hopes that the neophyte veterinary meat inspector can benefit from them in the task of recognition and interpretation of the significance of these lesion both to human and animal health. In regard to the two latter objectives, the life cycle, and the pathogenicity to the animal and human hosts, and the destination of the affected carcass or organ in the line of inspection are discussed for each parasite.

Durante um período de 28 meses (janeiro 2011-abril 2013) foram feitas visitas periódicas a quarto abatedouros frigoríficos de bovinos para colher lesões regularmente encontradas em bovinos abatidos para consumo humano. Trezentas e três lesões foram colhidas, 25% das quais eram causadas por seis parasitas diferentes: o metacestoide de Echinocccus granulosus (cisto hidático), Fasciola hepatica, o metacestoide de Taenia saginata (Cysticercus bovis), Oesophagostomum radiatum, Eurythrema coelomaticum e Paramphistomum cervi. Os aspectos macro e microscópicos causados por esses vermes são profusamente ilustrados e uma descrição macro e microscópicadas lesões é fornecida na esperança de auxiliar o inspetor de carnes iniciante na tarefa de reconhecer e interpretar o significado dessas lesões tanto para a saúde animal quanto para a saúde humana. Com respeito a esses últimos objetivos, o ciclo evolutivo, e os efeitos nos hospedeiros animal e humano, e ainda a destinação da carcaça ou órgão afetado na linha de inspeção, são discutidos para cada parasita.

Prevalência de cisticercose em bovinos abatidos em matadouro-frigorífico sob inspeção federal em Minas Gerais / Measles prevalence in cattle slaughtered under sanitary inspection in Minas Gerais

Com o objetivo de pesquisar a prevalência de cisticercose foram estudados 402.177 bovinos, abatidos em matadouro-frigorífico sob inspeção federal, situado no triângulo mineiro/MG, durante os anos de 2000 a 2003. A prevalência encontrada foide 4,60 por cento, sendo a maior de 6,27 por cento no ano de 2001, e a menor, de 2,73 por cento, em 2003. A ocorrência de cisticercos degenerados(2,70 por cento) sobrepujou a de cisticercos viáveis (1,90 por cento), com exceção do ano de 2000 (2,97 por cento). Os cisticercos encontrados aolongo dos anos estavam distribuídos em maior quantidade na cabeça (55,51 por cento), seguida do coração (42,70 por cento), língua (1,10 por cento)e carcaça (0,69 por cento). Houve variação sazonal relacionada com a freqüência de animais infectados com C. bovis. Considerando-se a alta freqüência de cisticercose em nosso meio e os prejuízos relacionados com a saúde pública e o comércio de carnes,fica claro que esta zoonose é um problema grave que não pode ser desconsiderado pelo segmento político-social do país,necessitando de medidas efetivas de controle e erradicação.

Between 2000 and 2003, 402.177 slaughtered bovines from an abattoir in Minas Gerais, under sanitary inspection, wereexamined to research measles prevalence. The prevalence was 4.60 percent, being greater in 2001 (6.27 percent) and smaller in 2003(2.73 percent). The degenerate condition was predominant (2.70 percent), except for the year 2000 (2.97 percent). The cisticerci was distributed inhead (55.51 percent), heart (42.70 percent), tongue (1.10 percent) and carcass (0.69 percent). There was sazonal variation in infected animals. Due tohigh measles prevalence and the public health hazards and beef trade, it’s clear that this zoonosis it´s a concern problem thatcan´t be denay by politic-social segment and requires efective control and erradication methods.

Diferenciacão específica entre Taenia saginata e Taenia solium por ensaio de PCR e duplex-PCR / Specific discrimination between Taenia saginata and Taenia solium by one step PCR assay and duplex-PCR

Este estudo teve como objetivo a padronizacão de protocolos e a selecão de novos primers para a identificacão espécie-específica de Taenia saginata e Taenia solium através da reacão em cadeia da polimerase (PCR) e duplex-PCR. Inicialmente, foram recuperadas seqüências depositadas no GenBank (acesso nº AB020399 para T. saginata e nº AB020395 para T. solium) referentes ao gene da subunidade maior do ribossomo (LSU RNAr) de tenídeos. A partir do alinhamento das seqüências, um primer genérico denominado TBR-3 (5'-ggcttgtttgaatggtttgacg- 3') foi selecionado de região conservada e, de diferentes regiões semi-conservadas, os primers específicos TBR-4 para T. saginata (5'-cgactcatgaagataaacaaggt-3') e TBR-5 (5'-cggtcgaacagaccataaatct-3') e TBR-6 (5'-gctactacacctaaattctaacc- 3') para T. solium. Os primers foram avaliados quanto à especificidade através da PCR empregando-se DNA total (DNAt) de amostras de cisticercos e proglotes dos parasitos, previamente identificadas por critérios morfológicos. O par de primers TBR-3/TBR-4 permitiu a amplificacão específica do fragmento esperado de 328 pb a partir do DNAt de T. saginata. Os pares TBR-3/TBR-5 e TBR-3/TBR-6 permitiram a amplificacão, respectivamente, dos fragmentos específicos de 310pb e 286pb a partir do DNAt de T. solium. A identidade dos produtos de PCR foi comprovada comparando-se a seqüência dos amplicons obtidos às seqüências de referência do gene LSU RNAr registrado no GenBank (nº AB020399 e nº AB020395). As reacões apresentaram sensibilidade para deteccão de até 1fg do DNAt de T. solium e 0,2fg do DNAt de T. saginata. A combinacão dos primers TBR-3/TBR-4 e TBR3/TBR-6 e o tamanho dos fragmentos gênicos obtidos permitiram o estabelecimento de ensaios de duplex-PCR, eficaz na deteccão simultânea do DNA de T. saginata e T. solium em sistema único de reacão. Os primers utilizados não geraram qualquer produto de amplificacão cruzada quando testados com DNAt de Taenia hydatigena, Taenia taeniaeformis, Hymenolepis diminuta, Anoplocephala magna, Paranoplocephala mamillana e Moniezia expansa, nem frente ao DNAt dos hospedeiros Homo sapiens, Bos taurus e Sus scrofa.