The mucosal adjuvanticity of two nontoxic mutants of Escherichia coli heat-labile enterotoxin varies with immunization routes

Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LT), which causes a characteristic diarrhea in humans and animals, is a strong mucosal immunogen and has powerful mucosal adjuvant activity towards coadministered unrelated antigens. Here we report the different mucosal adjuvanticity of nontoxic LT derivatives, LTS63Y and LTdelta110/112, generated by immunizing through two different mucosal routes. Intragastric (IG) immunization with Helicobacter pylori urease alone resulted in poor systemic IgG and IgA responses and no detectable local secretory IgA, but IG co-immunization with urease and LTdelta110/112 induced high titers of urease-specific local secretory IgA and systemic IgG and IgA, comparable to those induced by wild-type LT. LTS63Y showed far lower adjuvant activity towards urease than LTdelta110/112 in IG immunization, but was more active than LTdelta110/112 in inducing immune responses to urease by intranasal (IN) immunization. LTdelta110/112 predominantly enhanced the induction of urease-specific IgG1 levels following IG immunization, whereas LTS63Y induced high levels of IgG1, IgG2a and IgG2b following IN immunization. In addition, quantitative H. pylori culture of stomach tissue following challenge with H. pylori demonstrated a 90-95% reduction (p < 0.0002) in bacterial burden in mice immunized intranasally with urease using either mutant LT as an adjuvant. These results indicate that the mechanism(s) underlying the adjuvant activities of mutant LTs towards coadmnistered H. pylori urease may differ between the IN and IG mucosal immunization routes.

Aspectos metodologicos del diagnóstico y estudio de la infección por Helcobacter pylori / Methodology aspect of diagnostic and study Helicobacter Pylori infection

Inicialmente la identificación de la infección Campylobacter pylori se basó en el exámen de las biopsias de la mucosa gástrica. Estas muestras fueron utilizadas tanto para preparar las secciones histológicas para su colaboración diferencial, como para visualizarlas bacterias bajo el microscopio de luz ó proveer tejido para los cultivos. Estas metodologías tienden a tener demanda de personal bien entrenado y/o tiempo prolongado para el diagnóstico y no son técnicas ideales para estudios a gran escala

Diagnóstico microbiológico de helicobacter pylori / Microbiology diagnosis of helicobacter pylori infection

Actualmente se dispone de una variedad de métodos que permiten el diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori o la evaluación de la erradicación de la bacteria después del tratamiento. Los métodos microbiológicos requieren de la toma de biopsia gástrica. Los Gram resultan rápidos de realizar, económicos, pero necesitan personal entrenado. La prueba rápida de ureasa es sencilla, relativamente económica y permite el diagnóstico en la sala de endoscopia. El cultivo es un método más laborioso, costoso en tiempo y materiales, requiere personal entrenado, sin embargo, imprescindible cuando se necesitan pruebas de suceptibilidad a antimicrobianos. La elección de una u otra prueba dependerá de los recursos disponibles y del objetivo de la investigación

Desarrollo de una prueba de ureasa para la detección de helicobacter pylori y su validación comio test diagnostico. estudio multicentrico / Development of the urease method for the detection of Helicobacter pylori and its value as a diagnostic test Multicentric study

Introducción: Dados los costos de los test comerciales de Helicobacter Pylori (HP), y la necesidad de su investigación rutinaria por la importancia de la infeción por las implicaciones en las úlceras gástricas, se desarrollaron dos métodos de detección por ureasa propios de bajo costo. Pregunta de invstigación: ¿culaes son los factores predictivos de los test desarrolados por la detección de HP?. Objetivos: (1) Determinar los valores de test diagnóstico de los métodos de ureasa desarrolados, frente a un gold estándard compuesto. (2) Desarrollar un modelo predictivo, tomando en cuenta las principales variables clínicasDiseño: Test diagnóstico. Ambiente: Unidades de Endoscopia de los Hospitales: Universitario, Gastroenterológico de La Paz, Hobrero N§ 1, Caja Petrolera de Salud. Pacientes: 117 consecutivos (previo cálculo de tamaño muestral), se acudieron por requerimiento de endoscopia. Material y Métodos: Los pacientes fueron sometidos a ambos test de ureasa, y a un gold estándar compuesto de CLO test comercial, cultivo, tinción de Gram, histología y detección de anticuerpos IgG ELISA anti HP. Todos ellos fueron sometido a un cuestionario, además de registrar los datos sociodemográficos y clínico - endoscópicos. Anális estadístico: Se realizaron los cálculos de los valores de test diagnóstico, utilizando un algoritmo de gold standar. Análisis exploratorio uni, bi, y multivariado se realizó con las 28 covariables sociodemográficas, clínicas y endoscópicas, utilizando los métodos apropiados. Para el diagnóstico de confundentes y modificadores de efecto se utilizó un modelo de regresión logística. Resultados: Los valores encontrados fueron similares para ambas test de ureasa. Trabajando bajo una prealencia (Odds pre test) de 1.33:1, los valores fueron: Sensibilidad 80 porciento, Especificidad, 86 porciento, valor predictivo positivo 0,89; Valor Predictivo negativo 0,77; Likelihood Ratio positivo 5.76; Likelihood Ratio negativo 0,233: la probabilidad post test fueron de 0,88. Los valores contra test comercial fueron solo levemente inferiores. Ajustados por confundentes y modificadores, las variables predictorias fueron e tiempo de evolución de la enfermedad, el estado socioeconómico, y la interaciónes del estado socioeconómico con la evolución. Conclusiones: Los métodos de ureasa desarrollados pueden ser usados en la práctica diaria sin érdida apreciable de la capacidad diagnóstica.