Detecção molecular e resistência a antimicrobianos no grupo V. fluvialis - V. furnissii / Molecular detection and antimicrobial resistance in group V. fluvialis - V. furnissii

Vibrio fluvialis é um microorganismo que provoca a gastroenterite muito semelhante à cólera, mas também há relatos de casos extra-intestinais como sepse, ferida, peritonite e celulite hemorrágica e encefalite. Acredita-se que a infecção por esse microorganismo esteja vinculada ao consumo de peixes crus ou mal cozidos contaminados e / ou frutos do mar. A identificação dessa bactéria por métodos fenotípicos continua a ser um problema devido à sua grande semelhança com Aeromonas hydrophila e V.furnissii; por isso, a utilização de uma ferramenta de diferenciação entre essas espécies é importante. Nas últimas décadas, o aumento da resistência aos antimicrobianos tem sido um fator preocupante, porque ela interfere na escolha dos medicamentos para o tratamento eficaz e há uma necessidade de rápida produção de novos antibióticos. Ambientes costeiros e estuários estão em perigo de serem contaminados por esgoto, que pode conter drogas que agem de forma seletiva, permitindo o desenvolvimento de resistência aos antimicrobianos. Vários estudos demonstraram que estirpes clínicas de V. fluvialis são resistentes a múltiplas drogas. Objetivos - Desenvolver um marcador molecular baseado no 16S rDNA capaz de detectar o grupo V. fluvialis-V. furnissii, e avaliar a susceptibilidade a antibióticos destas espécies, principalmente a partir de amostras ambientais. Métodos - Após a elaboração dos iniciadores a partir do alinhamento das espécies do gênero Vibrio, foram utilizadas cepas identificadas fenotipicamente como V. fluvialis e de V. furnissii para a sua detecção molecular. O perfil de susceptibilidade a antibióticos pelo método da disco-difusão foi realizada, assim como a investigação molecular da presença do elemento SXT e de seus genes de resistência a antimicrobianos. Resultados: Com a utilização dos iniciadores desenvolvidos foi possível confirmar corretamente as espécies. Observou-se alta porcentagem de resistência a ampicilina e cefalotina, sendo que 65,9por cento...

Vibrio fluvialis is a microorganism that causes gastroenteritis very similar to cholera, however there are also reports of extraintestinal cases as sepse, skin wounds, peritonitis and hemorrhagic cellulitis and cerebritis. It is believed that infection by this organism is linked to the consumption of raw or undercooked contaminated fish and / or seafood. Identification of this bacteria by phenotypic methods remains a problem due to its great similarity with Aeromonas hydrophila and V.furnissii, therefore the use of a tool to differentiate these species is important. In recent decades, increasing antimicrobial resistance has been a concerning factor because it interferes in the choice of drugs for effective treatment and there is a need for rapid production of new antibiotics. Coastal and estuarine environments are in danger of being contaminated by sewage, which may contain drugs that will act selectively, allowing the development of antimicrobial resistance. Several studies have demonstrated that clinical strains of V. fluvialis are resistant to multiple drugs. Objectives - To develop a 16S rDNA - molecular marker able to detect the group V. fluvialis-V.furnissii, and to evaluate the antibiotic susceptibility of this species mainly from environmental samples. Methods - After the development of primers from alignment of the genus Vibrio strains phenotypically identified as V. fluvialis and V. furnissii were used for their molecular identification. The profile of antibiotic susceptibility was performed by the disk diffusion method, and the molecular investigation of the presence of the SXT element and their antimicrobial resistance genes. Results - The primers developed were able to confirm correctly the species. A high percentage of resistance to ampicillin and cephalothin was observed, V. fluvialis and V. furnissii showed resistance to at least two of the antibiotics used, 65.9 per cent and 43.24 per cent respectively. Only in one strain of...

Perfil de susceptibilidade a antimicrobianos de bactérias isoladas em diferentes sistemas de cultivo de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) / Profile of antimicrobial resistance in bacterial populations recovered from different Nile tilapia (Oreochromis niloticus) culture systems

Caracterizaram-se as populações bacterianas isoladas de três sistemas de cultivo de tilápias, sem utilização prévia de antimicrobianos. No sistema 1 usou-se tanque de alvenaria com arraçoamento, no sistema 2, tanque de terra com arraçoamento e no sistema 3, tanque de terra com adubação orgânica. Posteriormente, foi verificado o perfil qualitativo de resistência a antimicrobianos de 98 amostras bacterianas. Membros da família Vibrionaceae predominaram nos três sistemas analisados. Observou-se elevado número de bactérias resistentes principalmente à ampicilina e à eritromicina. Bactérias resistentes à norfloxacina e à gentamicina não foram freqüentes e cerca de 50 por cento das amostras dos isolados bacterianos foram resistentes à tetraciclina. Dentre as amostras testadas, 96 por cento apresentaram resistência simultânea a dois ou mais antimicrobianos (MAR>0,2). O índice MAR médio para os três sistemas de criação foi 0,4, e foram mesmo considerados fontes de risco para disseminação de bactérias resistentes

Bacterial populations from different tilapia culture system with no antimicrobial use were characterized. Concret pond and commercial feed, land pond and commercial feed, and land pond and animal manure were used in systems I, II and III, respectively. Ninety-eight bacterial strains were subjected to sensitivity testing. Members of Vibrionaceae were the most prevalent in all systems analysed. The most bacterial strains were resistant to ampicillin and erithromicin, but resistance to norfloxacin and gentamicin were uncommon. A half to bacterial isolates was resistant to tetracycline. From the 98 bacterial isolates, 96 percent were resistant to two or more antimicrobials. The multiple antimicrobial resistance index was determined and it was similar for all systems analyzed (Mar= 0.4), indicating a high risk source for multiple antibiotic resistance

Vibrio spp. isolados de mamíferos marinhos capturados na região litorânea do Sudeste ao Sul do Brasil / Vibrio spp. isolated from marine mammals captured in coastal regions from southwestern to southern Brazil

Avaliou-se a incidência de Vibrio spp. a partir de lesões superficiais em mamíferos marinhos encalhados ou capturados em redes de pesca nas regiões litorâneas do Sudeste (Rio de Janeiro) e Sul (RS) do Brasil. Foram coletadas 198 amostras, pelas instituições de pesquisa DEENSP, GEMARS e Ceclimar, as quais foram enviadas ao Labent/IOC/FIOCruz, onde foram submetidas ao enriquecimento em Agua Peptonada Alcalina (APA) adicionada de 1 por cento e 3 por cento de NaCl e in-cubadas a 37°C por 18-24 horas. Em seqüência foram semeadas em meio Agar Tiossulfato Citrato Bile Sacarose (TCBS) e as colônias suspeitas submetidas à caracterização bioquímica. Foram isoladas 108 cepas bacterianas, destacando-se Vibrio alginolyticus, V. parahaemolyticus, V. vulnificus e V. fluvialis como os principais patógenos isolados. Os resultados obtidos apontam para a necessidade de implementar atividades de vigilância e monitorização bacteriológica, particularmente de espécies selvagens, e reforçar os programas de proteção ambiental em casos de mamíferos marinhos ameaçados de extinção.

In the present investigation was evaluated the incidence of Vibrio spp. from superficial lesions at marine mammals beached or captured by fishing net in the southwestern (RJ) and southern (RS) coastal regions of Brazil. One hundred and ninety eight swabs were collected by DEENSP, GEMARS and Ceclimar institutes and sent to Labent/IOC/FIOCruz where the samples were submitted to enrichment in Alkaline Peptone Water (APW) added with 1 percent and 3 percent of sodium chloride (NaCl) incubated at 37°C for 18-24 hours. After the samples were streaked onto Thiossulfate Citrate Bile Sucrose Agar (TCBS), the suspected colonies were submitted to biochemical characterization. The results showed 108 strains, and Vibrio alginolyticus, V. parahaemolyticus, V. vulnificus and V. fluvialis were the main pathogens isolated. These results appoint the importance of surveillance and microbiological monitoring accomplishment and reinforcement of environmental protective programs applied to marine mammals endangered with extinction.

Microbiological and chemical changes in freshwater prawn ("Macrobrachium rosembergii") stored under refrigeration

Microbiological and chemical changes were evaluated in freshwater prawn stored under refrigeration at 0ºC and 5ºC during 10 days, with special emphasis on indole production as chemical spoilage indicator. The total psychrotrophic and indole positive microflora were mainly mesophilic, with indole positive microorganisms being less than 10(per cent) of the total microflora after 10 days storage under refrigeration. Bacteria from "Enterobacteriaceae" and "Vibrionaceae" families prevailed among the isolated indole positive strains. The use of the Most Probable Number-MPN method, using tryptone broth as culture medium, was the most reliable approach for the quantitative evaluation of the indole positive microflora. The stored samples showed increases in pH, L-tryptophan and total volatile bases (TBV), which were more intensive at 5ºC. The psychrotrophic counts and TVB values of samples stored at 0ºC werw lower than the recommended limits (1.0E+7 CFU/g and 30 mg N/100g, respectively), even after 10 days storage. However, in samples stored at 5ºC, these values were reached after 10 and 5 days, respectively. The presence of indole in levels above the limit recommended by FDA/USA (25(micro)g/100g) was confirmed in only one sample, suggesting that this substance, alone wouldn't be a good indicator of freshwater prawn quality stored under refrigeration

Bacterial contamination of bottle milk in infants under 6 months in Children's Hospital, Bangkok, Thailand.

The bacterial contamination of bottle milk samples obtained randomly from 500 infants under 6 months of age who came to the Out-patient Department of Children's Hospital Bangkok was determined by collecting bottle milk samples prepared at home following interview of their caretakers after obtaining their consent. Bacterial contamination was found in 91.8% (459/500) of bottle milk samples. Among the positive samples, 82.8% (380/459) contained enteric bacteria, another 17.2% were unidentified bacteria. The dominant enteric bacteria isolated from bottle milk were Klebsiella spp (56.6%), Enterobacter spp (41.3%), Aeromonas spp (14.4%), E. coli (13.4 %) and Vibrio cholerae non 0-1 (1.8%). Isolated E. coli were further identified as enteropathogenic E. coli (7.8%, 4/51) and enterotoxigenic E. coli (3.9%, 2/51). About 74% of the contaminated bottle milk contained one type of bacteria, 23.7% had two types and 2.3 % had 3 or more types of bacteria. A level of bacterial contamination greater than the US government limited number (USGLN 2x10(4) CFU/ml) was found in 86.4% of total examined samples (432/500) [geometric mean (GM) of 2.9 x 10(6) CFU/ml]. About 66% (333/500) of bottle milk samples had coliforms greater than the USGLN (1 x l0(2) CFU/ml) with GM of 1.3 x 10(4) CFU/ml. Therefore, in the preparation of bottle milk, feeding practice should be emphasized in every setting of maternal-child health care and promotion of breast-feeding should be encouraged by the health personnel.

Numerical taxonomy of vibrionaceae isolated from bivalves and fishes in Valparaíso coasts Chile

Se realizó un estudio taxonómico de 123 cepas de la familia vibronaceae aisladas desde bivaldos y peces en las costas de Valparaíso. Todas las cepas fueron caracterizadas con 86 test fenotípicos que se agruparon usando el coeficiente Ssm y el análisis de la unión de UPGMA. Las especies fueron agrupadas en tres fenones con un nivel de similitud del 80 porciento. Estas especies fueron identificadas como aeromonas hydrophila, vibrio sp. y plesiomonas shigelloides

Antimicrobial and mercury chloride resistance in vibrio isolates from marine fish of the southeastern brazilian region

Foram analisadas 199 amostras de víbrios isolados de trato intestinal de peixes marinhos, representados pela tainha (Mugil sp.) e corvina (Micropogon sp.) capturados em águas de baía e da orla litorânea da cidade do Rio de Janeiro, compreendendo V. anguillarum (52), V.haveyi (41), V. proteolyticus (39), V. campbelli (13) V. alginlyticus (10), V. splendidus (8), V. marinus (2), V.logei (1), V. parahaemolyticus (1) e Vibrio sp. - halofílico (32). O antibiograma, para oito drogas e o resistograma ao cloreto de mercúrio apontaram a taxa de 96,4 por cento para a presença de marcadores, congregando os percentuais de 77,0 por cento para a resistência antimicrobiana e de 21,8 por cento, para aquela associada ao Hg. A multirresistência (>ou = 3 marcos) foi significativa (p<0,05) na ordem de 71,0 por cento, bem como a incidência de fenótipo Hgr nas cepas multirresistentes (64,2 por cento), englobando apenas aquelas advindas do pescado corvina. Os marcos Su e Ap, além de Sm mostraram-se em destaque no cômputo gera e tambem no conjunto de amostras resistentes ao Hg. Indistintamente de espécie, a totalidade das culturas revelou a presença de pelo menos um marcador, excetuando V.parahaemolyticus. A conjugaçäo de 28 amostras de víbrios com cepas de Escherichia coli K12 revelou a transferência de marcadores em 71,4 por cento dos experimentos. Transconjugantes para Su, Sm, Km e Ap foram observados a partir das culturas doadoras de V.anguillarum e V.harveyi. Näo foram isoladas colônias transconjugantes para o marco Hg. Os resultados indicam a associaçäo entre esses dois marcadores nas amostras de víbrios, possivelmente, em consequência do processo de evoluçäo dos marcadores de resistência no bioma marinho

Identificación de bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, oxidasas positivos / Identification of Gram-negative, facultatively anaerobie, oxidase-positive bacilli

Se realizó la identificación de 100 cepas de bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, oxidasas positivos, aisladas de diferentes productos patológicos humanos por métodos bioquímicos convencionales. Del total de las cepas estudiadas 1 correspondió al genero Vibrio, 66 al género Aeromonas y 33 al género Plesiomonas. Se destaca la importancia de establecer estudios de vigilancia de estos microorganismos para investigar su circulación en nuestro medio

Gastrenterite humana associada ao Vibrio fluvialis no Recife / Human gastroenteritis associated with Vibrio fluvialis in Recife

Tendo em vista o pequeno número de relatos de gastrenterite a víbrios no Brasil, resolveu-se relatar um caso de enteroinfecçäo humana, onde apenas o Vibrio fluvialis foi recuperado das fezes do paciente, na ausência de qualquer outro enteropatógeno. Discutiram-se os principais aspectos clínicos, epidemiológicos e microbiológicos relacionados a esse microorganismo. Trata-se, provavelmente, do primeiro relato de gastrenterite humana a Vibrio fluvialis no País