Metabolismo de la glucosa durante la intoxicación con tiocetamida / The metabolism of the glucose during poisoning with thioacetamide

Se describe un método usando el cual se logró purificar parcialmente la glucosa-6-fosfatasa de envoltura nuclear (E.N.) de hígado de rata, mediante el cual se incrementó unas 300 veces la actividad específica de la enzima y se recuperó aproximadamente el 1,2% de la actividad presente en el homogeneizado. El tratamiento con tioacetamida (TAA) no modificó el factor de purificación, el porcentaje de recuperación ni el KM para la glucosa-6-P pero sí disminuyó en cerca de un 50% la VMax de la glucosa-6-Fosfatasa. La administración de TAA produjo glucosuria y fosfaturia sin hiperglicemia ni incremento en la eliminación, Na+, K+, así como tampoco cambios en el pH urinario. De igual manera se observó un efecto hipotensor y una disminución en la velocidad de filtracion glomerular (VFG) de aproximadamente un 42%. La transferencia máxima y el umbral renal para la glucosa fueron disminuidos en aproximadamente un 40 y 75% respectivamente luego de la administración de la droga. Los valores cinéticos del transportador renal de glucosa, dependiente del Na+, también fueron afectados por la administración de TAA, caracterizados por una disminución del KM, la Vmax y del pico de captación de glucosa por vesículas de borde ciliado renal. Por último, se observó en rebanadas de hígado de ratas tratadas con TAA un incremento de 3,5 veces la capacidad neoglucogénica. De los resultados anteriores se concluye que la TAA produce glucosa renal afestando el transportador Na+ glucosa, que la glicemia se mantiene constante a pesar de la glucosuria gracias al incremento en la neoglucogénesis hepática y que la glucosa-6-fosfatasa..

Efecto de la Tioacetamida sobre la envoltura nuclear de las células de la corteza renal de la rata / Thioacetamide effects on the nuclear envelope from rat kidney cortex

Se determinó el efecto que produce la administración de Tioacetamida (TAA) sobre la composición y propiedades de los núcleos y envoltura nuclear (EN) purificados de la corteza renal (CR) de ratas, en relación a preparaciones obtenidas de animales controles a través de un método para la obtención de la EN, cuya pureza relativa fue analizada por microscopía electrónica y métodos enzimáticos. En la fracción nuclear de los animales tratados con TAA, se observaron las siguientes alteraciones: aumento en la concentración de RNA y fosfolípidos (pg/Núcleo) en un 77%, un leve incremento de DNA (pg/Núcleo) en un 17%. Por otro lado la concentración de proteínas (pg/Núcleo) permaneció constante. En la EN se encontró que la concentración de DNA disminuyó en un 68% y la de fosfolípidos en un 37%; en cambio la concentración de RNA aumentó discretamente en un 11%. Se encontraron importantes diferencias al estudiar el patrón polipeptídico obtenido al realizar electroforesis en geles de poliacrilamida de EN preparadas a partir de hígado y CR de ratas controles y tratadas con TAA. La actividad específica de la enzima glucosa-6-fosfatasa en los núcleos y EN de los animales tratados con TAA disminuyó en 54% y 43% respectivamente. En los estudios cinéticos se encontró que por efecto de la droga de la Vmax disminuyó significativamente sin alteración del Km. Se discuten las implicaciones de estos resultados

Glucose-6-phosphatase Activity and Ultrastructures in Hepatocytes of Thioacetamide-treated Mice

To investigate the earlier cellular alterations(Glucose-6-Pase activity and morphologic features) caused by a hepatotoxin, thioacetamide (TAA), a single dose of the agent (200mg per kg of body weight) was given intraperitoneally to mice, which were sacrificed at intervals of 4, 8 or 16 hours after corresponding treatments. For histochemical study of glucose-6-phosphatase (G6Pase) activity, unfixed frozen sections were incubation of the Wachstein and Meisel medium and stained. The smallest pieces of liver tissue were fixed in glutaraldehyde and osmic acid, and stained by the routine electron-microscopic techniques. Some pieces of liver were fixed in 10% formalin, embedded in paraffin, and stained with hematoxylin and eosin. There was a rapid and progressive loss of G6Pase activity, in an orderly time sequence, in the experimental group. There were also morphologic changes: loss of cytoplasmic basophilia, cell infiltration and necrosis in the centrilobular and intermediate zones, and an increase of sER, small vesicles and ribosomes in the cytoplasm of hepatocytes, the marked changes of nuclei and nucleoli, and a slight increase of lipid droplets in the cytoplasm at 16 hours after intoxication. The correlation between these cellular alterations was discussed in view of mechanisms in the hepatotoxic action.

Glucose-6-phosphatase Activity and Ultrastructures in Hepatocytes of Thioacetamide-treated Mice

To investigate the earlier cellular alterations(Glucose-6-Pase activity and morphologic features) caused by a hepatotoxin, thioacetamide (TAA), a single dose of the agent (200mg per kg of body weight) was given intraperitoneally to mice, which were sacrificed at intervals of 4, 8 or 16 hours after corresponding treatments. For histochemical study of glucose-6-phosphatase (G6Pase) activity, unfixed frozen sections were incubation of the Wachstein and Meisel medium and stained. The smallest pieces of liver tissue were fixed in glutaraldehyde and osmic acid, and stained by the routine electron-microscopic techniques. Some pieces of liver were fixed in 10% formalin, embedded in paraffin, and stained with hematoxylin and eosin. There was a rapid and progressive loss of G6Pase activity, in an orderly time sequence, in the experimental group. There were also morphologic changes: loss of cytoplasmic basophilia, cell infiltration and necrosis in the centrilobular and intermediate zones, and an increase of sER, small vesicles and ribosomes in the cytoplasm of hepatocytes, the marked changes of nuclei and nucleoli, and a slight increase of lipid droplets in the cytoplasm at 16 hours after intoxication. The correlation between these cellular alterations was discussed in view of mechanisms in the hepatotoxic action.