ABSTRACT
A novel, disposable-bag bioreactor system that uses wave action for mixing and transferring oxygen was evaluated for BHK 21 C13 cell line growth and Aujeszky's disease virus (ADV) production. Growth kinetics of BHK 21 C13 cells in the wave bioreactor during 3-day period were determined. At the end of the 3-day culture period and cell density of 1.82x10(6) cells ml-1, the reactor was inoculated with 9 ml of gE- Bartha K-61 strain ADV suspension (10(5.9) TCID50) with multiplicity of infection (MOI) of 0.01. After a 144 h incubation period, 400 ml of ADV harvest was obtained with titre of 10(7.0) TCID 50 ml-1, which corresponds to 40,000 doses of vaccine against AD. In conclusion, the results obtained with the wave bioreactor using BHK 21 C13 cells showed that this system can be considered as suitable for ADV or BHK 21 C13 cell biomass production.
Subject(s)
Animals , Biomass , Bioreactors , Cell Culture Techniques/instrumentation , Cell Line , Cricetinae , Disposable Equipment , Herpesvirus 1, Suid/growth & development , Virus Cultivation/instrumentationABSTRACT
El presente trabajo, se realizó en el laboratorio de Virología del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, México, D.F. Los objetivos fueron: encontrar las condiciones óptimas para la fijación y tinción de las placas virales producidas por los virus herpes simple tipo 1 y sincitial respiratorio: Ambos virus, fueron propagados en monocapas de células Vero y se observaron a diferentes tiempos. Para la fijación de las monocapas infectadas se probaron cinco sustancias: formaldehído, etanol, metanol, acetona y éter-metanol y se tiñeron con tres colorantes: Giemsa, Wrigth y cristal violeta. Los mejores resultados se obtuvieron al usar éter al 5 por ciento en metanol como fijador y Giemsa como colorante. El tiempo más corto en que se observó el efecto citopático fue: 18 h para el virus sincitial respiratorio y 15 h para el virus herpes simple. por lo que el uso de estas sustancias, facilitó la visualización del efecto citopático en tiempos breves