Exposure of Toxocara canis eggs to Purpureocillium lilacinum as a biocontrol strategy: an experimental model evaluation / Exposição de ovos de Toxocara canis a Purpureocillium lilacinum como estratégia de biocontrole: uma avaliação em modelo experimental

Abstract Purpureocillium lilacinum is a nematophagous fungus used in biological control against some parasites, including Toxocara canis. This study researched the infectivity of embryonated T. canis eggs after exposure to the fungus P. lilacinum. T. canis eggs were exposed to P. lilacinum for 15 or 30 days and subsequently administered to Swiss mice (n=20). Control group consisted of mice who received T. canis embryonated eggs without fungal exposure. Forty-eight hours after infection, heart, lung, and liver from animals of each group were collected to assess larval recovery. The organs of mice that received embryonated eggs exposed to the fungus showed a lower average larval recovery (P<0.05) suggesting that exposure of T. canis eggs to P. lilacinum was able to reduce experimental infection. Under the evaluated conditions, the interaction time between the fungus and the parasite eggs was not a significant factor in larvae recovery. P. lilacinum may be considered a promising T. canis biological control agent. However, further studies are needed to determine a protocol for the use of this fungus as a biological control agent.

Resumo Purpureocillium lilacinum é um fungo nematófago com potencial para uso no controle biológico de parasitos, incluindo Toxocara canis. Este estudo pesquisou a infectividade de ovos de T. canis embrionados após exposição ao fungo P. lilacinum . Ovos de T. canis foram expostos ao fungo por 15 ou 30 dias e subsequentemente administrados a camundongos Swiss (n=20). O grupo controle consistiu de camundongos que receberam ovos embrionados do parasita sem exposição ao fungo. Quarenta e oito horas após a infecção, coração, pulmão e fígado dos camundongos foram coletados para avaliar a recuperação larval. Os órgãos dos animais que receberam ovos embrionados expostos ao fungo apresentaram menor média de recuperação larval (P<0,05) do que os infectados com ovos sem exposição ao fungo, sugerindo que a exposição dos ovos de T. canis a P. lilacinum foi capaz de reduzir a infecção experimental. Nas condições avaliadas, o tempo de interação entre o fungo e os ovos do parasito não foi um fator significativo na recuperação das larvas. P. lilacinum pode ser considerado um promissor agente de controle biológico de T. canis, no entanto, mais estudos são necessários para avaliar o emprego deste fungo como um agente de controle biológico.

In vitro effect of Chrysosporium indicum and Chrysosporium keratinophylum on Toxocara canis eggs / Efecto in vitro de Chrysosporium indicum y Chrysosporium keratinophylum sobre huevos de Toxocara canis

The degree of antagonism exercised by fungi on geohelminth development varies according to the morphological alterations caused by different fungal species. Saprophytic fungi may exert ovicidal or ovistatic effects. The aim of this study was to apply scanning electron microscopy (SEM) to observe the action of two soil saprophytic species of Chrysosporium (C. indicum and C. keratinophylum) on Toxocara canis eggs. The fungal strains to be tested were incubated for 28 days at 28 °C in 2% water agar with a suspension of unembryonated T. canis eggs. A suspension of T. canis eggs in 2% water agar was used as control group. The assay was done in triplicate for each fungus and the control group. SEM observations were performed on the 4th, 7th, 14th, 21st, and 28th day after inoculation. The effect of the fungi on eggs was evaluated in accordance with the alterations observed on the surface and the changes in the normal characteristics of the eggs. Hyphae around the eggs, appresoria penetrating the shell and changes in the typical egg membrane were observed in this assay. Type 3 effect (alterations that occur both in the embryo and the shell, and hyphal penetration of the eggs) was the prevalent effect. SEM allowed us to observe clearly the morphological alterations in T. canis eggs due to the effect of C. indicum and C. keratinophylum. Both saprophytic species of Chrysosporium alter the egg structure and alterations increase as exposure increases.

El grado de antagonismo ejercido por los hongos sobre el desarrollo de los geohelmintos depende de la especie fúngica y las alteraciones morfológicas que causan. Los hongos saprofitos pueden tener efecto ovicida u ovistático sobre los huevos. El objetivo fue aplicar la microscopía electrónica de barrido (MEB) para observar la acción de 2 especies de Chrysosporium (C. indicum y C. keratinophylum) saprofitas de suelos, sobre huevos de Toxocara canis.Las especies a ensayar se sembraron en agar agua al 2% con una suspensión de huevos no embri-onados de T. canis y se incubaron 28 días a 28 °C. Como grupo control se utilizó una suspensión de huevos de T. canis en agar agua al 2%. El ensayo se realizó por triplicado para cada hongo y el grupo control. Las observaciones con MEB se realizaron a los 4, 7, 14, 21 y 28 días de incubación. La acción de los hongos se evaluó según las alteraciones en la superficie y los cambios en las características normales de los huevos. En este ensayo se observaron: hifas rodeando los huevos, appresorios penetrando la cubierta y cambios en la membrana característica del huevo, prevaleciendo el efecto tipo 3 (alteraciones que se producen tanto en el embrión como en la cubierta y penetración de hifas al interior de los huevos). La aplicación de la MEB permitió observar claramente que las 2 especies de Chrysosporium saprofitas de suelos, afectan el normal desarrollo de los huevos de T. canis, alteran su estructura y las alteraciones aumentan con el tiempo de exposición.

Destruição de ovos de Toxocara canis pelo fungo nematófago Pochonia chlamydosporia / Destruction of Toxocara canis eggs by the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia

INTRODUÇÃO: Toxocara canis é um ascarídeo parasita do intestino delgado de cães, causador da larva migrans visceral em seres humanos. MÉTODOS: Com o objetivo de demonstrar a eficácia do fungo Pochonia chlamydosporia sobre ovos de Toxocara canis em condições laboratoriais, foi montado ensaio experimental em placas de Petri com ágar-água 2 por cento. RESULTADOS: Houve atividade ovicida de 43,8 por cento (p<0,01) do grupo tratado em relação ao grupo controle durante os intervalos estudados. CONCLUSÕES: Os resultados demonstrados no presente trabalho sugerem a empregabilidade de Pochonia chlamydosporia como uma alternativa de controle biológico dos ovos embrionados de Toxocara canis.

INTRODUCTION: Toxocara canis is an ascarid parasite of the small intestine of dogs that causes visceral larva migrans in humans. METHODS: With the aim of demonstrating the effectiveness of the fungus Pochonia chlamydosporia on Toxocara canis eggs under laboratory conditions, a trial was set up in Petri dishes with 2 percent agar-water. RESULTS: There was ovicidal activity of 43.8 percent (p < 0.01) in the treated group in relation to the control group over the periods studied. CONCLUSIONS: The results from the present study suggest that Pochonia chlamydosporia can potentially be used as an alternative biological control for embryonated Toxocara canis eggs.